實驗室各種染料的配比

1、第1頁共17頁實驗室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制實驗室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制一、生物標(biāo)本常用染料性能簡介一、生物標(biāo)本常用染料性能簡介（一）天然染料（一）天然染料1、蘇木精蘇木精是從南美的蘇木（熱帶豆科植物）干枝中用乙醚浸制出來的一種色素，是最常用的染料之一。蘇木精不能直接染色，必須暴露在通氣的地方，使他變成氧化蘇木精（又叫蘇木素）后才能使用，這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過程需時較長，配置后時間愈

2、久，染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料，他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異，用酸性溶液（如鹽酸—酒精）分化后呈紅色，水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色，用堿性溶液（如氨水）分化后呈藍(lán)色，水洗后呈藍(lán)黑色。2、洋紅洋紅又叫胭脂紅或卡紅

3、。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后，磨成粉末，提取出蟲紅，再用明礬處理，除去其中雜質(zhì)，就制成洋紅。單純的洋紅不能染色，要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，堿性溶液有氨水、硼砂等。洋紅使細(xì)胞核的優(yōu)良染料，染色的標(biāo)本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜，尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時要過濾后再用。（二）人工染料（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，種類很多

4、，應(yīng)用極廣。它的缺點是經(jīng)日光照射容易褪色，苯胺藍(lán)、亮綠、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度，并避免日光直射，也能經(jīng)幾年不褪色。1、酸性品紅酸性品紅是酸性染料，呈紅色粉末狀，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。他是良好的細(xì)胞制染色劑，在動物制片上應(yīng)用很廣，在植物制片上用來染皮層、髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染，能顯示線粒體。組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中，可增強(qiáng)它的染色力。酸性品紅容易跟堿起作用，所以染色過度，易在自來水

5、中褪色。2、剛果紅剛果紅是酸性染料，呈棗紅色粉末狀，能溶于水喝酒精，遇酸呈藍(lán)色。他能作染料，也用作指示劑。他在植物制片中常作為蘇木精或其他細(xì)胞染料的襯墊劑。他用來染細(xì)胞質(zhì)時，能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織制片中用來染神經(jīng)軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色，也可用作類淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗滌和脫水處理要迅速。3、甲基藍(lán)甲基藍(lán)是弱酸性染料，能溶于水和酒精。甲基藍(lán)在動植物的制片技術(shù)方面應(yīng)用極廣。他跟伊

6、紅合用能染神經(jīng)細(xì)胞，也是細(xì)菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生動物的活體染色劑。甲基藍(lán)極易氧化，因此用他染色后不能長久保存。4、固綠固綠是酸性染料，能溶于水（溶解度為4%）和酒精（溶解度為9%）。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑，在染細(xì)胞和植物組織上應(yīng)用極廣。他和蘇木精、番紅并列為植物組織學(xué)上三中最常用的染料。5、蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅲ是弱酸性染料，呈紅色粉末狀，易溶于脂肪和酒精（溶解度為0.15%）。蘇丹Ⅲ是脂肪染色劑。6、伊紅

7、這類染料種類很多。常用的伊紅Y，是酸性染料，呈紅色帶藍(lán)的小結(jié)晶或棕色粉末狀，溶于水（15攝氏度是溶解度達(dá)44%）和酒精（溶于無水酒精的溶解度為2%）。伊紅在動物制片中廣泛應(yīng)用，是很好的細(xì)胞質(zhì)染料，常用作蘇木精的襯染劑。7、堿性品（復(fù)）紅堿性品紅是堿性染料，呈暗紅色粉末或結(jié)晶狀，能溶于水（溶解度1%）和酒精（溶解度8%）。堿性品紅在生物學(xué)制片中用途很廣，可用來染色膠原纖維、彈性纖維、嗜復(fù)紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì)。在生物學(xué)制片中用來染維

8、管束植物的木質(zhì)化壁，又作為原球藻、輪藻的整體染色。在細(xì)菌學(xué)制片中，長用來鑒別結(jié)核桿菌。在爾根氏反應(yīng)中用作組織化學(xué)試劑，已核查脫氧核糖核酸。8、結(jié)晶紫結(jié)晶紫是堿性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。結(jié)晶紫在細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)和細(xì)菌學(xué)等方面應(yīng)用極廣，是一種優(yōu)良的染色劑。他是細(xì)胞核染色常用的，用來顯示染色體的中心體，并可染淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細(xì)胞核不能成功時，用它能得到良好的結(jié)果。用番紅和

