基因工程填空背誦

1、1基因工程填空背誦基因工程填空背誦1基因工程的概念：基因工程是在DNADNA分子分子水平上進(jìn)行操作因此又叫做重組重組DNADNA技術(shù)技術(shù)。2基因工程的基本工具：限制酶、限制酶、DNADNA連接酶、運(yùn)載體連接酶、運(yùn)載體3限制酶來源：主要是從原核生物原核生物中分離純化出來的。4限制酶的功能：識(shí)別特定的核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵。識(shí)別特定的核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵。5限制酶切割的結(jié)果：黏性末端黏性末端和平末端平末端。

2、6DNA連接酶功能：恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。7DNA聚合酶的作用部位是磷酸二酯鍵。磷酸二酯鍵。8運(yùn)載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制復(fù)制并穩(wěn)定穩(wěn)定保存；②具有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。9基因工程常用的載體有：質(zhì)粒質(zhì)粒、噬菌體噬菌體和動(dòng)、植物病毒動(dòng)、植物病毒等。10最早應(yīng)用的載體是質(zhì)粒質(zhì)粒，它是細(xì)菌細(xì)胞中的一種很小的雙鏈

3、環(huán)狀環(huán)狀DNA分子。11基因的基本操作程序：目的基因的獲取目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。目的基因的檢測(cè)與鑒定。12基因工程的核心是：基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建。13獲取目的基因的方法是①?gòu)淖匀唤缰幸延械奈锓N中分離出來從自然界中已有的物種中分離出來，如可從基因文庫中獲取。②人工合成法：逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法人工合成法：逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。③

4、PCR擴(kuò)增擴(kuò)增14取原核細(xì)胞的目的基因方法一般是：直接分離法直接分離法。15獲取真核細(xì)胞的目的基因一般是人工合成法人工合成法。16PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。17PCR原理是：DNA雙連復(fù)制雙連復(fù)制的原理。前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列已知目的基因的核苷酸序列。18PCR條件：模板、模板、ATP、酶、原料、酶、原料（四種游離的脫氧核苷酸）19PCR酶：熱穩(wěn)定熱穩(wěn)

5、定DNADNA聚合酶聚合酶（耐高溫DNA聚合酶）20即基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因21標(biāo)記基因的作用：鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。22基因表達(dá)載體構(gòu)建方法：同種限制酶同種限制酶分別切割載體和目的基因，再用DNADNA連接酶連接酶把兩者連接形成重組質(zhì)粒。23將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：最常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

6、，其次還有基因槍法基因槍法和花粉管通花粉管通道法。24農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法原理：①農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物雙子葉植物和裸子植物裸子植物.②農(nóng)桿菌中的TiTi質(zhì)粒質(zhì)粒上的TDNATDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體染色體DNADNA上。25將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵受精卵。26選受精卵做受體的原因：具有發(fā)育的全能性27將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：CaCa＋處理法＋處理法。28選用微生物作為

7、受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：繁殖快繁殖快、多為單細(xì)胞單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少遺傳物質(zhì)相對(duì)較少29將目的基因?qū)胨荆▎巫尤~植物）方法是：基因槍法基因槍法或花粉管通道法花粉管通道法30目的基因檢測(cè)與鑒定首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體染色體DNADNA上是否插入了目的基因插入了目的基因，方法是采用DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)。31其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)。32最后檢測(cè)目的基因是否翻譯

8、成蛋白質(zhì)翻譯成蛋白質(zhì)，方法是采用抗原抗原—抗體雜交技術(shù)抗體雜交技術(shù)。334.有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)接種實(shí)驗(yàn)等。34目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志：受體細(xì)胞通過轉(zhuǎn)錄、翻譯合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)（具體題目寫出具體的蛋白質(zhì)）。35從結(jié)構(gòu)上分析，為什么不同生物的DNA能夠連接在一起？①具有共同的具有共同的DNADNA雙螺旋結(jié)雙螺旋結(jié)356單克隆抗體制備篩選雜交瘤細(xì)胞篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞

9、體外培養(yǎng)注射到小鼠的腹腔BBB瘤瘤瘤B瘤細(xì)胞融合抗原注入小鼠體內(nèi)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞滅活病毒57兩次篩選的目的是：第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出所需抗體的雜交瘤細(xì)胞所需抗體的雜交瘤細(xì)胞58雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量繁殖既能大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體專一的抗體。59單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。60單克隆抗體的作用：主要用于治療癌癥治療癌癥治療，可制成“生物導(dǎo)彈

10、生物導(dǎo)彈”。61技術(shù)原理植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性；植物細(xì)胞的全能細(xì)胞膜的流動(dòng)性；植物細(xì)胞的全能性動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性動(dòng)物細(xì)胞核的全能性62愈傷組織的特點(diǎn)：其細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞63受精標(biāo)志標(biāo)志：第二極體第二極體的形成的形成；64受精完成標(biāo)志是雌雄原

11、核融合成合子雌雄原核融合成合子65受精作用準(zhǔn)備階段1：精子獲能精子獲能2：卵子的準(zhǔn)備：卵子必須達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期減數(shù)第二次分裂中期才具備與精子受精的能力。66受精階段受精階段：精子發(fā)生頂體反應(yīng)頂體反應(yīng)穿越放射冠和透明帶，進(jìn)入卵黃膜，雌雄原核形成和配子結(jié)合。67防止多精入卵的兩道屏障防止多精入卵的兩道屏障：在精子觸及卵黃膜瞬間，發(fā)生透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵的第一道屏障；精子入卵后，發(fā)生卵黃膜封閉作用卵黃膜封閉作用，這是防

12、治多精入卵的第二道屏障68受精卵受精卵卵裂期卵裂期桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚原腸胚原腸胚組織器官形成織器官形成幼體幼體69卵裂期卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲有絲分裂，數(shù)量增加增加，胚胎總體積總體積不增加不增加70桑葚胚桑葚胚：細(xì)胞數(shù)目32個(gè)左右，形似桑葚，此時(shí)細(xì)胞都具有全能性71囊胚期囊胚期：細(xì)胞開始開始分化分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織72胚胎工程有哪些技術(shù)：體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)體