硫化氫減輕阿爾茨海默病小鼠學習記憶減退作用及機制研究.pdf

1、目的：通過APP/PS1雙轉基因阿爾茨海默病（AD）小鼠，觀察外源性硫化氫（H2S）對AD小鼠學習記憶功能減退的影響，并探索其可能的作用機制。
　　方法：將9月齡雄性APP/PS1雙轉基因AD小鼠30只隨機均分為兩組：APP/PS1組（APP/PS1+NS），APP/PS1給藥組（APP/PS1+NaHS）；同性別同月齡野生型（WT）小鼠20只隨機均分為兩組：正常組（WT+NS），正常給藥組（WT+NaHS）。APP/PS1給藥組

2、、正常給藥組每日一次腹腔注射硫氫化鈉（NaHS，一種H2S供體）2.8 mg/kg，正常組、APP/PS1組腹腔注射等體積生理鹽水（NS），連續(xù)3個月。Morris水迷宮檢測小鼠學習記憶能力。行為學檢測結束后，麻醉小鼠，取材，硫磺素-S染色法檢測小鼠海馬和皮質區(qū)老年斑；尼氏染色法檢測小鼠海馬神經元存活情況；Western blot法檢測小鼠海馬和大腦皮質H2S合成酶：胱硫醚β合成酶（CBS）和3-巰基丙酮酸硫基轉移酶（3MST）蛋白表達

3、；β-淀粉樣蛋白(Aβ)生成途徑的主要蛋白：β淀粉樣前體蛋白（APP）、β位點APP剪切酶1（BACE1）的表達及Aβ1-40、Aβ1-42含量；細胞內主要抗氧化應激蛋白：核因子E2相關因子2（Nrf2）、血紅素加氧酶-1（HO-1）、谷胱甘肽硫轉移酶（GST）的表達。
　　結果：1. APP/PS1組較正常組小鼠逃避潛伏期（escape latency）明顯延長，穿越目標象限次數（目標停留時間百分比）顯著減少；海馬和大腦皮質區(qū)老

4、年斑大量形成且融合成團；海馬CA3和DG區(qū)細胞出現深染固縮現象且尼氏體數量減少；海馬和大腦皮質組織中H2S合成酶：3MST、CBS蛋白表達水平顯著降低；Aβ生成途徑的主要蛋白：APP、BACE1表達及Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯增加；細胞內主要抗氧化應激蛋白Nrf2、HO-1、GST表達明顯減少。2.正常給藥組較正常組小鼠上述指標沒有明顯差異。3.APP/PS1給藥組較APP/PS1組逃避潛伏期明顯縮短，穿越目標象限次數明顯增多；

5、海馬和大腦皮質區(qū)老年斑數量明顯減少且多為小體積；海馬CA3和DG區(qū)細胞深染固縮現象減少且尼氏體數目增多；海馬和大腦皮質中3MST、CBS蛋白表達水平顯著升高；Aβ生成途徑的主要蛋白：APP、BACE1表達及Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯降低；細胞內主要抗氧化應激蛋白Nrf2、HO-1、GST表達明顯增加。
　　結論：在本實驗條件下，H2S減輕阿爾茨海默病小鼠學習記憶減退作用和減少老年斑的數量及阻遏存活神經元數量減少，其機制可能