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文檔簡介
1、1豬輪狀病毒抗體豬輪狀病毒抗體(RVAb)酶聯(lián)免疫分析(酶聯(lián)免疫分析(ELISAELISA)試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于檢測豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中輪狀病毒抗體(RVAb)水平。實驗原理:實驗原理:本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中豬輪狀病毒抗體(RVAb)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中抗體相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原
2、結(jié)合,形成抗原抗體酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬輪狀病毒抗體(RVAb)的存在與否。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板14819628℃保存陰性對照0.5ml1瓶0.5ml1瓶
3、28℃保存陽性對照0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,
4、保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)
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