Tim-3胃癌免疫細胞上表達的臨床意義和生物學功能的初步研究.pdf

1、蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構(gòu)的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名：至立邀日期：2Z笙二[二2rTim3在胃癌免疫細胞上表達的臨床意義和生物學功能的初步研究

2、中文摘要Tim一3在胃癌免疫細胞上表達的臨床意義和生物學功能的初步研究中文摘要中又兩斐Tim3是重要的免疫調(diào)節(jié)分子，在腫瘤進展和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。然而不同免疫細胞上Tim3表達的臨床意義和生物學作用還知之甚少。本研究通過臨床標本檢測和體內(nèi)外功能研究，分析了Tim3在胃癌免疫細胞表達的臨床意義，調(diào)控機制和生物學功能。第一部分：胃癌患者NK細胞上Tim3異常表達及臨床意義目的擬通過檢測胃癌患者體內(nèi)免疫細胞上Tim3的表達情況，結(jié)合臨

3、床資料分析該分子表達與胃癌進展的關(guān)系。方法收集初診胃癌患者和健康對照組的外周血以及對應(yīng)的癌組織和癌旁正常組織，流式細胞術(shù)分析Tim一3在CD56NK細胞上表達，并結(jié)合臨床資料分析該分子表達的臨床意義。利用Gal9蛋白體外激活NK，觀察該分子對NK生物學功能的影響。為進一步驗證臨床中觀測到的現(xiàn)象，繼而開展了相應(yīng)的動物學實驗。首先利用胃癌細胞株MCF皮下移植瘤構(gòu)建荷瘤小鼠模型，于荷瘤不同時間點，檢測外周血和腫瘤組織浸潤的NK上Tim3動態(tài)表

4、達情況。隨后利用Tbet√一基因敲除小鼠、Eomes乒基因敲除小鼠和Tbet斗聯(lián)合Eomes斗雙基因敲除小鼠，以wT小鼠作為對照，分析核轉(zhuǎn)錄因子T—bet和Eomes在調(diào)控NK細胞表達Tim一3中否發(fā)揮了作用。結(jié)果無論健康對照組還是胃癌患者，在外周淋巴細胞群體中Tim3主要表達于NK細胞而非B細胞或T細胞。擴大樣本進一步分析發(fā)現(xiàn)，胃癌患者NK細胞上Tim一3表達則顯著高于健康對照組，兩者存在統(tǒng)計學差異。體外功能學實驗證實，在rhlL12