腎臟病檢測(cè)項(xiàng)目知識(shí)講解

1、營(yíng)銷篇,腎病類檢測(cè)項(xiàng)目知識(shí)講解寶雞東林體外診斷試劑有限公司李林 主管檢驗(yàn)師,目錄,腎臟結(jié)構(gòu)及腎臟疾病檢測(cè)方法簡(jiǎn)介尿微量白蛋白知識(shí)介紹尿微量白蛋白簡(jiǎn)介尿微量白蛋白主要臨床意義及應(yīng)用尿微量白蛋白檢測(cè)步驟及要點(diǎn)胱抑素C知識(shí)介紹胱抑素C簡(jiǎn)介胱抑素C主要臨床意義及應(yīng)用胱抑素C檢測(cè)步驟及要點(diǎn),首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),？,腎臟結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)介,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎病的實(shí)驗(yàn)室檢查方法,尿液檢查：常

2、規(guī)檢查、特殊生化檢查（蛋白、酶學(xué)）、細(xì)菌學(xué)檢查。腎功能檢查：腎小球?yàn)V過(guò)功能；腎小管功能檢查；腎血流量測(cè)定。腎臟內(nèi)分泌功能檢查。腎臟活體組織病理檢查。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),1982年Viberti首次提出（Microalbuminuria），英文簡(jiǎn)稱mALB,又稱MA或MAU，中文名為微量白蛋白尿或尿微量白蛋白。微量白蛋白尿是指尿中含有少量但屬于不正當(dāng)情況下分泌出的白蛋白。白蛋白(Alb)占血漿總蛋白量的60%

3、，分子量為69KD，是一種帶負(fù)電荷的非糖化大分子蛋白。正常情況下可有少量Alb被濾過(guò)，但95%的Alb又在近曲小管被重吸收,故尿中Alb含量很低。范圍：20-200mg/L（健康成人的 mAlb<20㎎/L，所用標(biāo)本為患者新鮮的尿液）。在尿常規(guī)試紙條的尿蛋白定性通常為陰性或弱陽(yáng)性。,尿微量白蛋白的命名,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白的命名,,,,,,正常白蛋白含量,微量白蛋白,大量白蛋白,20mg/L,200

4、mg/L,,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白的濃度范圍,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),mALB成因可能是腎小球性的（如：糖尿病性微血管病；高血壓腎小球損害）、腎小管性的（如重吸收障礙）或者腎后性的。白蛋白和微量蛋白同時(shí)升高則見(jiàn)于腎小球-腎小管性蛋白尿，病因可能是腎小球疾?。I病綜合癥）時(shí)腎小管重吸收負(fù)擔(dān)過(guò)重，腎小球腎小管間質(zhì)性腎病，或者糖尿病腎病所致的腎功能衰竭。,尿微量白蛋白成因,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳

5、市軟件企業(yè),,被公認(rèn)為早期腎損傷的金指標(biāo)！尿微量白蛋白的含量不僅反應(yīng)腎小球?yàn)V過(guò)功能的早期損傷程度，而且也反映腎小管重吸收功能的早期損傷。對(duì)糖尿病腎病的早期診斷和改善預(yù)后具有劃時(shí)代的意義！對(duì)抗高血壓的療效監(jiān)控和防止腎損傷是一項(xiàng)有效方法！在腎毒性藥物的的應(yīng)用、心血管事件的早期診斷及預(yù)測(cè)具有重要價(jià)值！,尿微量白蛋白臨床意義,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),,慢性腎臟病目前已成為繼心腦血管病、腫瘤、糖尿病之后又一威脅人類健康的重要

6、疾??！世界上超過(guò)5億人口患有不同的腎臟疾病。慢性腎臟病在成人中的發(fā)生率大約為10%，早期知曉率不到10%！每年超過(guò)百萬(wàn)人口死于與慢性腎臟病相關(guān)聯(lián)的心腦血管疾?。〕^(guò)150萬(wàn)人依賴腎臟替代治療而生存！臨床治療表明：慢性腎臟病可防、可治，關(guān)鍵是早發(fā)現(xiàn)、早治療（效果好且醫(yī)療費(fèi)用少）！,尿微量白蛋白臨床意義,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白臨床發(fā)生率,糖尿?。杭s為18-32%原發(fā)性高血壓輕微：12-15%中度：1

