組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

1、組織培養(yǎng)技術(shù)簡述是在無菌的條件下將活器官、組織或細(xì)胞置于培養(yǎng)基內(nèi)，并放在適宜的環(huán)境中，進行連續(xù)培養(yǎng)而成的細(xì)胞、組織或個體。這種技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和生物、醫(yī)藥的研究。美國在20世紀(jì)中期應(yīng)用組培技術(shù)而獲得的芹菜苗已成苗地取代了種子繁殖的傳統(tǒng)方法。我國目前在番茄、辣椒、馬鈴薯、生菜、人參和果品生產(chǎn)中也已廣泛投產(chǎn)應(yīng)用。原理植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞全能性。也就是說每個植物細(xì)胞里都含有一整套遺傳物質(zhì)，只不過在特定條件下不會表達(dá)。組織培養(yǎng)基于此原理

2、就可以將已處于分化終端或正在分化的植物組織脫分化，誘導(dǎo)形成愈傷組織，再在愈傷組織上形成新的叢生芽。編輯本段植物組織培養(yǎng)條件1.愈傷組織的培養(yǎng)條件：必須無菌操作2.材料也是：具有剛生長不久，具有高度分裂能力的莖尖，芽尖，感染病毒的機會很小3.植物細(xì)胞全能性，確保組織能培養(yǎng)成植株。4.在無菌操作室中完成接種工作，然后放于培養(yǎng)室[光照（日光燈照射），溫度（30度）]中培養(yǎng)。所以說完成操作后，在培養(yǎng)室中培養(yǎng)時就需要光照條件了。編輯本段組織培養(yǎng)的

3、意義（一）增加遺傳變異性，改良作物組織培養(yǎng)中從一個單細(xì)胞，一塊愈傷組織，一個芽（或其它器官）都可以獲得無性系。無性系就是用植物體細(xì)胞繁殖所獲得的后代。用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖的無性系可概括為五個類型：原球莖：細(xì)胞或組織培養(yǎng)經(jīng)原球莖途徑分化成植株。大部分蘭花屬于這一類型，即蘭花的各個部分的離體組織都能誘導(dǎo)形成原球莖，再經(jīng)培養(yǎng)分化形成植株。器官發(fā)生型：即從細(xì)胞或愈傷組織培養(yǎng)通過不定芽形成植株，如煙草愈傷組織培養(yǎng)分化所得的植株。胚狀體發(fā)生型：從

4、細(xì)胞或愈傷組織通過胚狀體途徑，即由球形期、魚雷期、心形期、子葉期經(jīng)成熟胚發(fā)育成植株，如胡蘿卜體細(xì)胞培養(yǎng)可通過胚狀體途徑形成植株。器官型：從離休珠莖、花芽、葉、鱗片等，亦即從離體的母體組織直接產(chǎn)生小植株，如貝母、百合等。無菌短枝扦插；選取已發(fā)育成熟的腋芽，連同短枝經(jīng)表面滅菌后在無菌條件下培養(yǎng)，使其生根。腋芽可用生長激素處理促使其萌發(fā)。這一方法在較短時間內(nèi)即可獲得一個植株。對保存珍貴的優(yōu)良樹種或花卉品種是簡易而有效的方法。通過組織培養(yǎng)可以做

5、到快速繁殖。1年中從一個芽得到103106個芽，達(dá)到快速目的?，F(xiàn)在在國內(nèi)外已掀起“試管苗“熱，許多花卉、林木、果樹、蔬菜都可通過組織培養(yǎng)進行大規(guī)模的無性繁殖。國外在草莓、蘋果、柑桔、蘭花、石竹、鐵線蓮、杜鵑、月季、桉樹等進行快速繁殖已達(dá)到商品化。我國近年來已獲成功的有甘蔗、月季、菊花、無籽西瓜、櫟樹、山楂、獼猴桃、雪松等。通過組織培養(yǎng)可以進行無病毒植株的培育。病毒是植物的嚴(yán)重病害，病毒病的種類不下五百多種。受害的糧食作物有水稻、小麥、馬

6、鈴薯、甘薯，蔬菜作物有：油菜、大蒜，果樹有：柑桔、蘋果、棗，花卉有：唐菖蒲、石竹、蘭花等。防治無方，只好拔除病株，因而造成很大經(jīng)濟損失。病毒在植株上的分布是不均一的，老葉、老的組織和器官病毒含量高，幼嫩的未成熟組織和器官病毒含量較低，生長點幾乎不含病毒或病毒較少。1952年法國Mel用生長點培養(yǎng)法獲得無病毒植株成功，以后許多國家開展了這方面的工作。目前已在馬鈴薯、甘薯、大蒜、石竹、百合、蘭花、草霉等植物上得到成功。如果采用0.1毫米以下

7、的生長點，則培養(yǎng)時間長（11.5年），成活率低，故目前已多用0.10.5毫米大小生長點，結(jié)合熱處理培育無病毒苗。在我國已獲得馬鈴薯無病毒苗，并進行了推廣種植，在廣東省進行了柑桔無病毒苗的培育。（三）有用化合物的工業(yè)化生產(chǎn)組織培養(yǎng)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，目前世界各國都在重視另一個方面，即有用化合物的工業(yè)化生產(chǎn)。有用化合物包括藥物、橡膠、香精油、色素……等。這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物，有些化合物還不能大規(guī)模地人工合成，而靠植物產(chǎn)生