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1、本論文研究了微流控芯片制作及食品安全檢測(cè)應(yīng)用。介紹了微流體芯片的制作原理及進(jìn)展、增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光體系的類型、磁性微粒技術(shù)和自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù);簡(jiǎn)要地概括和總結(jié)了近年來(lái)化學(xué)發(fā)光免疫分析法與微流控芯片結(jié)合分析分方法的研究進(jìn)展;展望了以化學(xué)發(fā)光為檢測(cè)手段的微流體分析芯片在環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全檢測(cè)、疾病檢測(cè)、新藥開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用。在微流控芯片制作的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)前烘溫度、顯影時(shí)間是影響最終圖形分辨率和高深寬度比的主要工藝條件,并建立了在實(shí)驗(yàn)室制作PDMS微流
2、控芯片的新方法。SU-8光敏膠前烘溫度控制在65℃烘6小時(shí)、95℃烘2小時(shí),曝光時(shí)間12-14小時(shí),中烘溫度控制在65℃烘5小時(shí)、95℃烘2小時(shí),制作的圖形具有高的分辨率和深寬比。將PDMS與固化劑以10:1的比例混勻,于65℃烘40分鐘可使PDMS進(jìn)行聚合。該方法用于PDMS微流控芯片的制作并用于皮蛋中鉛離子的測(cè)定,其結(jié)果令人滿意。 以PDMS微流控芯片的微通道作為樣品通道及檢測(cè)通道,以蠕動(dòng)泵作為進(jìn)樣推動(dòng)力,并基于過(guò)氧化苯甲酰在堿性介
3、質(zhì)中能直接氧化魯米諾反應(yīng)產(chǎn)生強(qiáng)烈的化學(xué)發(fā)光,建立了一個(gè)高靈敏度,準(zhǔn)確,快速,簡(jiǎn)便測(cè)定過(guò)氧化苯甲酰的微流控芯片-化學(xué)發(fā)光檢測(cè)新方法。利用該方法測(cè)定過(guò)氧化苯甲酰,其線性范圍為1×10-7~1×10-5g/mL,檢出限為:1.0×10-8g/mL,對(duì)5.0×10-6g/mL過(guò)氧化苯甲酰8次平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.8%。樣品加標(biāo)回收率為95.7%~104.4%。將偶聯(lián)有OVA-CLB的金磁微粒通過(guò)外加磁場(chǎng)固定于玻璃微通道內(nèi),并使它同樣品中的
4、CLB相互競(jìng)爭(zhēng)和CLB抗體結(jié)合,所結(jié)合的抗體與HRP標(biāo)記羊抗兔IgG反應(yīng)后,利用HRP催化對(duì)碘苯酚增強(qiáng)的魯米諾-過(guò)氧化氫體系化學(xué)發(fā)光,建立了測(cè)定尿液中CLB的流動(dòng)注射增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光免疫分析新方法。在選定的實(shí)驗(yàn)條件下,化學(xué)發(fā)光信號(hào)與CLB濃度在1×10-11g/ml-1×10-10g/ml成良好的線性關(guān)系,其相關(guān)系數(shù)為0.99719。對(duì)同一樣品連續(xù)11次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2%。每次分析測(cè)定需15min。對(duì)尿液中CLB進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果比較
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