7、5-30%重度：50%普通人群：約為4-7%,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),？用于高危人群的篩查,糖尿病患者1型糖尿病，5年或12歲后每年測(cè)1-3次。2型糖尿病，診斷明確以后每年測(cè)1-3次。首次陽(yáng)性則應(yīng)在3-6個(gè)月內(nèi)再測(cè)2次以上，如其中2次陽(yáng)性則為早期糖尿病腎病，應(yīng)進(jìn)行干預(yù)治療。在12-20ug/min者，每隔3個(gè)月重測(cè)一次。<12ug/min者，每年重測(cè)一次。高血壓患者急性腎炎史患者長(zhǎng)期用藥患者,首批

8、國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),mAlb特別適用于糖尿病患者的早期腎損害的監(jiān)測(cè)和療效判斷。mAlb癥的出現(xiàn)是糖尿病腎病和終未腎病的早期預(yù)測(cè)指標(biāo)。絕大部分醫(yī)院已經(jīng)把mAlb和 HbA1c作為糖尿病人定期監(jiān)測(cè)的指標(biāo)，其目的就在于觀察糖尿病病人血糖水平控制的好壞程度和由于長(zhǎng)期服藥而對(duì)腎臟的損傷程度，從而提早采取有效的措施降低糖尿病合并腎病的機(jī)會(huì)。,糖尿病腎病的早期監(jiān)測(cè)和療效判斷,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),糖尿病腎病的早期診斷

9、和療效判斷,微量白蛋白尿是糖尿病腎病并發(fā)癥的早期指標(biāo)。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),病例組1—定期服藥 病例組2—非定期服藥,高血壓腎病的早期診斷,尿微量白蛋白陽(yáng)性者血壓的增高程度與靶器官損傷密切相關(guān)。尿微量白蛋白陽(yáng)性者必須強(qiáng)化高血壓治療，其血壓最好控制在130/80mmHg。原發(fā)性高血壓患者尿微量白蛋白明顯增高，主要與收縮壓相關(guān)，是中風(fēng)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎毒性藥

10、物的的應(yīng)用指導(dǎo),mAlb也是在慢性病的長(zhǎng)期用藥的患者中醫(yī)生要考慮到的一項(xiàng)指標(biāo)，盡量?jī)?yōu)選一些副作用小和對(duì)腎臟損害程度輕的藥物。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),全身內(nèi)皮細(xì)胞損害的標(biāo)志,？,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),心血管事件的早期診斷及預(yù)測(cè),我國(guó)高血壓患者mALB的檢出率為18.6%。（引自孫寧玲，王鴻懿，朱鼎良等.白蛋白尿與高血壓水平的關(guān)系[J].中華腎臟病雜志，2010，26（10）：762-765）,首批國(guó)家高新技

11、術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項(xiàng)目測(cè)前準(zhǔn)備開(kāi)機(jī)10分鐘左右，使之處于工作最佳狀態(tài)。從冰箱取出抗血清試劑，放置適宜溫度（15-35攝氏度，10分鐘左右），使之處于備用最佳狀態(tài)。取出移液器（0.5-10uL）并將其調(diào)至2uL取液容量位置。取出移液器（20-200uL）并將其調(diào)至60uL取液容量位置。準(zhǔn)備好標(biāo)本（類型：全血、血清、血漿；用量：2uL或20uL兩種模式）。取出預(yù)裝試劑（600uL）的比色杯。樣品加

12、入用移液器（0.5-20uL）套上相應(yīng)型號(hào)吸嘴，吸取樣本（按移液器頂端至卡塞感時(shí)即可）加入（斜拿測(cè)量杯且吸嘴放入液面按移液器頂端至卡塞感時(shí)即可時(shí)反復(fù)2次，第3次壓至極限）到預(yù)分裝好的比色杯內(nèi)。注意勿用手捏比色杯中下端透光面（共兩面）。之后將比色杯放在測(cè)量通道。,尿微量白蛋白檢測(cè)步驟及要點(diǎn),首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項(xiàng)目抗體加入用移液器（20-200uL）套上相應(yīng)型號(hào)吸嘴，取抗血清（壓移液器頂端至

