UV-B輻射對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞膜系統(tǒng)及DNA的影響.pdf

1、本課題以液體懸浮培養(yǎng)的發(fā)狀念珠藻細(xì)胞為研究對(duì)象，人工模擬UV-B輻射，研究UV-B輻射對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞膜系統(tǒng)及DNA的影響，探究發(fā)狀念珠藻細(xì)胞對(duì)UV-B輻射的響應(yīng)，主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　?。?）在UV-B輻射下，研究發(fā)狀念珠藻細(xì)胞中活性氧、脂質(zhì)過氧化以及抗氧化酶活性的變化，探討UV-B輻射對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞活性氧代謝的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在低強(qiáng)度（1W/m2）和高強(qiáng)度（5W/m2）UV-B輻射下，處理時(shí)間延長，發(fā)狀念珠藻細(xì)胞中的超氧

2、陰離子自由基(· O2-)與過氧化氫(H2O2)的含量顯著增加，·O2-的含量在輻射處理6h時(shí)達(dá)到最大480.62、510.34nmol·g-1DW，分別為對(duì)照的160.09％和169.99%；H2O2的含量是持續(xù)增加，在48h達(dá)到210.24和229.89nmol·g-1DW。丙二醛（MDA）含量在48h時(shí)達(dá)到0.085和0.147μmol·g-1DW，分別為對(duì)照的251.70%和413.72%；質(zhì)膜相對(duì)透性不斷增大。超氧化物歧化酶（

3、SOD）和過氧化氫酶（CAT）的活性先升高后降低，在輻射12h時(shí)均達(dá)到最大；抗壞血酸過氧化物酶（APX）的活性在輻射初期（0-6 h）呈增長趨勢，隨后經(jīng)低強(qiáng)度（1W/m2）UV-B輻射處理的APX活性變化不穩(wěn)定，高強(qiáng)度（5W/m2）UV-B輻射處理的APX活性迅速降低。
　　（2）發(fā)狀念珠藻細(xì)胞膜經(jīng)UV-B輻射處理后形態(tài)發(fā)生改變；其主要成分糖脂、磷脂含量降低，這是由于紫外脅迫破壞參與脂質(zhì)合成的酶，致使糖脂、磷脂合成受阻；UV-B輻

4、射可誘導(dǎo)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞膜蛋白中33 kDa蛋白質(zhì)含量增加，也可誘導(dǎo)新的58kDa、114kDa蛋白質(zhì)合成；此外，UV-B輻射處理還可增加發(fā)狀念珠藻細(xì)胞中不飽和脂肪酸(C16:1，C18:1)的含量，利于發(fā)狀念珠藻細(xì)胞進(jìn)行光合作用，不飽和脂肪酸還可調(diào)節(jié)藍(lán)藻對(duì)紫外脅迫的耐受性，利于發(fā)狀念珠藻細(xì)胞在紫外脅迫環(huán)境下生存。
　?。?）用CTAB法提取發(fā)狀念珠藻細(xì)胞DNA，研究UV-B輻射對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞DNA的影響，結(jié)果如下：通過對(duì)各種細(xì)胞

5、破碎方法的比較，得出液氮研磨法破碎細(xì)胞所得的DNA純度高，不易降解。因此，本實(shí)驗(yàn)采用液氮研磨法破碎細(xì)胞，CTAB法提取DNA，并進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，研究UV-B輻射對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞DNA的影響。結(jié)果表明，低強(qiáng)度（1W/m2）短時(shí)間(24h)的UV-B輻射處理對(duì)發(fā)狀念珠藻細(xì)胞DNA造成的降解不明顯，長時(shí)間(48h)處理造成DNA降解；高強(qiáng)度（5W/m2）UV-B輻射會(huì)使DNA完全降解。UV-B輻射會(huì)導(dǎo)致發(fā)狀念珠藻細(xì)胞DNA鏈斷裂；發(fā)狀念珠