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1、1第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第一節(jié)蛋白質(zhì)的分子組成一、蛋白質(zhì)的主要組成元素:C、H、O、N、S特征元素:N(16%)特異元素:S凱氏定氮法:每克樣品含氮克數(shù)6.25100=100g樣品中蛋白質(zhì)含氮量(g%)組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸(名解)不對(duì)稱碳原子或手性碳原子:與四個(gè)不同的原子或原子基團(tuán)共價(jià)連接并因而失去對(duì)稱性的四面體碳為L(zhǎng)α氨基酸,其中脯氨酸(Pro)屬于Lα亞氨基酸不同Lα氨基酸,其R基側(cè)鏈不同除甘氨酸(Gly)外,都為L(zhǎng)α氨基酸,
2、有立體異構(gòu)體組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸分類非極性氨基酸:甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ile)、脯氨酸(Pro)極性中性氨基酸:絲氨酸(Ser)、半胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、蘇氨酸(Thr)芳香族氨基酸:苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)酸性氨基酸:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)堿性氨基酸:賴氨酸(Lys)、精氨酸
3、(Arg)、組氨酸(His)其中:含硫氨基酸包括:半胱氨酸、蛋氨酸四、氨基酸的理化性質(zhì)1、兩性解離及等電點(diǎn)①氨基酸分子中有游離的氨基和游離的羧基,能與酸或堿類物質(zhì)結(jié)合成鹽,故它是一種兩性電解質(zhì)。②氨基酸是兩性電解質(zhì),其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。③(名解)等電點(diǎn)(pI點(diǎn)):在某一pH的溶液中,氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等,成為兼性離子,呈電中性,此時(shí)溶液的pH稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。pHpI陰離子氨基酸帶凈正電荷,在電場(chǎng)
4、中將向負(fù)極移動(dòng)④在一定pH范圍內(nèi),氨基酸溶液的pH離等電點(diǎn)越遠(yuǎn),氨基酸所攜帶的凈電荷越大2、含共軛雙鍵的氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm附近大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基,所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡(jiǎn)便的方法3、氨基酸與茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色化合物在pH5~7,80~100℃條件下,氨基酸與茚三酮水合物共熱,可生成藍(lán)紫色化合物,其最大吸收峰在570nm處。此吸收峰值與氨
5、基酸的含量存在正比關(guān)系,因此可作為氨基酸定量分析方法五、蛋白質(zhì)是由許多氨基酸殘基組成的多肽鏈(一)氨基酸通過(guò)肽鍵連接而形成肽1、(名解)肽鍵(peptidebond)是由一個(gè)氨基酸的α羧基與另一個(gè)氨基酸的α氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵2、肽是由氨基酸通過(guò)肽鍵縮合而形成的化合物3、10個(gè)以內(nèi)氨基酸連接而成多肽稱為寡肽;由更多的氨基酸相連形成的肽稱多肽肽鏈中的氨基酸分子因?yàn)槊撍s合而基團(tuán)不全,被稱為氨基酸殘基3(四)、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu):蛋白質(zhì)
6、分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用,稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。由一條肽鏈形成的蛋白質(zhì)沒(méi)有四級(jí)結(jié)構(gòu)。1、(名解)亞基:有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈,每一條多肽鏈都有完整的三級(jí)結(jié)構(gòu),稱為蛋白質(zhì)的亞基,亞基之間的結(jié)合力主要是氫鍵和離子鍵2、主要化學(xué)鍵:疏水鍵、氫鍵、離子鍵二、蛋白質(zhì)的分類根據(jù)組成成分:?jiǎn)渭兊鞍踪|(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)=蛋白質(zhì)部分非蛋白質(zhì)部分(輔基)根據(jù)形狀:纖維狀蛋白質(zhì)球狀蛋白質(zhì)第三節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系一、蛋白質(zhì)一級(jí)
7、結(jié)構(gòu)是高級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)1、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象和特定生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。一級(jí)結(jié)構(gòu)相似的多肽或蛋白質(zhì),其空間構(gòu)象以及功能也相似。尿素或鹽酸胍可破壞次級(jí)鍵β巰基乙醇可破壞二硫鍵2、由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導(dǎo)致的疾病,稱為“分子病”,如:鐮刀形紅細(xì)胞貧血癥二、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)特有性質(zhì)和功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。肌紅蛋白:只有三級(jí)結(jié)構(gòu)的單鏈蛋白質(zhì),易與氧氣結(jié)合,氧解離曲線呈直角雙曲線。血紅蛋白:具有4個(gè)亞基組成的四級(jí)結(jié)構(gòu),可結(jié)合4分子氧。成人由
8、兩條α肽鏈(141個(gè)氨基酸殘基)和兩條β肽鏈(146個(gè)氨基酸殘基)組成。在氧分壓較低時(shí),與氧氣結(jié)合較難,氧解離曲線呈S狀曲線。因?yàn)椋旱谝粋€(gè)亞基與氧氣結(jié)合以后,促進(jìn)第二及第三個(gè)亞基與氧氣的結(jié)合,當(dāng)前三個(gè)亞基與氧氣結(jié)合后,又大大促進(jìn)第四個(gè)亞基與氧氣結(jié)合,稱正協(xié)同效應(yīng)。結(jié)合氧后由緊張態(tài)變?yōu)樗沙趹B(tài)。三、若蛋白質(zhì)的折疊發(fā)生錯(cuò)誤,盡管其一級(jí)結(jié)構(gòu)不變,但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變,仍可影響其功能,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致疾病發(fā)生,稱為蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病,如:人紋狀體脊髓變
9、性病(CJD)、老年癡呆癥、亨廷頓舞蹈病、瘋牛病等。第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)1、蛋白質(zhì)的兩性電離:蛋白質(zhì)兩端的氨基和羧基及側(cè)鏈中的某些基團(tuán),在一定的溶液pH條件下可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。2、蛋白質(zhì)的沉淀:在適當(dāng)條件下,蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。包括:a.丙酮沉淀,破壞水化層。也可用乙醇。b.鹽析,將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液,破壞在水溶液中的穩(wěn)定因素電荷而沉淀。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀,有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀,但并不變性3、蛋
10、白質(zhì)變性:在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間構(gòu)象被破壞,從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失。主要為二硫鍵和非共價(jià)鍵的破壞,不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變。變性后,其溶解度降低,粘度增加,結(jié)晶能力消失,生物活性喪失,易被蛋白酶水解。常見的導(dǎo)致變性的因素有:加熱、乙醇等有機(jī)溶劑、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子及生物堿試劑、超聲波、紫外線、震蕩等。4、蛋白質(zhì)的紫外吸收:由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,因此在280nm處有特征性吸收峰,
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