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文檔簡介
1、目的:本研究旨在探討賴氨酰氧化酶(LOX)能否在大鼠急性脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)修復過程中起著重要作用。
方法:將96只成年雌性SD大鼠分為A、B、C、D四組,A組(n=30)為β-氨基丙腈組(β-Aminopropionitrile,BAPN,一種LOX活性抑制劑),B組(n=30)為氯化鈷組(CoCl2,一種LOX表達促進劑),C組(n=30)為單純損傷組(injury),D組(n=6)為正
2、常對照組(sham)。在采用Allen’s方法成功地復制大鼠急性脊髓挫傷模型的基礎上,設定相同打擊力度。在損傷后不同時間段[1、3、7、14和30天(d),每個時間點n=6]切取實驗脊髓段。采用免疫組化(IHC)和免疫印跡(Western blot)檢測LOX在脊髓損傷組織中的表達,并分析A、B、C與D組之間差異性。應用BBB評分法評估損傷后大鼠后肢運動的恢復狀態(tài),同時分析A、B、C組不同時間段LOX表達與肢體運動恢復狀態(tài)的相關性。
3、r> 結果:BBB評分結果顯示氯化鈷組(B)后肢運動的恢復狀態(tài)分數(shù)明顯高于β-氨基丙腈組(A)和單純損傷組(C),且A組最低。免疫組化結果顯示:在所有實驗時間段脊髓損傷組(A、B、C組)的LOX陽性細胞數(shù)顯著高于對照組。例如在損傷后1d,A、B、C組的LOX陽性細胞數(shù)/視野分別為27.46±3.5,64.67±3.0,和41.67±2.3,而對照組的LOX陽性細胞數(shù)只有6.04±0.2。進而,在所有實驗時間段的LOX陽性細胞數(shù),氯化鈷
4、組(B)高于(A、C組),而β-氨基丙腈組(A)低于單純損傷組(C)。例如在損傷后3d,單純損傷組(C)的LOX陽性細胞數(shù)升達頂峰46.34±3.4,對應之氯化鈷組(B)和β-氨基丙腈組(A)陽性值分別為74.81±4.9和37.64±3.6。免疫印跡結果顯示,與對照組(D)相比,氯化鈷組(B)在損傷后1d LOX表達增加,3d達到高峰,7d時有所下降,14d和30d時明顯減少;β-氨基丙腈組(A)與氯化鈷組(B)和單純損傷組(C)相比
5、,LOX表達曲線基本相同,但表達率卻比后者明顯低弱,氯化鈷組(B)LOX表達明顯高于β-氨基丙腈組(A)和單純損傷組(C)且β-氨基丙腈組(A)最低。相同時間段間兩兩比較都具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:SCI放大脊髓LOX表達。氯化鈷強化 LOX表達加速脊髓損傷的愈合;而BAPN滅活LOX活性延緩損傷脊髓的恢復。BAPN和CoCl2引起LOX表達的改變與BBB大鼠后肢運動的恢復評分高低呈正相關,由此說明LOX作為重要
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