Axin蛋白和RNA甲基化相關(guān)蛋白Mettl14在胃癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、研究背景和目的：機(jī)體在致癌因素的影響下，促使體內(nèi)的癌基因被激活和（或）抑癌基因被滅活，從而令機(jī)體失去對細(xì)胞生長的正常調(diào)控，最終導(dǎo)致腫瘤的形成。Axin蛋白為Axin基因的編碼蛋白，在人類Axin基因位于染色體16p13.3。研究表明Axin蛋白可以與多種信號分子結(jié)合，參與多條信號途徑，加速β-連環(huán)蛋白的磷酸化及降解，降低了細(xì)胞核內(nèi)β-連環(huán)蛋白的濃度。而在Wnt信號通路中，β-連環(huán)蛋白作為重要的調(diào)控因子，在細(xì)胞增殖、分化、遷移的調(diào)控中有著

2、重要的意義。另據(jù)研究顯示W(wǎng)nt信號通路在干細(xì)胞在分化調(diào)控中也具有重要的作用。因此，作為Wnt信號通路中的負(fù)調(diào)控因子，Axin蛋白可抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。腺苷酸 N6的甲基化修飾（N6-methyladenosine，m6A）是真核生物mRNA含量最多的化學(xué)修飾之一。Mettl14是2014年在哺乳動物中新發(fā)現(xiàn)的一種甲基轉(zhuǎn)移酶，它可以催化哺乳動物的mRNA進(jìn)行m6A修飾。已有研究表明，m6A修飾在細(xì)胞增殖、分化、凋亡等方面具有重要的調(diào)控作

3、用。證明Mettl14與腫瘤之間存有密切聯(lián)系；另外，m6A修飾對干細(xì)胞的分化也具有調(diào)控作用，因此Mettl14與Axin在對腫瘤的影響機(jī)制上也可能存在一定的關(guān)聯(lián)。
　　作為人類高發(fā)的惡性腫瘤，胃癌在我國的發(fā)病率為31.28/10萬人，高居第二，死亡率為22.04/10萬人，高居第三。雖然胃癌的基礎(chǔ)研究很寬泛，但是，經(jīng)查證目前尚未見有關(guān)Mettl14與Axin在胃癌中的聯(lián)合檢測報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化SP方法，分別檢測正常胃粘膜組織

4、、胃癌組織、以及癌前病變組織中Axin與Mettl14的表達(dá)情況，探討兩者與胃癌之間的關(guān)聯(lián)和影響機(jī)制，以及分析兩者在胃癌中的相關(guān)性；同時(shí)探討兩者與胃癌的分期、分型、組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。
　　方法：隨機(jī)選取2015年1月至2015年12月西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸外科，經(jīng)病理學(xué)確診為胃癌的患者外科手術(shù)切除標(biāo)本77例，所有標(biāo)本均具有完整的癌組織與正常胃粘膜組織，且臨床資料和病理學(xué)資料齊全。另隨機(jī)選取2015年1月至2015年1

5、2月于西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院門診，行胃鏡檢查的癌前病變胃粘膜組織標(biāo)本29例，患者均無胃癌病史，病理學(xué)確診為慢性萎縮性胃炎伴腸上皮化生、低級別上皮內(nèi)瘤變。上述所有標(biāo)本均通過免疫組織化學(xué)SP方法，檢測Mettl14與Axin在正常胃組織中、胃癌組織、以及癌前病變組織中的表達(dá)情況，并通過SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：77例切緣正常胃黏膜組織中，Axin陽性表達(dá)59例，陰性表達(dá)18例，陽性表達(dá)率為76.6％；77例

6、胃癌組織中，Axin陽性表達(dá)40例，陰性表達(dá)37例，陽性表達(dá)率為51.9%；29例癌前病變胃黏膜組織中，Axin陽性表達(dá)10例，陰性表達(dá)19例，陽性表達(dá)率為34.5%。正常胃黏膜組織中Axin的陽性表達(dá)率分別與胃癌組織和癌前病變組織中Axin的陽性表達(dá)率相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌前病變組織與胃癌組織相比較，Axin的陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。Axin在胃癌組織中的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、

7、分型無關(guān)（P＞0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM臨床分期和組織分化有關(guān)（P＜0.05）。77例切緣正常胃黏膜組織中，Mettl14陽性表達(dá)65例，陰性表達(dá)12例，陽性表達(dá)率為84.4%；77例胃癌組織中，Mettl14陽性表達(dá)27例，陰性表達(dá)50例，陽性表達(dá)率為35.1%；29例癌前病變胃黏膜組織中，Mettl14陽性表達(dá)18例，陰性表達(dá)11例，陽性表達(dá)率為62.1%。正常胃黏膜組織中Mettl14的陽性表達(dá)率分別與癌前病變組織和胃癌組織

8、中Mettl14的陽性表達(dá)率相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌前病變組織與胃癌組織相比較，Mettl14的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Mettl14在胃癌組織中的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、分型無關(guān)（P＞0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM臨床分期和組織分化有關(guān)（P＜0.05）。按Spearman等級相關(guān)分析方法顯示，胃癌組織中Axin和Mettl14的表達(dá)呈正相關(guān)性（P＜0.05）。
　　結(jié)論：（

9、1）正常胃黏膜組織中，Axin的陽性表達(dá)高于胃癌組織和癌前病變組織；正常胃黏膜組織中Mettl14的陽性表達(dá)高于胃癌組織和癌前病變組織，提示Axin和Mettl14都可能抑制胃癌的發(fā)生，為胃癌的靶向治療提供新的依據(jù)。（2）胃癌組織與癌前病變組織中，Axin的陽性表達(dá)無差異；Mettl14在癌前病變組織的陽性表達(dá)率高于胃癌組織，提示在癌前病變中可能已經(jīng)存在Axin基因突變。聯(lián)合檢測Axin和Mettl14，有助于篩查胃癌的癌前病變。（3）

10、Axin和Mettl14在胃癌組織中的表達(dá)均與患者性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、分型無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM臨床分期和組織分化有關(guān)。且TNM分期越晚、組織分化越差的胃癌患者，Axin和Mettl14陽性表達(dá)率越低。提示Axin和Mettl14可能抑制胃癌細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移。聯(lián)合檢測Axin和Mettl14，可以為胃癌的臨床分期診斷和預(yù)后評估提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。（4）Axin和 M ettl14在胃癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)性，提示兩者在抑制腫