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文檔簡介
1、目的:研究特異性COX-2抑制劑塞來昔布(celecoxib)對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系SK-N-SH細(xì)胞生長的影響及其分子生物學(xué)作用機(jī)制,初步探討其作用機(jī)制是否涉及非COX-2抑制途徑。 方法:不同濃度的塞來昔布(12.5μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L)處理SK-N-SH細(xì)胞,采用MTT法檢測不同作用時(shí)間(24h,48h,72h)后細(xì)胞的增殖情況,DNAladder法及AO/EB染色形態(tài)學(xué)鑒定分
2、析細(xì)胞凋亡,進(jìn)一步采用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)Westernblot法檢測藥物作用前,以及不同濃度藥物作用不同時(shí)間后COX-2,Bcl-2蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果:MTT法顯示,塞來昔布以時(shí)間和劑量依賴性的方式抑制SK-N-SH細(xì)胞的生長,DNAladder凝膠電泳可以觀察到塞來昔布作用時(shí)間為48小時(shí),50μmol/L的藥物濃度就可以觀察到凋亡細(xì)胞典型的DNA梯狀條帶,AO/EB染色從形態(tài)學(xué)上證明了凋亡的發(fā)生,Westernblot可以檢測到
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