大棗多糖體外抗凝血活性研究.pdf

1、棗在我國(guó)具有得天獨(dú)厚的自然條件，故棗資源極為豐富。世界上棗產(chǎn)量中90％以上的棗產(chǎn)于我國(guó)。近年米，對(duì)大棗藥用有效成分的研究表明，大棗中含量最多、藥用效果最明顯、最有可能實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和開(kāi)發(fā)應(yīng)用的大棗深加工產(chǎn)品當(dāng)屬大棗多糖。研究表明:多糖是紅棗中重要的天然活性成分，具有保護(hù)肝臟和生津養(yǎng)血的功能，對(duì)抗氧化、抗衰老、抗輻射、提高抗體免疫力具有重要的作用，而對(duì)于大棗多糖抗凝血活性的研究目前尚未見(jiàn)諸報(bào)道。
　　目前應(yīng)用于臨床治療的抗凝血藥物主

2、要是肝素和香豆素類(lèi)，有誘發(fā)血小板癥等副作用。開(kāi)發(fā)對(duì)心腦血栓疾病具有預(yù)防作用的新型藥物或功能性食品具有重要的意義。
　　本試驗(yàn)主要結(jié)果如下:
　　1.大棗粗多糖能顯著延長(zhǎng)人體血漿的活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)值，而對(duì)凝血酶時(shí)間(TT)、凝血酶原時(shí)間(PT)值均無(wú)明顯影響，表明大棗粗多糖主要是通過(guò)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)發(fā)揮作用，且與濃度呈量效關(guān)系。
　　2.實(shí)驗(yàn)比較的13個(gè)品種抗凝血活性差異顯著，APTT值在49.4～74s間

3、，其中，靈寶大棗的抗凝血活性相對(duì)較好，為74s。另外，大棗粗多糖的抗凝血活性強(qiáng)弱與其中性多糖、酸性多糖和蛋白質(zhì)比例并沒(méi)有明顯的相關(guān)關(guān)系。
　　3.比較了在熱風(fēng)干燥、真空冷凍干燥、微波輔助干燥、低溫真空干燥四種大棗干制條件下，大棗粗多糖體外抗凝血活性的差異。其中，熱風(fēng)干燥、真空冷凍干燥的大棗干制方式能較好的保持大棗粗多糖的抗凝血活性，分別為125.6s和124.3s。超聲提取、超聲輔助酶法、微波提取和傳統(tǒng)水提法中，超聲提取方法所得的

4、大棗粗多糖體外抗凝血活性最好，為98.6s。
　　4.為了確定影響大棗粗多糖得率和抗凝血活性的因素條件，通過(guò)單因素試驗(yàn)進(jìn)行比較，運(yùn)用響應(yīng)面分析方法，探討了超聲波提取大棗多糖的優(yōu)化工藝。通過(guò)考察超聲功率、超聲時(shí)間、提取溫度、料液比、pH對(duì)大棗多糖得率與抗凝血活性的影響，得到超聲輔助提取大棗粗多糖的最佳工藝條件:超聲溫度69℃，pH值7.15，超聲功率80W，料液比為1∶10，超聲時(shí)間30min。在此工藝條件下，得到的大棗粗多糖不僅得

5、率較高(7.82％)，而且也能較好的保持其對(duì)人體血漿的體外抗凝血活性(86.5s)。
　　5.對(duì)大棗粗多糖進(jìn)行純化分離，并進(jìn)一步研究其抗凝血活性的變化。用sevag法脫蛋白后的大棗粗多糖對(duì)人體血漿的體外抗凝血活性明顯增強(qiáng)。經(jīng)過(guò)AB-8大孔樹(shù)脂層析后活性保持較好。大棗多糖通過(guò)DEAE-52纖維素柱進(jìn)行分級(jí)，得到三個(gè)組分JPⅠ、JPⅡ、JPⅢ。其中，組分JPⅠ占多糖總量的67.1％，是大棗多糖的主要組分。JPⅠ的體外抗凝血活性顯著高于

6、其他兩個(gè)組分，分子量為29922D。組分JPⅡ、JPⅢ之間活性差異不明顯，分子餐分別為41686D和54200D。
　　6.將此三組大棗多糖級(jí)分進(jìn)行SephadexG-100凝膠柱層析，得單一對(duì)稱(chēng)峰;通過(guò)紫外分光光度法測(cè)定，得單一對(duì)稱(chēng)峰;采用凍融分析得到透明的淡黃色液體，二個(gè)組分的高效液相色譜圖也呈現(xiàn)出單一對(duì)稱(chēng)的峰形，由此證明JPⅠ、JPⅡ、JPⅢ為均一組分，可以對(duì)其抗凝血活性進(jìn)行進(jìn)一步研究。
　　7.通過(guò)傅里葉紅外光譜儀對(duì)