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1、防御素防御素β125(DEFβ125)ELISAβ125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液防御素防御素β125(DEFβ125)ELISAβ125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因
2、子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。防御素防御素β125(DEFβ125)ELISAβ125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書自備材料1蒸餾水。2加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1避免直接
3、接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。防御素防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書操作注意事項(xiàng)1試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4使用一次性的吸頭以免交叉污
4、染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。5每孔加入80ul的親和鏈酶素HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37
5、℃溫育10分鐘。避免光照。8取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到精確的結(jié)果。防御素防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書性能性能1.靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間
6、變異系數(shù)均小于10%。防御素防御素β125(DEFβ125)ELISAβ125(DEFβ125)ELISA試劑盒說(shuō)明書試劑盒說(shuō)明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0800pgml4、敏感度:1.0pgmlAR人雄激素受體規(guī)格:48T96T
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