9、結(jié)晶紫作染色體的二重染色，染色體染成紅色，紡錘絲染成紫色，所以也是一種顯示細(xì)胞分裂的優(yōu)良染色劑。用結(jié)晶紫染纖毛，效果也很好。用結(jié)晶紫染色的切片，缺點是不易長久保存。9、龍膽紫龍膽紫是混合的堿性染料，主要是結(jié)晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龍膽紫能跟結(jié)晶紫互相替用。醫(yī)藥上用的紫藥水，主要成分是甲基紫，需要時能代替龍膽紫和結(jié)晶紫。10、中性紅中性紅是弱堿性染料，呈紅色粉末狀，能溶于水（溶解度4%）和酒精（溶解度1.8%）。它的堿性溶液中呈現(xiàn)

10、黃色，在強(qiáng)堿性溶液中呈藍(lán)色，而在弱酸性溶液中呈紅色，所以能用作指示劑。中性紅無毒，常做活體染色的染料，用來染原生動物第3頁共17頁現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液，到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條，隨后取出濾紙條，放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干，即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。紅石蕊試紙在堿性溶液中變藍(lán)，藍(lán)石蕊試紙在酸性溶液中變紅。6、檢查二氧化碳的試劑檢查二氧化碳的試劑，可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。配方一溴代麝

11、香草酚藍(lán)溶液取0.1克溴代麝香草酚藍(lán)，溶解在100毫升蒸餾水里，滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液，使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0（黃）～7.6（藍(lán)）。待測物中如果有二氧化碳，會形成碳酸而使溶液變成黃色。配方二石灰水在蒸餾水中加入生石灰（氧化鈣），變加邊攪拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈飽和狀態(tài)時為止。在石灰水澄清后，傾出上層清液，用濾紙過濾，放在密閉瓶內(nèi)保存。如果測定的物質(zhì)中有二氧化碳，會生成碳酸鈣，使

12、石灰水變渾濁。7、檢查細(xì)胞生活力的試劑檢查細(xì)胞有無生活力，可用中性紅甲基藍(lán)試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液，這兩種溶液各取1份混合，用來鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色，而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。（二）分離液（二）分離液1、肌細(xì)胞分離液配方一馬克凱郎（Maccallum）液取1份濃硝酸、2份甘油、3份水，混合后就得到馬克凱郎液。把新鮮的肌肉組織小塊（橫紋肌、心肌和平滑?。┩度脒@種溶液里浸漬，分離時間需

13、1～3日。這種溶液尤其適于分離橫紋肌核心肌細(xì)胞。配方二氫氧化鉀溶液取35克氫氧化鉀，放在100毫升蒸餾水中，加熱，使它完全溶解后，在室溫下冷卻。把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中，浸泡15～30分鐘后，肌細(xì)胞便可分離。2、上皮細(xì)胞分離液配方一福爾馬林—氯化鉀溶液稱取58.44克氯化鈉，用蒸餾水溶解，再稀釋到1000毫升，加入2毫升福爾馬林。這種溶液是很好的上皮細(xì)胞分離液，分離很迅速，而且能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。小腸和氣管的上皮組織小

14、塊，放在此溶液里2小時即可分離，口腔和皮膚上皮組織小塊的細(xì)胞分離一般需3日左右。配方二水和氯醛溶液稱取5克水和氯醛，用蒸餾水溶解，再稀釋到100毫升，就得到5%水合氯醛溶液。從洗凈的動物胃、腸和口腔內(nèi)壁上取下上皮組織一小塊，投入以上溶液中，浸泡24～48小時。3、神經(jīng)細(xì)胞分離液配方一可以用上皮細(xì)胞分離液配方一福爾馬林—氯化鈉溶液來分離神經(jīng)細(xì)胞（見2）。配方二硼酸生理鹽水溶液在生理鹽水溶液內(nèi)加入一些硼酸，攪拌到不再溶解時為止，使成為飽和溶

15、液。把脊椎灰質(zhì)和腦皮質(zhì)部位的神經(jīng)組織一小塊投入這種溶液中分離。4、植物莖細(xì)胞分離液杰弗里氏（Jeffrey’s）液取等量的10%鉻酸溶液和10%硝酸溶液混合，成鉻酸—硝酸溶液。這種溶液用來分離木本植物莖部的導(dǎo)管、管胞、篩管、伴胞和韌皮纖維等。把材料切成小塊放在水里，加熱煮沸，冷卻后再加熱煮沸。這樣重復(fù)幾次，到材料全部沉于水底后，投入分離液內(nèi)，分離時間是24～48小時。5、植物根尖細(xì)胞分離液配方一鹽酸—酒精溶液在1份95%酒精中慢慢的加入