保存時間和溫度對未固定胸腹水細胞形態(tài)、數(shù)量和退變率的影響.pdf

1、目的：
　　隨著胸腹水細胞學診斷的廣泛應用，如何減少漏診、誤診，提高診斷陽性率具有重要的實際意義，正確保存、及時送檢及合理固定是保證細胞學診斷正確性的重要前提。但臨床實踐中由于種種原因，經(jīng)常出現(xiàn)標本保存不良、送檢不及時等問題，為探討保存時間和保存溫度對細胞學診斷的影響，本研究對未固定離體胸腹水在不同保存溫度和時間下制作的常規(guī)細胞學涂片和細胞團石蠟切片進行觀察，對單核細胞、間皮細胞和腫瘤細胞的形態(tài)學特征、高倍視野下平均細胞數(shù)、細胞退

2、變情況進行綜合分析，為胸腹水細胞的保存溫度和細胞涂片及細胞蠟塊的最佳制作時機提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　收集河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院病理科2015-2016年間送檢的胸水和腹水標本30例，所有胸腹水全部即時送檢，每例新鮮標本充分混勻后分成18份，每份10ml,置密閉離心管中，2份標本立即離心，分別制作細胞涂片和細胞蠟塊，記為對照組。剩余16份標本分為兩組，8份為冷藏環(huán)境組（4℃）、8份為室溫環(huán)境組(24℃)。兩實驗組分別在6

3、h、24h、48h、72h四個時間段取樣，3000rpm離心10min，各涂片2張，沉渣細胞制備細胞蠟塊，常規(guī)切片、HE染色。
　　結果：
　　1、細胞形態(tài)學觀察可見對照組細胞涂片及細胞團石蠟切片細胞形態(tài)結構正常，可以分辨細胞類型。隨著保存時間延長，細胞出現(xiàn)一系列退行性改變，或表現(xiàn)為細胞體積增大，細胞核染色逐漸變淺，染色質及核膜結構變模糊，難以辨別細胞形態(tài)；或表現(xiàn)為細胞體積縮小，細胞核固縮，細胞質變紅。細胞團石蠟切片HE染色

4、切片中組織結構也隨保存時間的延長而消失，成為無法辨認的退變細胞團。在相同保存時間，冷藏環(huán)境組細胞形態(tài)變化較室溫環(huán)境組略好。
　　2、細胞涂片每高倍視野平均細胞數(shù)觀察結果表明，在0-72小時的范圍內(nèi)，隨著保存時間的延長，未固定胸腹水細胞涂片中平均細胞數(shù)逐漸減少（室溫環(huán)境r=-0.321，P＜0.05；冷藏環(huán)境r=-0.357，P＜0.05）。室溫及冷藏48h、72h組的平均細胞數(shù)均低于對照組（P＜0.05），而室溫及冷藏6h、24h

5、組的平均細胞數(shù)與對照組相比無明顯差異。在相同保存時間，冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組相比，無顯著差異。
　　3、在0-72小時的范圍內(nèi)，隨保存時間延長，在室溫環(huán)境及冷藏環(huán)境下未固定胸腹水細胞的涂片中細胞退變率均逐漸升高（室溫環(huán)境r=0.850，P＜0.05；冷藏環(huán)境r=0.654，P＜0.05）。室溫及冷藏6h、24h、48h、72h組的細胞退變率均高于對照組（P＜0.05）。冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組在6h的細胞退變率相比，冷藏6h組低于室

6、溫6h組（P＜0.05）。冷藏環(huán)境組與室溫環(huán)境組在24h、48h、72h的細胞退變率相比無明顯差異。
　　4、30例未固定胸腹水樣本在實驗期內(nèi)有4例標本出現(xiàn)細菌污染而不能觀察，占樣本總數(shù)的13.33％。在室溫環(huán)境下24h檢出2例、48h1例、72h1例；而在冷藏24h檢出1例、48h1例、72h2例。可見冷藏環(huán)境下污染出現(xiàn)較晚。
　　結論：
　　1、在0-72小時的范圍內(nèi)，隨著保存時間的延長，室溫環(huán)境及冷藏環(huán)境下未固定