康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠患側(cè)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣的影響及其與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系.pdf

1、目的：腦缺血是危害人類健康的常見病、多發(fā)病，患者常有相應(yīng)的運(yùn)動(dòng)、感知覺及學(xué)習(xí)記憶功能障礙，其中學(xué)習(xí)記憶障礙最為常見、持久?？祻?fù)訓(xùn)練能明顯改善大腦神經(jīng)功能和學(xué)習(xí)記憶能力，對大腦的功能重組和代償起著重要作用。本課題通過觀察康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠患側(cè)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣濃度的影響及其與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系，探討康復(fù)訓(xùn)練對腦梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的可塑性影響及其可能機(jī)制。 方法： (1)對象和干預(yù)措施：用改良線栓法制成大鼠右側(cè)

2、大腦中動(dòng)脈腦梗死(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型；術(shù)后2h進(jìn)行模型成功評價(jià)；48只腦梗死造模成功的Wistar大鼠隨機(jī)分為腦梗死自由活動(dòng)組(模型組)和腦梗死運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組(康復(fù)組)，每組各24只?？祻?fù)組于術(shù)后休息4 d，第5d開始進(jìn)行滾筒式網(wǎng)狀訓(xùn)練、轉(zhuǎn)棒行走訓(xùn)練、平衡棒行走訓(xùn)練及網(wǎng)屏訓(xùn)練。模型組置于普通籠中正常喂養(yǎng)，不給予任何訓(xùn)練。另有12只大鼠作為假手術(shù)組。 (2)觀察指標(biāo)：神經(jīng)和

3、運(yùn)動(dòng)功能，假手術(shù)組于手術(shù)前后分別進(jìn)行1次神經(jīng)功能(采用Bederson法)和運(yùn)動(dòng)能力測評(包括轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)、平衡木實(shí)驗(yàn)、網(wǎng)屏實(shí)驗(yàn))；康復(fù)組和模型組分別于康復(fù)訓(xùn)練10天、20天、30天后進(jìn)行神經(jīng)和運(yùn)動(dòng)功能測評。康復(fù)組和模型組大鼠在術(shù)后3天、康復(fù)訓(xùn)練30天后采用Y-型迷宮進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測評，應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡(LSCM)與第四代鈣熒光探針Fluo-4/AM技術(shù)，測定康復(fù)組和模型組患側(cè)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣濃度的變化。 (3)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：

4、用SPSS13.0 for WINDOWS對統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對大鼠神經(jīng)功能、運(yùn)動(dòng)能力評分等級資料用秩和檢驗(yàn)；對學(xué)習(xí)記憶能力測評采用成組設(shè)計(jì)兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果用-x±s表示。用圖像分析技術(shù)對患側(cè)海馬神經(jīng)元內(nèi)游離鈣圖像進(jìn)行定量統(tǒng)計(jì)，分析結(jié)果采用單因素方差分析。對運(yùn)動(dòng)功能評分、學(xué)習(xí)記憶能力之間進(jìn)行相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析并求r值。所有統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P<0.05為差異有顯著性。 結(jié)果： (1)假手術(shù)組術(shù)后的神經(jīng)功能和運(yùn)

5、動(dòng)能力評分與手術(shù)前無差異。模型組和康復(fù)組術(shù)后神經(jīng)功能和運(yùn)動(dòng)功能較手術(shù)前和假手術(shù)組均出現(xiàn)明顯變化?？祻?fù)訓(xùn)練前對照組和康復(fù)組神經(jīng)功能比較無差異(P>0.05)；康復(fù)訓(xùn)練后康復(fù)組神經(jīng)功能評分優(yōu)于對照組，在康復(fù)訓(xùn)練10天組、30天組與同期對照組比較差異有顯著性(P<0.05)，康復(fù)訓(xùn)練20天組有顯著性差異(P<0.01)。 (2)康復(fù)訓(xùn)練后康復(fù)組各項(xiàng)運(yùn)動(dòng)能力評分優(yōu)于對照組，其中轉(zhuǎn)棒行走訓(xùn)練在康復(fù)10天組、20天組、30天組與同期對照組比

6、較差異均有顯著性(P<0.05)；平衡木行走訓(xùn)練康復(fù)10天組與同期對照組比較無顯著性差異(P>0.05)，康復(fù)20天組有顯著性差異(P<0.01)，30天組比較差異有顯著性(P<0.05)；網(wǎng)屏實(shí)驗(yàn)在康復(fù)10天組、30天組比較差異有顯著性(P<0.05)，康復(fù)20天組與同期對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。相關(guān)分析表明神經(jīng)功能評分與轉(zhuǎn)棒評分(r=0.588,P<0.01)、平衡木評測(r=0.698，P<0.01)、網(wǎng)屏評測(r=

7、0.712,P<0.01)呈明顯正相關(guān)。 (3)模型組和康復(fù)組各24只大鼠在手術(shù)后5周進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測評，結(jié)果顯示康復(fù)組Y-型迷宮學(xué)習(xí)分辨能力明顯優(yōu)于模型組，其達(dá)到掌握標(biāo)準(zhǔn)所需次數(shù)明顯少于模型組，兩組比較有顯著性差異(P<0.01)；腦梗死大鼠Y-迷宮學(xué)習(xí)能力與神經(jīng)功能(r=0。609，P<0.01)呈顯著正相關(guān)。 (4)康復(fù)訓(xùn)練30天后，康復(fù)組Ca2+明顯高于模型組差異有非常顯著性意義，(P<0.01)?？祻?fù)組與假手