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文檔簡介
1、鄰苯二甲酸酯類化合物(PAEs)作為在工業(yè)中大量使用的人工合成有機物,其對水生生物的潛在毒性隱患已引起了人們的廣泛關(guān)注,對其毒性毒理研究也成為目前環(huán)境科學(xué)研究中的一個熱門問題。本研究以工業(yè)生產(chǎn)中使用量最大的兩種PAEs(鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸二乙基己酯(DEHP))為研究對象,以南海區(qū)重要的經(jīng)濟養(yǎng)殖水產(chǎn)品(翡翠貽貝、紅鰭笛鯛、紫紅笛鯛)作為實驗生物,利用生物體的抗氧化指標(超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、
2、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、丙二醛(MDA)),乙酰膽堿酯酶(AChE),代謝酶解毒酶EROD以及功能基因CYP1A作為指標,并利用組織切片觀察了DBP脅迫對魚類組織的損傷情況,探討了PAEs對海洋生物的毒性效應(yīng),為闡明PAEs對不同海洋生物的影響及作用機理提供參考數(shù)據(jù)。研究結(jié)果如下:
1、DBP、DEHP對翡翠貽貝內(nèi)臟團和外套膜中的SOD、CAT活性存在明顯的脅迫效應(yīng)。DBP脅迫下翡翠貽貝內(nèi)臟團
3、中的SOD、CAT活性主要表現(xiàn)被抑制;外套膜中的SOD活性主要表現(xiàn)為先抑制后誘導(dǎo)(P<0.05),CAT活性變化波動較大,規(guī)律不明顯。DEHP脅迫下翡翠貽貝內(nèi)臟團SOD活性表現(xiàn)為先誘導(dǎo)升高后被抑制降低(P<0,05),CAT活性則表現(xiàn)為先被抑制降低后誘導(dǎo)升高;DEHP脅迫初期外套膜中的SOD活性在低濃度組受到抑制,高濃度組被誘導(dǎo),4d后SOD活性逐漸恢復(fù)對照組水平。MDA在DBP、DEHP脅迫過程中都有明顯的增加,表明PAEs導(dǎo)致海洋貝
4、類脂質(zhì)過氧化損傷。翡翠貽貝在PAEs脅迫結(jié)束移入清潔海水后,其抗氧化酶和MDA含量的變化在DBP脅迫實驗中能在較短的時間內(nèi)恢復(fù),恢復(fù)情況較DEHP好,表明DBP長期脅迫引起的毒性損傷較DEHP輕。
2、急性毒性實驗結(jié)果表明,DBP對紅鰭笛鯛幼魚的96hLC50為6.66mg·L-1,安全濃度為2.02mg·L-1;DEHP的96hLC50為10.73mg·L-1,安全濃度為3.01mg·L-1;從毒性上判斷這兩種PAEs化
5、合物對紅鰭笛鯛幼魚都屬于高毒物質(zhì),且在水體中DBP對生物的毒性高于DEHP,認為與這兩種PAEs在水體中的溶解性有關(guān)。
3、DBP對紅鰭笛鯛肝臟和鰓組織中的SOD活性表現(xiàn)為先誘導(dǎo)后抑制,具有明顯的時間-效應(yīng)。DEHP脅迫下紅鰭笛鯛肝臟中的SOD活性也被明顯誘導(dǎo)(P<0.05),鰓中則表現(xiàn)為先誘導(dǎo)后抑制。兩種PAEs脅迫下紅鰭笛鯛肝臟和鰓組織內(nèi)的MDA都有顯著的升高(P<0.05),表明PAEs能在短時間內(nèi)對生物體產(chǎn)生氧化脅
6、迫效應(yīng),造成脂質(zhì)過氧化損傷。另外,兩種PAEs脅迫下紅鰭笛鯛幼魚腦組織AChE活性表現(xiàn)為一段時間后受到極為明顯的誘導(dǎo),表明PAEs對海水魚類神經(jīng)傳導(dǎo)具有明顯的刺激,AChE是一種對PAEs脅迫具有很強的指示性的指標。
4、DBP脅迫下紫紅笛鯛肝臟組織中的POD活性被顯著誘導(dǎo),鰓中則被抑制。肝臟和鰓組織中的GST活性在DBP脅迫下發(fā)現(xiàn)明顯的變化,15d后0.5mg·L-1濃度組被顯著誘導(dǎo)。
5、紫紅笛鯛肝臟中的
7、代謝酶EROD活性在7d后相對于對照組活性升高,15d后又受抑制降低;而鰓中的EROD活性在3d、7d都表現(xiàn)為低于對照組,15d后才相對于對照組升高。EROD活性變化“時間-效應(yīng)”明顯。研究也表明肝臟組織中的EROD活性高于鰓,變化也更敏感。本研究從紫紅笛鯛肝臟和鰓中克隆得出了CYP1AcDNA序列,序列分析表明了該基因為CYP1A亞家族成員。利用qRT-PCR定量檢測DBP脅迫紫紅笛鯛肝臟和鰓mRNACYP1A表達水平變化的結(jié)果表明,
8、在DBP脅迫肝臟CYP1AmRNA表達先受到顯著抑制其后被誘導(dǎo)最后又被抑制,鰓中則先抑制后誘導(dǎo),這與EROD酶的結(jié)果基本一致,但與抗氧化酶間的關(guān)系不明顯。
6、DBP長期脅迫下紫紅笛鯛肝臟和鰓組織結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的改變,肝臟細胞出現(xiàn)腫大,細胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡,少數(shù)細胞核有變形的現(xiàn)象,脂肪粒沉積;鰓中鰓小片發(fā)生明顯的腫脹、融合、卷曲變形、壞死脫落。
7、DBP對翡翠貽貝造成的損傷較DEHP輕,而其對魚類的毒性卻高于D
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