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1、中文 中文 4125 字出處: 出處:Okochi M, Ohta H, Tanaka T, et al. Electrochemical probe for on-chip type flow immunoassay: Immunoglobulin G labeled with ferrocenecarboaldehyde[J]. Biotechnology Kojima et al., 2003; Lim et al., 2002,
2、 2003; Saleh 和Sohn,2003; Sato et al., 2002; Wang et al., 1998, 2002; Wang 和Jin, 2003).二茂鐵衍生物常被用來做免疫分析(Lim et al., 2002, 2003; Padeste et al., 2000; Wang et al., 2002)以及DNA雜化測(cè)定的(Fig.1B)。 在兩種方法中,未標(biāo)記的二茂鐵是通過YM-30超濾而除去的
3、。超濾常進(jìn)行12-15次,直至二茂鐵的響應(yīng)峰消失。與IgG結(jié)合的二茂鐵數(shù)目的確定 結(jié)合的二茂鐵數(shù)目的確定羊抗人IgE IgG結(jié)合的二茂鐵平均數(shù)目通過原子吸收光譜儀(AA-6600G型號(hào),Shimazu,Kyoto,Japan)檢測(cè)鐵離子濃度而測(cè)定。Fc-COOH的水溶液作為鐵離子的標(biāo)準(zhǔn)溶液。IgG的濃度可以通過BCA蛋白質(zhì)分析方法檢測(cè)(Smith et al.,1985)。蛋白質(zhì)的濃度是通過三次測(cè)定而最終確定。Fc-CHO標(biāo)記 標(biāo)記Ig
4、G的ELISA分析 分析將抗原溶液(10 mM 人抗原IgE,100 µl/well)置于96孔的聚苯乙烯高密度檢測(cè)板(Corning Glass,Corning,NY)中,室溫下培育1小時(shí)。此板用含0.05% Tween 20的PBS溶液沖洗三次,然后將200 µl含有0.1%BSA(w/v)的PBS溶液加入每個(gè)孔中,室溫下培育1小時(shí)以抑制活性位點(diǎn)的非特異性吸收。經(jīng)過清洗步驟之后,加入10 mM標(biāo)記Fc-CHO的羊
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