裂壺藻MYA-1381培養(yǎng)條件優(yōu)化及藻油DHA抗肥胖的初步研究.pdf

1、DHA，二十二碳六烯酸，是至今為止發(fā)現(xiàn)的碳鏈最長的一種長鏈多不飽和脂肪酸，是一種人體自身不能合成且必須額外補充的必需脂肪酸。DHA在人體中主要分布在大腦皮層、視網(wǎng)膜、心肌、母乳等處，具有諸多重要的生理功能，例如，攝入DHA可以大大的降低患上心血管疾病、關(guān)節(jié)炎、心律不齊、哮喘和血脂代謝等慢性疾病的概率。DHA提取純化的傳統(tǒng)方法主要來源于海洋魚類。隨著DHA的生理功能的不斷發(fā)現(xiàn)，導致DHA的需求量越來越大，然而傳統(tǒng)來源遠遠不能夠滿足市場的需

2、求。研究表明，魚類體內(nèi)的DHA源于其食物鏈最底層的食物海洋微生物。目前，通過海洋微生物發(fā)酵生產(chǎn)DHA已經(jīng)成為研究的熱門。
　　目前發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于生產(chǎn)的富含DHA的海洋微藻并不多，裂壺藻是最理想的工業(yè)化生產(chǎn)DHA的藻株。裂壺藻（Schizochytrium limacinum）是一種的真核海洋微藻，營養(yǎng)方式為異養(yǎng)兼自養(yǎng)，生長繁殖速度快，生命力旺盛，可抵御不良生活環(huán)境，對營養(yǎng)物質(zhì)條件要求不高，主要依靠碳源、氮源和無機鹽生長，藻粉和藻油D

3、HA對人體安全、無毒副作用。但是，裂壺藻工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)還存在諸多問題有待解決。
　　本文中，我們對裂壺藻MYA-1381藻種進行了純化、保藏，初步研究了裂壺藻的基本生長特性和培養(yǎng)條件，如培養(yǎng)基的pH、溫度、種齡和接種量等對其生長的影響，為了更經(jīng)濟高效的提高裂壺藻的生物量和DHA產(chǎn)量，通過單因素法對培養(yǎng)基中四種組分葡萄糖、酵母粉、玉米漿、海鹽的濃度優(yōu)化，得到了培養(yǎng)基最佳添加濃度和培養(yǎng)時間，然后進一步采用Box-Behnken Des

4、ign優(yōu)化方法優(yōu)化培養(yǎng)基組分配比。最后得到了利于裂壺藻生物量和DHA積累的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基初始pH為6.5，裝液量為100/250 mL，接種量10％，培養(yǎng)溫度25℃，搖床轉(zhuǎn)速170 rpm/min，培養(yǎng)基組分分別是葡萄糖52.68 g/L、酵母粉8.78 g/L、玉米漿5.48 g/L、海鹽18.40 g/L，培養(yǎng)時間為96 h，生物量達到14.25 g/L，DHA含量可達133.60 mg/g。
　　同時，我們還初步研

5、究了裂壺藻藻油DHA的生理功能——減緩高脂飲食誘導小鼠肥胖的作用。以C57BL/6J小鼠作為研究對象，從體重及相關(guān)組織重量、血清相關(guān)指標、肝組織形態(tài)及肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因等方面分析比較不同純度DHA的裂壺藻藻油對高脂飲食小鼠的影響，并以常規(guī)飲食和市售魚油為對照。研究發(fā)現(xiàn)，不同純度DHA藻油從早期就能防止體重增加，而魚油在處理后期才顯示較好的效果;同時藻油和魚油均可有效預防高脂飲食誘導的體重增加和腹部脂肪積累，小鼠中血清TG和TC的水平顯