毛細管電泳-電化學(xué)發(fā)光聯(lián)用檢測水產(chǎn)品中的生物胺.pdf

1、毛細管電泳（CE）是以毛細管為分離通道，高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)被分析物之間淌度來實現(xiàn)高效、快速分離的分析技術(shù)，CE近年來采用高散熱效率、細內(nèi)徑的毛細管，以改善分離的質(zhì)量。它具有分離效率高、樣品用量少、分析速度快等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于食品科學(xué)、生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分析化學(xué)領(lǐng)域。電化學(xué)發(fā)光（ECL）分析法是電化學(xué)手段與化學(xué)發(fā)光方法相結(jié)合的一門分析技術(shù)，它具有靈敏度高、儀器設(shè)備簡單、操作方便、控制性好和選擇性強等優(yōu)點，廣泛地應(yīng)用于生物、環(huán)境

2、、食品、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、臨床、化學(xué)分析等領(lǐng)域。
　　生物胺廣泛存在于肉類、水產(chǎn)品、酒類、奶類和果蔬等食品中，其中水產(chǎn)品由于含豐富的氨基酸，因此體內(nèi)含有多種生物胺，腐敗和儲藏不當均有可能大大提高生物胺的含量。研究表明，低含量的生物胺是人和其他生物體內(nèi)的生理活性物質(zhì)，但食用含過量生物胺的食品會對人體產(chǎn)生毒害作用。因此，建立一種高效快速檢測水產(chǎn)品中生物胺的方法尤其重要。CE-ECL兼?zhèn)淞薈E的高效、快速及ECL的靈敏、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，同時選

3、用具有穩(wěn)定性高、發(fā)光效率高等優(yōu)點的Ru(bpy)32+作為電化學(xué)發(fā)光體系，用于分析檢測水產(chǎn)品中的生物胺。
　　基于CE-ECL簡便、靈敏、高效等優(yōu)點，本研究的目的在于建立分離檢測水產(chǎn)品中的生物胺的新方法。本文開展了如下幾個方面的工作：
　　1.建立以Ru(bpy)32+為電化學(xué)發(fā)光體系的CE-ECL法，應(yīng)用于檢測魚露中的苯乙胺。實驗表明：在優(yōu)化條件下苯乙胺的ECL強度與濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為為I=1.73c+9.

4、71，相關(guān)系數(shù)r=0.9981，檢出限（S/N=3）為0.06μg/mL。采用CE-ECL法對魚露中的苯乙胺進行分析檢測，峰高及遷移時間的相對標準偏差(RSD)值0.43％和0.29%，加標回收率為102.19～108.08％。
　　2.首次應(yīng)用CE-ECL對鯧魚中色胺進行檢測。在最佳優(yōu)化條件下，二鹽酸色胺標準樣品的濃度1~8 mmo l/L范圍內(nèi)，二鹽酸色胺的電化學(xué)發(fā)光強度與濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為I=20.649c+

5、29.839，相關(guān)系數(shù)r=0.9996(n=8)。檢出限(S/N=3)為0.06mmol/L。
　　3.建立一種以Ru(bpy)32+為電化學(xué)發(fā)光體系的CE-ECL方法，應(yīng)用于分離檢測魷魚絲中的組胺。結(jié)果表明:在檢測電位1.15V，Ru(bpy)32+濃度5 mmol/L（pH=7.0），進樣高壓10kV，進樣時間8s，運行高壓18kV；磷酸鹽緩沖溶液pH值3.40，濃度50 mmol/L條件下，體系的電化學(xué)發(fā)光強度與二鹽酸組胺的

6、濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為Y=1.42x-30.83，相關(guān)系數(shù) R=0.9981(n=6)。采用該方法對魷魚絲中的組胺進行測定，峰高和遷移時間相對標準偏差(RSD)值為0.43%和0.29%，加標回收率為100.32~106.55%。
　　4.海蠣在廈門的產(chǎn)量大、消費高，但對于海蠣中生物胺含量的研究報道甚少。本實驗以海蠣為原料，采用 CE-ECL聯(lián)用技術(shù)，Ru(bpy)32+作為電化學(xué)發(fā)光體系，分離檢測新鮮海蠣中的腐胺、組

7、胺、酪胺、苯乙胺和亞精胺，并且對海蠣在不同保藏過程中體內(nèi)生物胺含量的變化進行研究，探討生物胺作為貝類食品新鮮度的可行性。實驗結(jié)果表明，新鮮牡蠣中亞精胺含量較高，而酪胺和組胺含量很低，各種生物胺隨貯藏時間的延長均有不同程度的增長。在0℃條件下，4天內(nèi)各生物胺的含量變化不大，從第4天開始有不同程度的增長，其中腐胺從18.6 mg/kg增加至28.3 mg/kg，亞精胺從45.6 mg/kg增加至68.5 mg/kg。在4℃條件下，從第二天之

