分子印跡聚合物富集新免蛋白pFKBP23及合成DNA梳狀高分子的研究.pdf

1、本人的工作分為兩個部分，第一部分的工作內容是用蛋白質印跡聚合物分離富集天然蛋白FKBP23。第二部分的工作內容是在DNA鏈的指定位點上修飾高分子鏈PEG的研究。
　　 分子印跡技術源于20世紀40年代的免疫學。它是一種模擬抗體-抗原相互作用的人工生物模板技術，可以針對不同的目的，人工合成出具有特定選擇性識別位點的模板聚合物。以蛋白質為模板的相關研究多集中在天然復雜生物素的富集和提取上。目前為止，用分子印跡聚合物代替生物抗體來研究

2、蛋白質與蛋白質之間相互作用的報道還很少見。
　　 第一部分的工作是用分子印跡技術從豬肝中提取和富集天然蛋白FKBP23。合成具有羧基和吡啶雙重識別基團側鏈的輔助識別聚合物鏈(ARPCs)。將在大腸桿菌中克隆表達的pig FKBP23(FK506 binding protein23)模板蛋白與其進行自組裝，而后于固相載體上，將該組裝體與丙烯酰胺進行交聯(lián)聚合反應，洗脫模板后得到蛋白質印跡聚合物，以其作為抗體取代物吸附內質網體(End

3、oplasmicreticulum，ER)提取物來提取天然蛋白FKBP23，天然pFKBP23被富集了123倍。這表明了用克隆蛋白質做模板制備的分子印跡聚合物可以用來富集內質網體中的天然的微量蛋白質。
　　 目前含DNA高分子的研究主要利用共價鍵和非共價鍵作用(靜電作用)合成復合物，用于運輸治療基因，DNA檢測，合成新型納米材料和合成膠體。這些復合物包括DNA-CL自組裝復合物，直鏈狀和梳狀嵌段共聚物。DNA被修飾的位點基本都在

4、鏈端的堿基上，也有少部分在鏈端的糖環(huán)上。然而，目前還沒有把高分子鏈接枝到DNA的磷酸骨架上構建高分子材料的研究報道。
　　 在第二部分的研究中，我們將帶有炔基和重氮基這兩種官能團的活性小分子，采用無催化的O-H插入反應，特異性地修飾到DNA分子磷酸骨架磷原子的羥基上，采用核磁共振和MADIL-TOF對其進行表征。在成功修飾了小分子后，采用click反應，將端基修飾上疊氮基團的高分子鏈PEG接合到修飾后的DNA鏈上，形成梳狀結構。