邯邢鐵礦鏈霉菌的分離方法與系統(tǒng)分類研究.pdf

1、選用M5、M5’、水瓊脂3種培養(yǎng)基，結(jié)合自行設(shè)計(jì)的鐵礦浸汁培養(yǎng)基，以重鉻酸鉀做為細(xì)菌抑制劑，以0.125％的甜菜堿或丙酮酸鈉的為生產(chǎn)促進(jìn)劑，對(duì)邯邢礦區(qū)鐵礦典型樣品鏈霉菌分離情況進(jìn)行了比較研究。結(jié)果表明：不同樣品在不同培養(yǎng)基中分離獲得的菌落數(shù)量與種類不同，鐵礦浸汁培養(yǎng)基對(duì)各類樣品的分離效果均最佳，添加甜菜堿或丙酮酸鈉可以提高分離效率，重鉻酸鉀不能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。
　　 采用基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育分析、形態(tài)學(xué)、生理生化特性研

2、究、細(xì)胞化學(xué)組分分析以及數(shù)值分類等分類技術(shù)，對(duì)分離和純化得到的43株典型菌株進(jìn)行分類，結(jié)果表明供試菌株均屬鏈霉菌屬(Streptomyces)，分別與19個(gè)已知鏈霉菌系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系最近。除163001、163005等10株菌與已知菌序列相同外，其余33株16SrDNA 序列與已知種存在差異，最高序列相似性在98.31％~99.92％間。其中菌株195004、195001與刺疣鏈霉菌(Streptomyces spinoverrucosus

3、)同源性為99.47％、99.39％，菌株034005 與紅灰鏈霉菌(Streptomyces rubrogriseus)同源性為99.09％，菌株195005 與小鏈霉菌(Streptomyces parvus）同源性為99.77％，菌株195011 與細(xì)黃鏈霉菌(Streptomycesmicroflavus)同源性為99.92％，菌株035035 與淺灰白鏈霉菌(Streptomyces griseoloalbus)同源性為98.

4、70％，菌株035005 與脆弱鏈霉菌(Streptomyces fragilis)同源性為98.39％，菌株032004、032007與弗氏鏈霉菌(Str等3種培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征，采用平皿插片法進(jìn)行菌體形態(tài)特征的觀察，并進(jìn)行了碳源利用、酶類產(chǎn)生和NaCl耐受性等實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞壁化學(xué)組分分析。結(jié)果表明，所有供試菌株的細(xì)胞壁含L,L-DAP，均不含meso-DAP。
　　 全部供試菌株均不含特征性糖（糖型C），細(xì)胞壁化學(xué)組分屬于Ⅰ型。