新型人類Sirtuin抑制劑和抑制策略.pdf

1、Sirtuin家族的酶能夠催化無論組蛋白還是非組蛋白底物上的?；嚢彼醾孺湹娜ヵ；磻?。細菌和古生菌通常包含一至兩個sirtuins，而真核生物包含多個sirtuin成員。自從2000年發(fā)現首個sirtuin家族成員后，在過去的幾年里，sirtuin催化的去?；磻呀洷蛔C實在多個關鍵的細胞過程發(fā)揮重要的調節(jié)，比如基因轉錄，DNA損傷修復和新陳代謝。這個反應也被用于人類的一些疾病譬如癌癥，代謝和神經變性相關疾病的靶向治療。通過一系列實驗

2、基礎上的sirtuin酶化學機制的探索，sirtuin獨特的依賴于NAD+的去?；磻獧C制被廣泛研究。近幾年，各種新型的sirtuin催化的去?；磻囊种苿┖鸵种撇呗韵嗬^被報道，這些研究可以幫助我們更好的去理解sirtuin催化去酰化化學反應的生物學和藥理學方面的知識，并且對于開發(fā)在新陳代謝，神經退行，年齡相關的疾病，特別是癌癥方面的新的治療方法有著巨大的意義。
　　在我的導師堅實的前期工作基礎上，本論文主要進行了以下三個方面的

3、探索：
　　（1）利用酶的催化核心區(qū)域的三維空間結構中Nε-乙酰-賴氨酸側鏈的延伸空間，我們設計了一系列基于Nε-乙酰-賴氨酸的具有不同linker和末端基團的雙齒類化合物，被并對其進行了SIRT1抑制測試，我們發(fā)現了幾個比Nε-乙酰-賴氨酸單齒化合物更強效的SIRT1抑制劑，從而證明我們以此設計sirtuin抑制劑的可行性。通過動力學測試我們驗證了該抑制劑相對于NAD+符合一個非競爭性（non-competitive）的抑制模式

4、，而相對于Nε-乙酰-賴氨酸底物是一個競爭性（competitive）的抑制模式。這一發(fā)現符合SIRT1催化的去?；饔玫膭恿W機制，即SIRT1首先與Nε-乙酰-賴氨酸底物綁定之后再與NAD+綁定。這個發(fā)現也表明該類抑制劑能夠進入Nε-乙酰-賴氨酸側鏈延伸部位的結合口袋，通過阻止Nε-乙酰-賴氨酸底物和NAD+與酶的活性中心結合而發(fā)揮其抑制作用，這將鞏固雙齒類抑制劑的設計原理；
　　（2）在導師前期工作的基礎上，對肽類先導化合物

5、中Nε-硫乙酰-賴氨酸周邊的側鏈進行修飾，作為課題的重要貢獻者，我合成了該系列化合物中的8個化合物，并對其進行了SIRT1/2/3抑制測試，結合本課題組另一位同學的測試結果，我們成功的找到了一個能夠保持先導化合物強效（?M）的抑制能力并且具有SIRT3選擇性（相對于SIRT1/2~10倍,相對于SIRT5>1,000倍,相對于SIRT6~161倍）的新型抑制劑；
　　（3）我的論文的第三部分工作是我們嘗試發(fā)展一個不可逆的sirtu