我國口岸常見蚊類rDNA-ITS和COI基因數(shù)據(jù)庫建立與分析.pdf

1、[目的]：建立我國口岸常見蚊蟲rDNA-ITS、COI基因數(shù)據(jù)庫，以此實(shí)現(xiàn)蚊蟲的分子鑒定，并基于各地區(qū)尖音庫蚊復(fù)合組的COI基因建立溯源的分子基礎(chǔ)。
　　[方法]：于2012年采集我國口岸常見蚊蟲（淡色庫蚊、致倦庫蚊、三帶喙庫蚊、白紋伊蚊、中華按蚊、騷擾阿蚊），通過核酸提取、基因擴(kuò)增、質(zhì)粒載體構(gòu)建和克隆測序、序列比對、構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹及多重PCR和凝膠電泳鑒定各蚊種;并分別對江蘇各地區(qū)尖音庫蚊mtDNA-COI基因進(jìn)行測序，序列比對

2、和系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建，建立COI基因數(shù)據(jù)庫。
　　[結(jié)果]：淡色庫蚊、致倦庫蚊、三帶喙庫蚊、白紋伊蚊、騷擾阿蚊可克隆獲得差異的rDNA-ITS，其中野外淡色庫蚊及實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的均為1273bp，三帶喙庫蚊的克隆片度大小為995bp，致倦庫蚊為1314bp，白紋伊蚊為1197bp，騷擾阿蚊為1013bp，而中華按蚊未擴(kuò)增出全長rDNA-ITS，僅擴(kuò)增獲到rDNA-ITS2片段;通過多重PCR產(chǎn)物凝膠電泳，可獲得各蚊種的特異性電泳條帶;并