翼外肌在創(chuàng)傷性顳下頜關節(jié)強直發(fā)生中的作用研究.pdf

1、顳下頜關節(jié)(temporomandibularjoint,TMJ)強直是一種嚴重影響口腔頜面部功能的疾病,導致患者開口受限、咀嚼困難等,嚴重影響患者身心健康。目前,TMJ強直的治療非常困難,不僅費時費力,增加患者經濟負擔,而且治療效果不夠理想,術后復發(fā)率較高。臨床上發(fā)現創(chuàng)傷是TMJ強直最常見的原因,由創(chuàng)傷引起的TMJ強直稱為創(chuàng)傷性TMJ強直,其中以髁突骨折為主且骨折類型以髁突矢狀骨折最常見。然而,現有的理論無法完全解釋清楚創(chuàng)傷性TMJ強

2、直發(fā)生的機理,也無令人信服的解釋髁突矢狀骨折易于發(fā)展成TMJ強直的原因。在總結前人并結合我們自己研究的基礎上,我們提出翼外肌可能是導致髁突矢狀骨折較其他類型骨折易于發(fā)展成TMJ強直的重要原因。眾所周知,翼外肌的下頭附著在下頜髁突翼肌窩,翼外肌收縮時髁突矢狀骨折的骨折塊被牽拉向前、下、內側移位,可同時伴有TMJ關節(jié)盤的破損或移位。因此,我們認為在髁突矢狀骨折愈合過程中,由于口腔的功能運動需要翼外肌反復收縮,引起髁突骨折塊和髁突殘端之間產生

3、牽張成骨效應,導致骨折塊和髁突殘端之間新骨過分生長,髁突形態(tài)出現明顯異常,畸形的髁突以及粗糙的骨折斷面進一步損傷關節(jié)盤和關節(jié)軟骨,使髁突頭和關節(jié)窩直接接觸并發(fā)生粘連,最終導致TMJ強直的發(fā)生,本實驗共選取36只綿羊為實驗動物,隨機選取24只動物用于實驗一,并隨機分為兩組;其余12只動物用于實驗二(因實驗一標本離體時間過長可能影響實驗二的結果,因此,另選取實驗動物),亦隨機分為兩組。實驗一通過髁突大體形態(tài)觀察及顯微電子計算機斷層掃描(mi

4、crocomputedtomography,MicroCT)方法觀察髁突形態(tài)改變及骨折區(qū)骨結構參數變化;實驗二通過反轉錄實時定量聚合酶鏈反應(reversetranscriptionrealtimequantitativepolymerasechainreaction,RT-qPCR)及免疫組織化學方法比較兩組部分成骨相關因子表達改變,以探討翼外肌在創(chuàng)傷性顳下頜關節(jié)強直發(fā)生中的作用。
　　實驗一,翼外肌在創(chuàng)傷性顳下頜關節(jié)強直中的作

5、用
　　目的:觀察翼外肌在髁突矢狀骨折愈合過程中的作用并探討其與創(chuàng)傷性顳下頜關節(jié)強直發(fā)生的關系。方法:以24只綿羊為實驗動物,從1~24編號,隨機分為兩組。所有實驗動物左側關節(jié)不做處理,右側通過手術造成髁突矢狀骨折伴關節(jié)盤內移位動物模型,對照組術中同時切斷翼外肌,以阻斷其功能;實驗組保留翼外肌。術后4周、12周、24周每組分別處死4只動物,通過髁突大體形態(tài)觀察及MicroCT方法觀察髁突形態(tài)及骨小梁數量(trabeculanumb

6、er,Tb.N),骨小梁厚度(trabeculathickness,Tb.Th),骨小梁間隙(trabeculaspace,Tb.Sp)和骨體積分數(bonevolumefraction,BV/TV)等骨結構參數的變化。結果:所有實驗動物均未發(fā)生TMJ強直。左側未手術髁突形態(tài)無明顯變化。手術側髁突均有形態(tài)改變,同期相比,實驗組髁突形態(tài)較對照組明顯增大畸形。骨折區(qū)骨結構參數Tb.N、Tb.Th、BV/TV隨時間成階梯式增加(P<0.05)

7、,Tb.SP成階梯式減小(P<0.05),組間比較差異均具有統計學意義(P<0.05),對照組各參數隨時間變化無統計學意義(P>0.05)。結論:翼外肌能夠促進髁突矢狀骨折后骨折區(qū)新骨形成,使髁突形態(tài)增大畸形。
　　實驗二,翼外肌促進髁突矢狀骨折后髁突形態(tài)及骨折區(qū)成骨改變的機制研究
　　目的:探討翼外肌對髁突矢狀骨折后骨折區(qū)作用的機制并進一步探討翼外肌在創(chuàng)傷性TMJ強直中的作用。方法:以12只綿羊為實驗動物,從1~12編號,

8、隨機分為兩組,動物模型制備及分組同實驗一。術后2周、4周、12周每組分別處死2只動物,通過RT-qPCR及免疫組織化學方法檢測成骨相關因子I型膠原(collagenI,COLI)、骨鈣蛋白(osteocalcin,OCN)及轉化生長因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)基因及蛋白水平變化。結果:通過RT-qPCR定量分析顯示:同期相比,實驗組COLI、TGF-β1及OCNmRNA表達水平明顯高于

9、對照組(P<0.05);隨時間變化,實驗組COLI、TGF-β1及OCNmRNA表達基本成上升趨勢(P<0.05),而對照組或先升高后降低,或是逐漸降低(P<0.05)。免疫組織化學結果顯示:同期相比,實驗組骨折區(qū)成骨細胞COLI及TGF-β1的表達均高于對照組(P<0.05);隨時間變化,實驗組骨折區(qū)成骨細胞COLI及TGF-β1的表達逐漸增高(P<0.05)或略有降低(P>0.05);相反,成軟骨細胞COLI及TGF-β1的表達隨時