發(fā)光細(xì)菌法在線生物毒性監(jiān)測(cè)儀器性能指標(biāo)檢驗(yàn)方法

1、DB41/T XXXX—XXXX6A附 錄 A（規(guī)范性）發(fā)光細(xì)菌法在線生物毒性監(jiān)測(cè)儀器性能指標(biāo)檢驗(yàn)方法A.1 試劑A.1.1 純水：蒸餾水或同等純度的水。 A.1.2 毒物標(biāo)準(zhǔn)樣品：七水合硫酸鋅（分析純） 。 A.1.3 鋅標(biāo)準(zhǔn)工作液：用毒物標(biāo)準(zhǔn)樣品及純水稀釋定容配制。 A.1.4 發(fā)光細(xì)菌：根據(jù)儀器性能指標(biāo)要求選擇發(fā)光細(xì)菌菌種，并確定貯存和測(cè)量條件。 A.2 性能指標(biāo)檢驗(yàn)方法 A.2.1 靈敏度待儀器穩(wěn)定運(yùn)行后，分別連續(xù)測(cè)量 1 mg

2、/L鋅標(biāo)準(zhǔn)工作液 3 次，計(jì)算 3 次測(cè)量結(jié)果的平均值作為靈敏度判定值。A.2.2 溫度控制誤差用溫度測(cè)量裝置分別測(cè)量?jī)x器發(fā)光細(xì)菌貯存溫度和測(cè)量溫度。待儀器運(yùn)行穩(wěn)定后，每隔 10 min測(cè)量其溫度 1 次，共測(cè)量 6 次，依次記錄讀數(shù)T1，T2……，T6，分別計(jì)算讀數(shù)相對(duì)設(shè)定值的偏差值，取絕對(duì)值最大的偏差作為溫度控制誤差。A.2.3 零點(diǎn)漂移儀器穩(wěn)定運(yùn)行后，導(dǎo)入去離子水或者蒸餾水，連續(xù)測(cè)量 24 h，期間每隔 2 h記錄一次零點(diǎn)示值，絕

3、對(duì)值最大的零點(diǎn)示值為儀器的零點(diǎn)漂移。A.2.4 EC50驗(yàn)證制備 550 mg/L 的鋅離子標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將儀器反應(yīng)時(shí)間設(shè)定為 30 min；導(dǎo)入鋅離子標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋，使反應(yīng)溶液中鋅離子（Zn2+）最終濃度 Ci 達(dá)到 1.6 mg/L、2.2 mg/L、3.0 mg/L、3.3 mg/L、5.1 mg/L，分別記錄檢測(cè)結(jié)果 Ti，并按公式（A.1）建立 Ci 與 Ti 的回歸方程，求得參數(shù) a、b，計(jì)算得出 Ti = 50%時(shí)對(duì)應(yīng)的

4、 Ci 值為樣品的 EC50 值。將儀器反應(yīng)時(shí)間設(shè)定為 30 min；導(dǎo)入鋅離子標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋，使反應(yīng)溶液中鋅離子（Zn2+）最終濃度達(dá)到 EC50 值，驗(yàn)證測(cè)得的抑制率與 50%的差值。?????????????????????????????????????????????????????????????????????(A.1) 𝑇𝑖 = 𝑎ln 𝐶⻕

5、4; + 𝑏式中：Ti —— 鋅離子濃度為Ci時(shí)的抑制率；Ci —— 反應(yīng)溶液中鋅離子的濃度，單位為毫克每升（mg/L）。A.2.5 重復(fù)性運(yùn)行穩(wěn)定后，通入質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)溶液，記錄測(cè)量值，使用同一濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重復(fù)上述操作至少 6 次，按公式（A.2）計(jì)算在線生物毒性監(jiān)測(cè)儀的定量測(cè)量重復(fù)性RSD。DB41/T XXXX—XXXX7??????????????????????????????????????????????????

6、??????(A.2) 𝑅𝑆𝐷 = 1𝐶 ×∑𝑛𝑖 = 1(𝐶𝑖 ? 𝐶)2𝑛 ? 1 × 100%式中：RSD——在線生物毒性監(jiān)測(cè)儀重復(fù)性；——量程校正液測(cè)量平均值； C——量次數(shù)（n ≥ 6）； 𝑛——記錄次數(shù)的序號(hào)； iCi ——量程

7、校正液第i次測(cè)量值。A.2.6 平均無故障運(yùn)行時(shí)間（MTBF）儀器連續(xù)運(yùn)行至少 2 個(gè)月，總運(yùn)行時(shí)間與故障次數(shù)的比值即為平均無故障運(yùn)行時(shí)間（MTBF）。A.2.7 實(shí)際水樣比對(duì)實(shí)驗(yàn)采集實(shí)際水樣樣品，待儀器穩(wěn)定運(yùn)行后，使用儀器進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量 6 次，記錄檢測(cè)結(jié)果。按照GB/T 15441 要求，對(duì)采集水樣手工測(cè)量 3 次，按公式（A.3）計(jì)算實(shí)際水樣測(cè)量值與實(shí)驗(yàn)室國(guó)標(biāo)方法測(cè)量值的平均值之間誤差絕對(duì)值的平均值，作為儀器實(shí)際水樣比對(duì)試驗(yàn)誤差的

8、判定值。???????????????????????????????????????????????????????????????(A.3) 𝐴 =∑6i = 1|𝑋𝑖 - 𝐵|6𝐵 × 100%式中：——水樣相對(duì)誤差絕對(duì)值的平均值； 𝐴——記錄測(cè)量次數(shù)的序號(hào)； i——水質(zhì)在線自動(dòng)監(jiān)測(cè)儀測(cè)量水樣第i次的測(cè)量值； Xi——手工測(cè)量