濟南地區(qū)不同水體中環(huán)境激素含量測定及生物學效應研究.pdf

1、環(huán)境激素類物質廣泛存在于我們生存的環(huán)境中，對人類和其他生物的生存造成嚴重威脅。本研究首先采用重組基因酵母的方法初步檢測濟南地區(qū)不同水體(包括污水(污水處理廠進水，厭氧池，生物反應池，1A級出水，2級出水)；醫(yī)院出水(省中醫(yī)，婦幼保健院)；其他水樣(黃岡上，黃岡下，玉清湖，東平干渠，睦里莊，彭莊))中雌激素總體含量。由于重組基因酵母的方法靈敏性不高，重復性不好，進而采用高效液相色譜-質譜聯用(HPLC-MS)的方法測定這些水體中5種代表性

2、雌激素的含量(雌酮(E1)，雌二醇(E2)，雌三醇(E3)，乙炔基雌二醇(EE2)，己烯雌酚(DES))。通過之前雌激素含量測定的結果得知污水處理廠所采水樣中仍殘留較高濃度的環(huán)境激素，進而選用斑馬魚作為實驗對象進行生物學效應研究，采用real-time PCR的方法研究不同濃度雌酮及污水對成年雄性斑馬魚內分泌相關基因表達變化情況的影響(vtg，esr)。具體實驗結果如下:
　　首先采用重組基因酵母法檢測所采全部水樣中雌激素總體含量

3、。在所有水樣中，能檢測到雌激素活性的有婦幼保健院和省中醫(yī)出水，河流湖泊及排污口上下游水樣均未檢測出雌激素活性，而污水處理廠水樣中厭氧池，生物反應池，1A級出水，2級出水未檢出，但污水處理廠進水水樣中毒性太高，導致酵母死亡，無法測定其雌激素含量。
　　由于重組基因酵母法靈敏度低，重復性差，進而采用高效液相色譜-質譜聯用的方法(HPLC-MS法)檢測水體中5種雌激素含量(雌酮(E1)，雌二醇(E2)，雌三醇(E3)，乙炔基雌二醇(EE

4、2)，己烯雌酚(DES))，污水處理廠按處理流程各級水樣中5種雌激素含量基本不發(fā)生變化，雌酮含量較高(約10ng/L)。醫(yī)院出水(婦幼保健院，省中醫(yī))中各種雌激素含量也很高(尤其是雌二醇，雌酮，己烯雌酚)，遠高于其他河流及污水處理廠水樣。污水處理廠排污口上游和下游中雌激素殘留也較高(雌酮含量約10ng/L)。
　　在檢測了所采水樣中雌激素含量之后，初步明確環(huán)境水樣中雌激素污染程度，在此基礎上進而研究其生物學效應，從而探討環(huán)境雌激素

5、對實驗動物乃至對人類可能造成的危害。雌酮作為標準對照，首先研究成年雄性斑馬魚在雌酮中的內分泌干擾效應，采用real-time PCR的方法研究雌酮對斑馬魚肝臟中vtg及esr基因表達變化情況的影響。然后將成年雄性斑馬魚分別在污水處理廠進水，2級出水，1A級出水水樣中暴露15天進行real-time PCR研究污水對斑馬魚肝臟中vtg及esr基因表達變化情況的影響。污水處理廠所取水樣均能使雄魚vtg表達水平升高，而且都是5天時達到最高，然