RPR1基因啟動(dòng)子的克隆和化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá).pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文RPR1基因啟動(dòng)子的克隆和化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)姓名：趙向輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：蒯本科20050430摘要摘要植物系統(tǒng)獲得抗性(systemicacquiredresistance，SAR)是植物自身的一種免疫機(jī)制，是指植物受生物或化學(xué)因子刺激后其自身的防御機(jī)制被誘導(dǎo)的現(xiàn)象。SAR在植物防御病原菌的過(guò)程中起著非常重要的作用。利用可誘導(dǎo)SAIl的化學(xué)物質(zhì)和對(duì)其響應(yīng)的啟動(dòng)子構(gòu)建化學(xué)誘導(dǎo)系統(tǒng)具有重要

2、的研究?jī)r(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景。烯丙異噻唑(Probenazole，PBZ)是目前日本殺菌劑中產(chǎn)量最大的品種之一，主要用于水稻稻瘟病的防治。PBZ可誘導(dǎo)擬南芥和煙草等雙子葉植物產(chǎn)生系統(tǒng)獲得抗性。在水稻中，PBZ可誘導(dǎo)PBZl和RPRl等基因的表達(dá)。RPRl基因產(chǎn)物包括一個(gè)核苷酸結(jié)合位點(diǎn)(nucleotidebindingsite，NBS)和富含亮氨酸的重復(fù)區(qū)域(1eucinerichrepeat。IRK)，因此RPR]基因與大多數(shù)植物抗病基

3、因一樣，屬于NBSLRR基因家族。本研究用5刪除的方法克隆了RPRl基因五個(gè)不同長(zhǎng)度的啟動(dòng)子片段(2416bp、1574bp、819bp、568bp和208bp)，分別與GUS基因融合后轉(zhuǎn)化擬南4芥或水稻愈傷組織。通過(guò)GUS組織化學(xué)染色，定性檢測(cè)了RPRl基因各啟動(dòng)子片段在水稻愈傷組織中的PBZ誘導(dǎo)瞬時(shí)表達(dá)以及2416bp和1574bp片段在擬南芥中的PBZ誘導(dǎo)穩(wěn)定表達(dá)。研究結(jié)果表明，除208bp片段外，其余各片段在水稻愈傷組織中均可響