SrPCS基因的克隆和表達(dá)分析以及長(zhǎng)喙田菁再生體系研究.pdf

1、　　 　　毒性重金屬污染已成為世界性的重大環(huán)境和人體健康問(wèn)題。尤其是土壤重金屬污染，它通過(guò)食物鏈對(duì)人類(lèi)造成的危害是不容忽視的。植物修復(fù)無(wú)疑是治理土壤重金屬污染最有前途的治理方式之一。然而，已知的超富集植物大多數(shù)傾向于生長(zhǎng)速度慢、生物量低。 　　本實(shí)驗(yàn)研究材料長(zhǎng)喙田菁(Sesbaniarostrata)是一種源于非洲熱帶的豆科植物，與Azohizobiumcauliaodons共生，形成莖瘤和根瘤。固氮效率很高，是良好的水田綠肥。長(zhǎng)喙

2、田菁具有生長(zhǎng)速度快、生物量大、生長(zhǎng)周期短、固氮能力強(qiáng)、耐受高濃度的鋅、鉛、銅、鎘等多種重金屬、可作為鉛鋅尾礦廢棄地植被重建的先鋒植物等特性，使之成為重金屬污染土壤的修復(fù)植物是有前途的。但長(zhǎng)喙田菁對(duì)重金屬的富集能力不強(qiáng)，所以，期望通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得對(duì)重金屬具有高富集能力和耐性的長(zhǎng)喙田菁。 　　在重金屬污染脅迫下，植物會(huì)啟動(dòng)不同防御機(jī)制來(lái)降低重金屬離子對(duì)細(xì)胞的毒害。其中，植物絡(luò)合素是一類(lèi)富含Cys的多肽化合物，能以Cys的巰基與重金屬發(fā)生

3、絡(luò)合作用而實(shí)現(xiàn)解毒功能。此類(lèi)物質(zhì)是由植物絡(luò)合素合酶催化合成的。 　　本研究克隆了長(zhǎng)喙田菁植物絡(luò)合素合酶(Sesbaniarostrataphytochelatinsynthase，SrPCS)的全長(zhǎng)cDNA及其基因，并構(gòu)建了其中一個(gè)SrPCScDNA釀酒酵母表達(dá)載體。同時(shí)嘗試建立長(zhǎng)喙田菁植株再生體系及其農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化體系，為進(jìn)一步在長(zhǎng)喙田菁中過(guò)量表達(dá)SrPCS基因奠定基礎(chǔ)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)獲得以下結(jié)果：1、分離、克隆得到了長(zhǎng)喙田菁植物絡(luò)合素