厭氧氨氧化顆粒污泥的未培養(yǎng)和可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性的初步研究及新種的鑒定.pdf

1、隨著工業(yè)化進(jìn)程的推進(jìn)，環(huán)境污染成為越來(lái)越嚴(yán)重的問(wèn)題，我們必須采取一邊污染一邊治理的策略。在污水和固體垃圾廢棄物填埋的滲濾液中，氮源是一個(gè)非常重要的污染源，而氨氮又是氮源里面最主要的污染物。在氨氮的眾多生物處理工藝中，厭氧氨氧化處理工藝是最有前景的一種工藝，以不需要額外提供有機(jī)物，不需要?jiǎng)恿ο暮彤a(chǎn)生的污泥量少等優(yōu)點(diǎn)而吸引了眾多科學(xué)家加入研究。
　　我們選取了一個(gè)UASB反應(yīng)器中厭氧氨氧化顆粒污泥，采用不依賴培養(yǎng)的分子生物學(xué)和分離培

2、養(yǎng)兩種方法對(duì)其中的細(xì)菌多樣性進(jìn)行初步研究?；?6S rRNA基因序列的不依賴培養(yǎng)的分子生物學(xué)方法研究結(jié)果表明，顆粒污泥中存在著較為豐富的微生物多樣性，檢測(cè)了29個(gè)克隆，一共有22個(gè)OTU(3％cutoff)，分屬于8個(gè)門(mén)中，約占RDP中有分類名稱的27個(gè)細(xì)菌門(mén)的1/3?；趆zo基因序列的研究發(fā)現(xiàn)其中厭氧氨氧化細(xì)菌主要為2個(gè)類群：Candidatus Kuenenia和Candidatus Jettenia。顆粒污泥中存在大量與氮循環(huán)

3、相關(guān)的細(xì)菌，包括固氮菌、氨氧化細(xì)菌，硝化細(xì)菌，厭氧氨氧化細(xì)菌和反硝化細(xì)菌。他們形成了一個(gè)完整的氮循環(huán)過(guò)程。
　　通過(guò)分離培養(yǎng)方法，得到34株表型上有差異的細(xì)菌，根據(jù)16S rRNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析，這些菌株分別歸屬于6個(gè)屬，3個(gè)門(mén)中。大部分細(xì)菌都屬于反硝化細(xì)菌。其中芽孢桿菌在不依賴培養(yǎng)的細(xì)菌多樣性研究中未發(fā)現(xiàn)，對(duì)不依賴培養(yǎng)的細(xì)菌多樣性研究是一個(gè)有力的補(bǔ)充。
　　在分離純化培養(yǎng)的細(xì)菌中，發(fā)現(xiàn)有2株細(xì)菌HY-14T和HY-

4、24與已知所有細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的16S rRNA基因序列相似度都在97％以下，對(duì)其進(jìn)行了詳細(xì)的鑒定?；趎eighbour-joining和maximum-parsimony兩種方法構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)均顯示HY-14T和HY-24兩菌株在系統(tǒng)發(fā)育上被歸類到假單胞菌屬這一大簇中，與假單胞菌屬的7個(gè)類群均不能聚類成簇而獨(dú)立成簇。因?yàn)檫@2個(gè)菌株在基因型方面與已知假單胞菌屬的細(xì)菌有較大的差異，造成了其生理生化特征、G+C含量和脂肪酸譜與已知的假單胞菌