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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:KM突變小鼠是我所KM封閉群小鼠繁殖過程中出現(xiàn)的一例自發(fā)突變小鼠,表型異常,全身被毛稀少,表皮增厚有皺褶。為進(jìn)一步育種研究,于SPF級(jí)動(dòng)物房?jī)?nèi)進(jìn)行近交化培育保種,其突變表型可穩(wěn)定遺傳。該KM突變小鼠初生時(shí)與野生型KM小鼠間表型無(wú)差異,至一周左右被毛生長(zhǎng)后即可與野生型相區(qū)分,其被毛稀疏,至離乳仍可見粉紅色皮膚,成年后皮膚明顯松弛褶皺,表面干燥,部分動(dòng)物有皮屑脫落,部分動(dòng)物出現(xiàn)皮膚潰破,類似于人類的慢性炎癥性皮膚病病變表現(xiàn)。因此我們對(duì)
2、KM突變小鼠進(jìn)行近交系培育,以期發(fā)現(xiàn)其突變的遺傳規(guī)律并對(duì)突變基因進(jìn)行定位;同時(shí),研究中主要對(duì)該突變小鼠的生物學(xué)特性進(jìn)行觀察分析,檢測(cè)其在生物學(xué)特性方面與野生小鼠間的差異;根據(jù)突變小鼠的表型,觀察其皮膚的病理改變及免疫細(xì)胞和分子改變,檢測(cè)免疫器官脾臟和淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞的改變等,目的在于了解KM突變小鼠的系統(tǒng)表型特點(diǎn)、遺傳規(guī)律等,為其后的基因定位和機(jī)制研究奠定基礎(chǔ),以期開發(fā)新的疾病動(dòng)物模型。
方法:選用同胞雜交、測(cè)交等方法近交培
3、育的KM突變小鼠和對(duì)照野生小鼠作為研究對(duì)象,觀察其遺傳規(guī)律;電子攝像動(dòng)態(tài)觀察表型;對(duì)不同月齡,不同性別小鼠進(jìn)行體重、臟器系數(shù)、代謝率、體溫、及血液學(xué)常規(guī)、生化檢測(cè);通過常規(guī)HE病理組織學(xué)、免疫組織化學(xué)及特殊染色對(duì)3月齡、6月齡KM突變小鼠和野生KM小鼠皮膚炎癥細(xì)胞及細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)比較及脂肪組織脂肪因子瘦素檢測(cè)比較;對(duì)不同年齡段的小鼠皮膚組織、脾臟及淋巴結(jié)細(xì)胞的凋亡與增殖以及脾臟、淋巴結(jié)組織T、B細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)比較。
結(jié)
4、果:KM突變小鼠近交培育至第10代,突變表型穩(wěn)定遺傳,通過觀察突變表型外顯率,基本符合孟德爾基因分離規(guī)律,且與性別無(wú)關(guān),推測(cè)為單基因控制的常染色體隱性遺傳突變;突變表型為皮膚稀毛、皮屑、皮皺等;KM突變小鼠的體重與同齡野生小鼠比較明顯降低,且生長(zhǎng)緩慢,但除胸腺及腹腔脂肪臟器系數(shù)比KM野生小鼠低之外,其它主要臟器重量系數(shù)均高于野生KM小鼠;體溫高,平均日飲水量大;外周血白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分比比同齡野生小鼠多,粒細(xì)胞百分比隨年齡增長(zhǎng)下降;單
5、核細(xì)胞百分比呈明顯增高的趨勢(shì);血糖、總膽固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白低、低密度脂蛋白高;皮膚組織病理表現(xiàn)為表皮細(xì)胞壞死,上皮角化過度或不全,顆粒層增厚,基底細(xì)胞層水腫,真皮淺層血管擴(kuò)張,結(jié)締組織炎細(xì)胞浸潤(rùn)等;皮膚真皮層T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞浸潤(rùn),炎癥因子IL-6、IL-22,TNF-α、IFN-γ表達(dá)增多;脂肪組織瘦素表達(dá)增多;表皮細(xì)胞凋亡增多,毛囊及皮脂腺細(xì)胞增殖減少;脾臟及淋巴結(jié)細(xì)胞凋亡相對(duì)增多,3月齡、6月齡KM突變小鼠增殖增
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