綠原酸對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞活性影響的初步研究.pdf

1、接骨草屬于忍冬科接骨木屬,接骨草的根、莖、葉、花及果實(shí)均可入藥。在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中,它可治療風(fēng)濕疼痛、跌打損傷和骨折。目前關(guān)于接骨草防治骨質(zhì)疏松和促進(jìn)成骨的報(bào)道較多,但其促進(jìn)成骨及骨折愈合的有效成分尚不清楚。本研究以接骨草的主要化學(xué)成分之一——綠原酸(chlorogenicacid,CGA)為研究對(duì)象,研究其對(duì)體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞活性的影響,以期闡明其是否具有成骨活性,為接骨草的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　本研究以成骨細(xì)胞系MC3T3-

2、E1為模型,用MTT法檢測(cè)CGA對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響、用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)CGA對(duì)成骨細(xì)胞ALP活性的影響,并用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)CGA對(duì)成骨細(xì)胞成骨相關(guān)基因表達(dá)的影響。
　　MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,11.02~88.19μmol/L的CGA對(duì)成骨細(xì)胞的增殖均具有明顯的促進(jìn)作用,因此,本研究以22.05和44.09μmol/L兩個(gè)濃度的CGA進(jìn)行進(jìn)一步研究。
　　CGA對(duì)成骨細(xì)胞ALP活性的影響的結(jié)果表明,CGA長(zhǎng)期處

3、理(6天)具有抑制成骨細(xì)胞ALP活性的作用。
　　實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中,CGA可以促進(jìn)Col-1、OCN、BMP-2基因的表達(dá)。CGA短期處理細(xì)胞(2天)可以促進(jìn)Jun-D、c-Jun、c-fos,Fra-1,Fra-2,ALP,Runx2,Osterix等基因的表達(dá);CGA長(zhǎng)期處理細(xì)胞(6天)可以促進(jìn)BSP,OPN基因的表達(dá)。
　　綜上所述,CGA具有調(diào)控成骨細(xì)胞增殖和分化的能力,對(duì)成骨細(xì)胞前體的分