ROCK2在宮頸癌中的表達(dá)及ROCK2 siRNA對(duì)HeLa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、第一部分Cleaved Caspase3，ROCK2和VEGF在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義
　　目的：探討ROCK2、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和Cleaved Caspase3在宮頸癌病變組織和血液中的表達(dá)及臨床意義。
　　方法：在46例慢性宮頸炎和52例宮頸鱗癌組織中，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法、熒光實(shí)時(shí)定量PCR和Western blotting法分別檢測(cè)的上述指標(biāo)表達(dá)情況。
　　結(jié)果：在不同組織中的ROCK2、VEGF

2、和Cleaved Caspase3的相對(duì)表達(dá)量均不同，慢性宮頸炎組的ROCK2和VEGF基因和蛋白表達(dá)量極顯著低于宮頸癌組（P<0.01）。Cleaved Caspase3基因和蛋白表達(dá)呈相反趨勢(shì)。
　　結(jié)論：在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中ROCK2和VEGF含量為高表達(dá)，但Cleaved Caspase3含量極低，三者均參與了宮頸癌的發(fā)生變化，因此其聯(lián)合檢測(cè)有助于判斷患者預(yù)后。
　　第二部分 siRNA介導(dǎo)的ROCK2基因沉默對(duì)人宮頸

3、癌HeLa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
　　目的： siRNA靶向干擾宮頸癌細(xì)胞ROCK2基因表達(dá)對(duì)其生物學(xué)行為的影響
　　方法：合成了ROCK2基因序列的siRNA表達(dá)載體，利用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染入人 Hela細(xì)胞；用實(shí)時(shí)熒光PCR及Western Blot方法分析了ROCK2 siRNA對(duì)宮頸癌細(xì)胞ROCK2基因表達(dá)的抑制作用；MTT法分析干擾前后宮頸癌細(xì)胞增殖活性，用Transwell法檢測(cè)干擾前后宮頸癌細(xì)胞體外遷移能力的改變，流式

4、細(xì)胞術(shù)檢測(cè)干擾前后宮頸癌細(xì)胞體外凋亡率的改變。
　　結(jié)果：ROCK2-siRNA可抑制HeLa ROCK2 mRNA和蛋白的表達(dá)，抑制率分別達(dá)到72.7和81.4％%。ROCK2-siRNA作用72h后，Hela細(xì)胞增殖開始能力減弱；ROCK2-siRNA作用后，HeLa細(xì)胞遷移能力均顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；但凋亡率均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；
　　結(jié)論：抑制 ROCK2的表達(dá)后，HeLa細(xì)胞的增殖速度和遷移細(xì)