基于核酸探針的汞離子和鉛離子檢測.pdf

1、目前,重金屬離子污染已對(duì)人類生存環(huán)境造成了極大威脅。許多有毒重金屬離子難以被微生物降解,可以通過生物鏈的蓄積進(jìn)入人體,嚴(yán)重威脅著人類的身體健康及生命安全。因此,發(fā)展簡單、快捷、靈敏、實(shí)用的重金屬離子檢測方法對(duì)控制環(huán)境污染、保護(hù)人類健康都具有重要的意義。核酸探針具有實(shí)時(shí)、快捷、穩(wěn)定、直觀的超靈敏等分析檢測的優(yōu)點(diǎn),使其在醫(yī)藥、環(huán)境、食品等眾多領(lǐng)域的重金屬分析檢測中,具有極其廣闊的發(fā)展空間和應(yīng)用前景。因此,在本文的研究中,我們構(gòu)建了以下三種基

2、于核酸探針的汞離子和鉛離子的檢測方法：
　　 ⑴基于環(huán)糊精/芘協(xié)同作用熒光檢測汞離子(Hg2+)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了一條莖部含有錯(cuò)配胸腺嘧啶(T)堿基對(duì),兩端分別標(biāo)記芘分子的DNA探針。在Hg2+存在下,探針分子通過形成T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)以及γ-環(huán)糊精的協(xié)同作用,產(chǎn)生芘分子的二聚體熒光信號(hào)。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,傳感體系的響應(yīng)信號(hào)在Hg2+濃度為0.5μM至3.0μM的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢出限為0.3μM。此方法具有良好的選擇性,

3、同時(shí)基于芘分子二聚體熒光長壽命的特點(diǎn),利用時(shí)間分辨技術(shù),有望應(yīng)用于復(fù)雜生物樣品Hg2+檢測。
　　 ⑵基于脫氧核酶(DNAzyme)免標(biāo)記比色檢測鉛離子(Pb2+)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了一條包含DNAzyme以及富鳥嘌呤堿基(G)鏈的發(fā)夾型結(jié)構(gòu)的核酸探針,通過Pb2+作用后,將DNAzyme中底物鏈釋放出來,形成G-四鏈體引發(fā)顯色反應(yīng),通過吸收信號(hào)的響應(yīng)來達(dá)到檢測pb2+的目的。體系的響應(yīng)信號(hào)在pb2+濃度為5 nM至100nM的范圍內(nèi)呈