版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、5-羥甲基糠醛氧化酶(5-Hydroxymethylfurfural oxidase,HMFO)是葡萄糖-甲醇-膽堿氧化還原酶家族中用于氧化底物5-羥甲基糠醛的一種酶。該底物經(jīng)4步連續(xù)催化反應后,可生成產(chǎn)物2,5-呋喃二甲酸。2,5-呋喃二甲酸可作為一種前體材料用于新型聚酯材料的生產(chǎn),可有效減少石油資源的消耗,因此對環(huán)境的保護作出重要貢獻。類彈性蛋白(Elastin-like polypeptide,ELPn)是一段由纈氨酸-脯氨酸-甘
2、氨酸-X-甘氨酸(VPGXG)組成的重復序列,具有在高溫下發(fā)生可逆相變的特性,因而被用于蛋白質研究的多個方面,如蛋白質純化、固定及藥物蛋白靶向性的提高。
本課題從來源于Methylovorus sp.strain MP688中的HMFO基因片段出發(fā),利用分子生物學方法分別構建含有ELPn的兩種HMFO表達載體。在獲得表達菌后利用ELPn在高于相變溫度發(fā)生可逆相變的特性,分別獲得HMFO-ELP6和HMFO-ELP10兩種融合蛋
3、白。根據(jù)對HMFO-ELPn及HMFO的溶解率測定可知,ELP作為融合標簽不僅可以解決單獨表達HMFO易形成包涵體的問題,同時發(fā)現(xiàn)HMFO-ELPn融合蛋白在反應條件下的聚沉率較低,有利于催化反應的進行。隨后利用圓二色譜、熒光光譜分析ELPn對HMFO穩(wěn)定性的影響,結果表明融合蛋白中的ELPn不會影響HMFO的蛋白二級結構,且有利于提高HMFO的穩(wěn)定性。最后將HMFO和HMFO-ELPn在25℃pH8.0的最優(yōu)條件下進行催化反應比較其催
4、化效果,得出HMFO-ELP6在反應24 h后產(chǎn)物FDCA得率為HMFO的1.3倍。
連續(xù)催化反應中的副產(chǎn)物H2O2會對反應產(chǎn)生抑制作用并破壞酶的穩(wěn)定性,為去除該副產(chǎn)物,本課題引入過氧化氫酶(hydrogenperoxide enzyme,CAT)。該酶在反應過程中消耗H2O2生成H2O和O2,消除H2O2對反應不利因素并提供氧氣促進反應快速進行。利用HMFO與CAT構成雙酶催化體系,結果表明,引入CAT可有效提高反應催化速率
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 5-羥甲基糠醛制備研究.pdf
- 酶法催化氧化5-羥甲基糠醛轉化2,5-呋喃二甲酸.pdf
- 單糖轉化制備5-羥甲基糠醛的研究.pdf
- 食品中5-羥甲基糠醛酶聯(lián)免疫檢測方法研究.pdf
- 微波輔助制備5-羥甲基糠醛的實驗研究.pdf
- 固體酸堿催化麥稈制備5-羥甲基糠醛.pdf
- 高梁稈化學轉化制5-羥甲基糠醛.pdf
- 生物質基小分子5-羥甲基糠醛的選擇性氧化研究.pdf
- 5-羥甲基糠醛(5-HMF)氧化制備2,5-呋喃二甲酸(FDCA).pdf
- 棉桿水熱法制備5-羥甲基糠醛.pdf
- 離子液體催化劑制備5-羥甲基糠醛的研究.pdf
- 5-羥甲基糠醛催化還原制備2,5-二甲基呋喃.pdf
- 雙金屬氧化物負載釕催化5-羥甲基糠醛加氫性能的研究.pdf
- 固體炭磺酸催化制備5-羥甲基糠醛.pdf
- 單步5-羥甲基糠醛及其衍生物的生產(chǎn).pdf
- 葡萄糖催化轉化制備5-羥甲基糠醛的研究.pdf
- 5-羥甲基糠醛的檢測方法及其在食品中產(chǎn)生研究.pdf
- 金屬氧化物催化葡萄糖脫水合成5-羥甲基糠醛.pdf
- 離子液體中單糖催化脫水制5-羥甲基糠醛.pdf
- 離子液體中糖類催化轉化制備5-羥甲基糠醛.pdf
評論
0/150
提交評論