免疫球蛋白A等的免疫共振散射光譜分析.pdf

1、第一部分: 綜述了近年來(lái)共振散射技術(shù)在分析化學(xué)和液相金納米微粒研究中的應(yīng)用；介紹了金納米微粒的制備、金標(biāo)記在免疫分析中的應(yīng)用以及免疫球蛋白A與轉(zhuǎn)鐵蛋白的分析進(jìn)展。引用文獻(xiàn)212篇。 第二部分： IgA免疫復(fù)合物微粒的共振散射光譜研究及其分析應(yīng)用在pH6.2的Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液中，及聚乙二醇4000存在下，免疫球蛋白A（IgA）與羊抗人免疫球蛋白A血清發(fā)生特異性結(jié)合，形成了粒徑約為1100nm的抗原-抗

2、體免疫復(fù)合物微粒；它在340nm，390nm，420nm，450nm，470nm，520nm附近有6個(gè)共振散射峰?？疾炝藀H值、不同分子量聚乙二醇、羊抗人IgA血清用量、溫度及反應(yīng)時(shí)間對(duì)共振散射光譜測(cè)定IgA的影響。在選定條件下，IgA濃度在0.133-4.67μg? mL-1范圍內(nèi)均與340nm和470nm處的共振散射強(qiáng)度呈線性關(guān)系，其回歸方程分別為ΔI340 nm =18.61CIgA+3.19、ΔI470nm=18.57CIgA+

3、6.51，檢出限分別為0.068μg?mL-1、0.072μg?mL-1。該法已用于人血清中IgA的測(cè)定，并與免疫比濁法測(cè)定結(jié)果作線性回歸分析，其斜率、截距和相關(guān)系數(shù)分別為1.064、－0.213和0.9299，結(jié)果滿(mǎn)意。 第三部分： 金標(biāo)記免疫共振散射光譜法檢測(cè)痕量免疫球蛋白A采用檸檬酸三鈉改良法制備了粒徑約為10.0nm的納米金，并用于標(biāo)記羊抗人免疫球蛋白A。在pH 5.6的Na2HPO4- C6H8O7緩沖溶液和P

4、EG存在下，金標(biāo)羊抗人免疫球蛋白A與免疫球蛋白A（IgA）產(chǎn)生特異性結(jié)合生成免疫金復(fù)合物，導(dǎo)致580nm處金納米粒子的共振散射峰增強(qiáng)。免疫球蛋白A濃度在0.0054-1.35μg·mL-1范圍內(nèi)與580nm處的共振散射強(qiáng)度成線性關(guān)系，方法的檢出限為4.18ng·mL-1，用于定量分析人血清中的免疫球蛋白A, 結(jié)果滿(mǎn)意。 第四部分: 免疫共振散射光譜分析法測(cè)定轉(zhuǎn)鐵蛋白在pH 5.0 的Na2HPO4-檸檬酸緩沖溶液及聚乙二

5、醇6000存在下，羊抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白與相應(yīng)的抗原轉(zhuǎn)鐵蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，生成抗體抗原免疫復(fù)合物，導(dǎo)致體系在340nm與470nm處的共振散射峰增強(qiáng)，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)濃度在0.10-2.50μg/mL范圍內(nèi)，隨著轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度的增加，340nm和470nm處的共振散射強(qiáng)度線性增強(qiáng)，其檢出限分別為0.049μg/mL、0.042μg/mL,用于定量分析人血清中的轉(zhuǎn)鐵蛋白,結(jié)果滿(mǎn)意。 第五部分： 免疫球蛋白M的共振散射光譜分析法在