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1、為觀察P13Kgamma基因所在基因組核基質(zhì)結(jié)合區(qū),該文將P13Kgamma基因所在7q22區(qū)的BAC clone GS1-223D4 (GI:5931478)約100kb的基因組序列利用MAR分析軟件MARFinder進(jìn)行MAR搜索分析.為進(jìn)一步觀察PIMAR是否可影響異源報(bào)告基因的表達(dá),該文構(gòu)建了3個(gè)報(bào)告載體,pGL3-promoter(對(duì)照載體,不含PIMAR),pGL3-PIMAR1-LU(PIMAR正向插入啟動(dòng)子上游),PGL
2、3-PIMARS-LU(PIMAR反向插入啟動(dòng)子的上游).通過(guò)轉(zhuǎn)染HIH-3T3細(xì)胞, 7402細(xì)胞,K-562細(xì)胞內(nèi)與PIMAR相連的熒光索酶基因的表達(dá)(P<0.01),而在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的情況下,反向的PIMAR可使報(bào)告基因的表達(dá)水平稍有降低.為探索PIMAR是否通與MAR結(jié)合蛋白SATB1的結(jié)合參與P13Kgamma基因的調(diào)控,并觀察ATRA上調(diào)P13Kgamma基因的表達(dá)是否是通過(guò)降低SATB1的表達(dá),我們做了3個(gè)試驗(yàn).結(jié)果顯示ATR
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