13、卡塞感時(shí)即可）加入（吸嘴斜放近液面杯壁壓移液器頂端壓至極限）到已放置在測(cè)量通道的比色杯內(nèi)。噴射抗血清時(shí)動(dòng)作稍快。按測(cè)量通道側(cè)測(cè)量開(kāi)關(guān)。自動(dòng)測(cè)量?jī)x器測(cè)量通道自動(dòng)加熱并振動(dòng)。（時(shí)長(zhǎng)90s）儀器自動(dòng)進(jìn)行測(cè)量。獲取結(jié)果測(cè)量完成時(shí)儀器屏幕和聲音提示撕下打印出的測(cè)量結(jié)果。（檢測(cè)范圍：10-200mg/L）將比色杯棄入垃圾箱。注意事項(xiàng)更換不同批次試劑時(shí)，或變換不同檢測(cè)項(xiàng)目時(shí)，需刷定標(biāo)磁卡后方能檢測(cè)（刷定標(biāo)磁卡時(shí)須按出批號(hào)界面且測(cè)量

14、槽為空）。將測(cè)量通道用比色杯（用過(guò)或待用均可）覆蓋，防止測(cè)量通道覆蓋灰塵,尿微量白蛋白檢測(cè)步驟及要點(diǎn),首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項(xiàng)目質(zhì)控測(cè)試與標(biāo)本測(cè)試同，差異處在于用質(zhì)控液代替樣本。僅在裝機(jī)后、懷疑或擔(dān)心測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)時(shí)進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試。質(zhì)控測(cè)試結(jié)果應(yīng)在100±20,尿微量白蛋白檢測(cè)步驟及要點(diǎn),首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),目錄,胱抑素知識(shí)介紹是什么？有何用？有何優(yōu)勢(shì)？如何

15、操作？,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的發(fā)現(xiàn)和命名,1983年Anastasi等首次在雞蛋清中分離純化得到高純度的半胱氨酸蛋白酶抑制劑（cysteine proteinase inhibitor，CPI），后被命名為胱抑素C(Cystatin C，簡(jiǎn)稱Cys C)。又名γ-微量蛋白（γ2痕跡堿性蛋白）及γ-后球蛋白（后γ球蛋白）。是半胱氨酸蛋白酶抑制劑蛋白質(zhì)中的一種。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的

16、結(jié)構(gòu),是一種低分子量（為13.3KD）、堿性非糖化蛋白質(zhì)，由122個(gè)氨基酸殘基組成。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的特性,廣泛存在于各種組織的有核細(xì)胞和體液中，可由機(jī)體所有有核細(xì)胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定。編碼Cys C的基因?qū)儆诠芗一?，能在所有的有核?xì)胞內(nèi)以恒定速度持續(xù)轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，無(wú)組織特異性，故Cys C可在體內(nèi)以恒定速度產(chǎn)生，并存在于各種體液之中，尤以腦脊液和精漿中含量為高，尿液中最低，不受年齡、性別、體重、炎癥等因

17、素影響，研究表明Cys C自1歲后到60歲前在血液中濃度恒定。有研究結(jié)果顯示，健康成人血清胱抑素C隨著年齡的增長(zhǎng)其平均水平呈上升趨勢(shì)，,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的特性,生理?xiàng)l件下帶正電荷，能自由從腎小球?yàn)V過(guò)，完全被腎小管上皮細(xì)胞重吸收并于細(xì)胞內(nèi)降解，不重新回到血液中，同時(shí)腎小管上皮細(xì)胞也不分泌Cys C至管腔內(nèi)。因此，其血清濃度主要由GFR（腎小球?yàn)V過(guò)率）決定，而不依賴任何外來(lái)因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一

