電化學(xué)氧化熒光衍生方法及其應(yīng)用.pdf

1、本文由兩部分組成：文獻(xiàn)綜述和研究報(bào)告。 第一部分為文獻(xiàn)綜述部分。 文獻(xiàn)綜述從三個(gè)方面論述了熒光衍生方法。首先詳細(xì)介紹了化學(xué)衍生法、電化學(xué)衍生法、光化學(xué)衍生法等常用的熒光衍生方法，并結(jié)合實(shí)例敘述了每一種衍生方法的原理及特點(diǎn)；然后引用最新的研究文獻(xiàn)詳細(xì)歸納了熒光衍生方法的應(yīng)用，包括在金屬離子分析中的應(yīng)用和在藥物及有機(jī)物分析中的應(yīng)用；最后根據(jù)熒光衍生方法的目前現(xiàn)狀，提出其今后發(fā)展的趨勢(shì)。 第二部分為研究報(bào)告部分，分為四

2、個(gè)小部分。 第一部分報(bào)道了一種在線電化學(xué)氧化熒光分析新模式來測定甲氨蝶呤。這個(gè)方法是結(jié)合停留技術(shù)在流通池中用恒定電位將甲氨蝶呤氧化為強(qiáng)熒光產(chǎn)物2，4-二氨基蝶啶-6-羧酸。在選擇的最優(yōu)化條件下，分別在激發(fā)波長和發(fā)射波長為380 nm和465 nm處測定了2，4-二氨基蝶啶-6-羧酸的熒光強(qiáng)度。甲氨蝶呤的濃度在2.0×10<'-7>～1.0×10<'-5>g/mL范圍內(nèi)有很好的線性，檢測限為5.2x10<'-8>g/mL(3σ)。

3、應(yīng)用本方法已經(jīng)成功測定了人尿樣中的甲氨蝶呤，回收率在94.3％～102.5％之間。 第二部分采用流動(dòng)注射在線電化學(xué)氧化熒光分析用于葉酸的測定。該方法通過在流路中的流通電氧化池將弱熒光物質(zhì)葉酸氧化成為具有較強(qiáng)熒光的蝶呤-6-羧酸，從而進(jìn)行測定。在0.02 mol/L,pH=8的NaH<,2>PO<,4>-Na<,2>HPO<,4>緩沖溶液中，電解質(zhì)NaCl濃度為0.01 mol/L，氧化電位為1.100V時(shí)，氧化產(chǎn)物蝶呤-6-羧酸

4、的最大λ<,ex>和λ<,em>分別為370 nm和460 nm。在此最佳條件下，葉酸的濃度和熒光信號(hào)的增強(qiáng)強(qiáng)度在1.0×10<'-7>～1.0×10<'-5>g/mL的范圍內(nèi)有很好的線性關(guān)系，檢出限為4.2x10<'-8>g/mL(3σ)。該方法已經(jīng)用于B族復(fù)合維生素及奶粉中葉酸含量的測定。 第三部分利用分子印跡固相萃取結(jié)合流動(dòng)注射熒光分光光度法測定了第四代喹諾酮類抗菌藥甲磺酸物帕珠沙星。帕珠沙星在線富集到分子印跡固相萃取微柱

5、上，然后用CH<,3>CN-HAc(95∶5，v/v)溶液將富集的帕珠沙星洗脫到流通池進(jìn)行熒光測定。實(shí)驗(yàn)中詳細(xì)研究了富集、洗脫和測定條件。在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下，帕珠沙星的濃度對(duì)熒光強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為5×10<'-8>g/mL～4×10<'-6>g/mL，檢出限為8.6×10<'-9>g/mL(3σ)。對(duì)濃度為1×10<'-7>g/mL的帕珠沙星進(jìn)行七次平行測定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.72％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，結(jié)合分子印跡-固相萃取可以極大

6、的提高熒光分析法的選擇性和靈敏度。該方法已經(jīng)成功應(yīng)用于人血清和尿樣中甲磺酸帕珠沙星的測定。第四部分合成和表征了一種分子印跡聚合物，并用它作為選擇性的固相萃取吸附劑結(jié)合電化學(xué)氧化熒光分析法，選擇性的富集和測定了血清和尿樣中的甲氨蝶呤。甲氨蝶呤首先預(yù)富集在裝滿分子印跡聚合物的固相萃取微柱上，然后洗脫出來。洗脫液經(jīng)過電化學(xué)氧化后通過熒光分光光度計(jì)進(jìn)行測定。實(shí)驗(yàn)中詳細(xì)研究了富集、洗脫、電化學(xué)氧化和測定的條件，在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下，甲氨蝶呤的濃度與