8、后，生物胺含量就開始增長，4天之后腐胺和亞精胺迅速增長，腐胺從19.4 mg/kg增加至136.8 mg/kg，亞精胺從46.7 mg/kg增至119.7 mg/kg，生物胺積累速度明顯高于0℃條件。
　　毛細管電泳（CE）是以毛細管為分離通道，高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)被分析物之間淌度來實現(xiàn)高效、快速分離的分析技術(shù)，CE近年來采用高散熱效率、細內(nèi)徑的毛細管，以改善分離的質(zhì)量。它具有分離效率高、樣品用量少、分析速度快等優(yōu)點，被廣泛

9、應(yīng)用于食品科學(xué)、生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分析化學(xué)領(lǐng)域。電化學(xué)發(fā)光（ECL）分析法是電化學(xué)手段與化學(xué)發(fā)光方法相結(jié)合的一門分析技術(shù)，它具有靈敏度高、儀器設(shè)備簡單、操作方便、控制性好和選擇性強等優(yōu)點，廣泛地應(yīng)用于生物、環(huán)境、食品、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、臨床、化學(xué)分析等領(lǐng)域。
　　生物胺廣泛存在于肉類、水產(chǎn)品、酒類、奶類和果蔬等食品中，其中水產(chǎn)品由于含豐富的氨基酸，因此體內(nèi)含有多種生物胺，腐敗和儲藏不當均有可能大大提高生物胺的含量。研究表明，低含量的生

10、物胺是人和其他生物體內(nèi)的生理活性物質(zhì)，但食用含過量生物胺的食品會對人體產(chǎn)生毒害作用。因此，建立一種高效快速檢測水產(chǎn)品中生物胺的方法尤其重要。CE-ECL兼?zhèn)淞薈E的高效、快速及ECL的靈敏、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，同時選用具有穩(wěn)定性高、發(fā)光效率高等優(yōu)點的Ru(bpy)32+作為電化學(xué)發(fā)光體系，用于分析檢測水產(chǎn)品中的生物胺。
　　基于CE-ECL簡便、靈敏、高效等優(yōu)點，本研究的目的在于建立分離檢測水產(chǎn)品中的生物胺的新方法。本文開展了如下幾個

11、方面的工作：
　　1.建立以Ru(bpy)32+為電化學(xué)發(fā)光體系的CE-ECL法，應(yīng)用于檢測魚露中的苯乙胺。實驗表明：在優(yōu)化條件下苯乙胺的ECL強度與濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為為I=1.73c+9.71，相關(guān)系數(shù)r=0.9981，檢出限（S/N=3）為0.06μg/mL。采用CE-ECL法對魚露中的苯乙胺進行分析檢測，峰高及遷移時間的相對標準偏差(RSD)值0.43%和0.29%，加標回收率為102.19～108.08％。

12、
　　2.首次應(yīng)用CE-ECL對鯧魚中色胺進行檢測。在最佳優(yōu)化條件下，二鹽酸色胺標準樣品的濃度1~8 mmo l/L范圍內(nèi)，二鹽酸色胺的電化學(xué)發(fā)光強度與濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為I=20.649c+29.839，相關(guān)系數(shù)r=0.9996(n=8)。檢出限(S/N=3)為0.06mmol/L。
　　3.建立一種以Ru(bpy)32+為電化學(xué)發(fā)光體系的CE-ECL方法，應(yīng)用于分離檢測魷魚絲中的組胺。結(jié)果表明:在檢測電位1

13、.15V，Ru(bpy)32+濃度5 mmol/L（pH=7.0），進樣高壓10kV，進樣時間8s，運行高壓18kV；磷酸鹽緩沖溶液pH值3.40，濃度50 mmol/L條件下，體系的電化學(xué)發(fā)光強度與二鹽酸組胺的濃度呈良好的線性關(guān)系，其線性方程為Y=1.42x-30.83，相關(guān)系數(shù) R=0.9981(n=6)。采用該方法對魷魚絲中的組胺進行測定，峰高和遷移時間相對標準偏差(RSD)值為0.43%和0.29%，加標回收率為100.32~1

14、06.55%。
　　4.海蠣在廈門的產(chǎn)量大、消費高，但對于海蠣中生物胺含量的研究報道甚少。本實驗以海蠣為原料，采用 CE-ECL聯(lián)用技術(shù)，Ru(bpy)32+作為電化學(xué)發(fā)光體系，分離檢測新鮮海蠣中的腐胺、組胺、酪胺、苯乙胺和亞精胺，并且對海蠣在不同保藏過程中體內(nèi)生物胺含量的變化進行研究，探討生物胺作為貝類食品新鮮度的可行性。實驗結(jié)果表明，新鮮牡蠣中亞精胺含量較高，而酪胺和組胺含量很低，各種生物胺隨貯藏時間的延長均有不同程度的增長。