18、種反映腎小球?yàn)V過(guò)率變化的理想內(nèi)源性標(biāo)志物。正常情況下，Cys C在血清和血漿中的濃度為0.51-1.09mg/L (參考范圍)，血漿胱抑素C參考值0.6-1.03。當(dāng)腎功能受損時(shí)，Cys C在血液中的濃度隨腎小球?yàn)V過(guò)率變化而變化。腎衰時(shí), 腎小球?yàn)V過(guò)率下降，Cys C在血液中濃度可增加10多倍;若腎小球?yàn)V過(guò)率正常，而腎小管功能失常時(shí)，會(huì)阻礙Cys C在腎小管吸收并迅速分解，使尿中的濃度增加100多倍。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳

19、市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床意義,Cys C是迄今基本滿足理想內(nèi)源性GFR標(biāo)志物要求的內(nèi)源性物質(zhì)。是新近發(fā)展起來(lái)的評(píng)估腎功能的一種敏感性好、特異性高的指標(biāo)。可以代替：復(fù)雜的全血檢測(cè)；24小時(shí)小便收集；體表面積和肌酐清除率的計(jì)算；患者受放射物質(zhì)的照射。Cys C與其他腎功能檢測(cè)項(xiàng)目組合（Scr（肌酐），Urea（尿素），UA（尿酸）），可顯著提高檢測(cè)的靈敏度和特異性。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎臟功能檢測(cè)指標(biāo)對(duì)比分析

20、,腎臟功能包括腎小球的濾過(guò)功能、腎小管的重吸收及分泌功能。血中肌酐和尿素氮通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)進(jìn)入尿液排出體外，因此傳統(tǒng)習(xí)慣一般把血清尿素氮、肌酐作為常規(guī)腎功能的檢測(cè)項(xiàng)目，但都不是評(píng)價(jià)腎功能的理想指標(biāo)。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎臟功能檢測(cè)指標(biāo)對(duì)比分析,Cys C比血清尿素氮（BUN）、肌酐（CREA-M）有更高的敏感性和特異性，對(duì)于評(píng)價(jià)腎小球?yàn)V過(guò)率有非常重要的價(jià)值。因腎臟有強(qiáng)大的儲(chǔ)備能力和代償能力，在腎小球受損早期或輕度受

21、損時(shí)，血中尿素氮、肌酐仍可維持在正常水平，只有在嚴(yán)重腎小球損害，一般腎小球?yàn)V過(guò)率降低50%以下時(shí)，血尿素氮、肌酐濃度才明顯升高。血清尿素氮首先被作為腎功能的評(píng)價(jià)指標(biāo)，但它不符合內(nèi)源性腎小球?yàn)V過(guò)率（glomerular filtration rate，GFR）標(biāo)志物的要求，當(dāng)GFR減少到正常值的40%以前，尿素氮濃度升高緩慢，并且與外源性（蛋白質(zhì)攝入量）與內(nèi)源性（感染、腎上腺皮質(zhì)激素的應(yīng)用、胃腸出血等）尿素負(fù)荷的大小有關(guān)，更重要的是腎小

22、管對(duì)尿素氮有明顯的被動(dòng)重吸收性。肌酐基本符合內(nèi)源性GFR標(biāo)志物的要求，國(guó)內(nèi)外仍用血清肌酐作為臨床常規(guī)評(píng)估腎小球?yàn)V過(guò)功能受損的指標(biāo)．但只有當(dāng)GFR下降1/3-1/2時(shí)．血清肌酐才有明顯變化，而且受性別、飲食、肌肉量等因素的影響。血漿胱抑素C的含量較穩(wěn)定，不易受其它因素的影響，它的濃度不但不受年齡、性別、肌肉量等因素的影響，而且也不受大多數(shù)藥物以及炎癥的影響。胱抑素c的診斷準(zhǔn)確性明顯優(yōu)于血清肌酐。有研究結(jié)果顯示，健康成人血清胱抑素C隨

23、著年齡的增長(zhǎng)其平均水平呈上升趨勢(shì)，從而推斷胱抑素C在評(píng)估老年人腎功能時(shí)較肌酐更有意義。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應(yīng)用,高血壓病的早期腎損害的發(fā)現(xiàn)、干預(yù)高血壓發(fā)病逐年增加，所致腎損害是常見(jiàn)并發(fā)癥之一，早期干預(yù)，對(duì)改善高血壓患者預(yù)后有重要意義。高血壓病通過(guò)引起良性小動(dòng)脈腎硬化而導(dǎo)致高血壓慢性腎損害，在良性小動(dòng)脈腎硬化出現(xiàn)臨床癥狀以前，常規(guī)血液及尿液檢查都正常的情況下，通過(guò)應(yīng)用比較靈敏的檢查手段仍能發(fā)現(xiàn)一些異常

24、，這些可視為高血壓病的早期腎損害。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應(yīng)用,糖尿病腎病的早期發(fā)現(xiàn)、盡早干預(yù)糖尿病腎損害是糖尿病嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥，也是糖尿病患者的主要死因之一，有超過(guò)30%的患者發(fā)展為腎功能衰竭及需要腎透析。與其他指標(biāo)相比，CysC檢出糖尿病腎病的靈敏度為40%，特異性為100%，因此有必要在診斷糖尿病而無(wú)證據(jù)有腎病患者中定期檢測(cè)CysC濃度變化以觀察其與糖尿病微血管病變的關(guān)系。,首批國(guó)家高新技

25、術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應(yīng)用,腎移植手術(shù)后腎功能損傷程度/恢復(fù)情況的較早檢出、干預(yù)胱抑素C不但能快速的反映腎臟受損的情況，而且可以及時(shí)的反映腎功能的恢復(fù)情況，特別是移植腎功延遲的患者。急慢性排斥反應(yīng)或免疫抑制劑治療的副作用是腎移植手術(shù)后的最大危害，較早檢出腎功能的損傷程度，有利于及時(shí)采取干預(yù)措施，當(dāng)移植腎發(fā)生急性腎排斥時(shí)，血清CysC的增高比血清肌酐更明顯也更早。在對(duì)腎移植后三個(gè)月的患者研究發(fā)現(xiàn)，胱抑素C與GFR的相

26、關(guān)性比肌酐和肌酐清除率都大，比肌酐和肌酐清除率都敏感，可以快速診斷出急性排斥反應(yīng)或藥物治療可能造成的腎損害。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應(yīng)用,心血管疾病中應(yīng)用大量研究認(rèn)為，在老年患者尤其心血管疾病患者Cys C水平明顯升高，往往提示預(yù)后不良，是可靠的死亡預(yù)測(cè)風(fēng)險(xiǎn)因子。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應(yīng)用,肝硬化患者中應(yīng)用？與妊娠的相關(guān)性研究結(jié)果顯示Cys C與血清尿酸鹽和肌酐相比，

27、對(duì)先兆子癇有較好的診斷準(zhǔn)確性。,首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的檢測(cè)方法,胱抑素C測(cè)定方法學(xué)進(jìn)展單向免疫擴(kuò)散(SRID)放射免疫測(cè)定法(RIA)熒光免疫測(cè)定法(FIA)時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法(TRFIA)酶聯(lián)免疫測(cè)定法(ELISA)溶膠顆粒免疫分析（SPIA）顆粒增強(qiáng)透射免疫比濁法(PETIA)顆粒增強(qiáng)散射免疫比濁法(PENIA ),首批國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的檢測(cè)方法,較多采用的顆粒

28、增強(qiáng)免疫比濁法，技術(shù)已趨于成熟，操作簡(jiǎn)便，干擾因素少。顆粒增強(qiáng)透射免疫比濁法(PETIA)、顆粒增強(qiáng)散射免疫比濁法(PENIA )都能夠在自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定胱抑素C，而且快速穩(wěn)定。1994年Kyhse Andersen J等報(bào)道的顆粒增強(qiáng)透射免疫比濁法（particle enhanced turbidmetric immunoassay）。1997年Finney H等報(bào)道的顆粒增強(qiáng)散射免疫比濁法（particle enhanced