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1、口蹄疫正向間接血凝試驗(yàn)操作要點(diǎn)免疫抗體檢測(cè)是科學(xué)掌握動(dòng)物免疫接種疫苗后抗體產(chǎn)生和消長(zhǎng)變化的有效方法之一??谔阋哒蜷g接血凝試驗(yàn)就是用口蹄疫抗原檢測(cè)未知血清中是否含有口蹄疫抗體的血清學(xué)檢測(cè)方法之一。近年來,此方法經(jīng)常用于牲畜接種口蹄疫疫苗后能否產(chǎn)生抗體或抗體滴度能否達(dá)到免疫保護(hù),以利于指導(dǎo)畜牧業(yè)生產(chǎn)。一、原理用已知血凝抗原檢測(cè)未知血清抗體的試驗(yàn),稱為正向間接血凝試驗(yàn),亦稱間接血凝??乖c其對(duì)應(yīng)的抗體相遇,在一定條件下形成抗原—抗體復(fù)合物。
2、但這種復(fù)合物的分子團(tuán)很小,肉眼看不見。將抗原吸附(致敏)在紅血球表面,再與抗體結(jié)合,紅血球便出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,不僅肉眼能看見,而且反應(yīng)的敏感性大大提高??谔阋哒蜷g接血凝試驗(yàn)就是將口蹄疫純化病毒致敏到綿羊紅血球表面,制成口蹄疫血凝抗原,用于檢測(cè)動(dòng)物血清中的口蹄疫抗體水平。二、適用范圍主要用于檢測(cè)口蹄疫疫苗接種動(dòng)物后血清抗體效價(jià)。三、器材1、96孔110~120度V型醫(yī)用血凝板,與血凝板大小相同的玻板。2、微量移液器與吸頭。3、口蹄疫血凝抗原
3、(口蹄疫正向血凝診斷液)。4、口蹄疫對(duì)照陰性血清。5、口蹄疫對(duì)照陽性血清。6、稀釋液。7、待檢血清(被檢血清)。四、試驗(yàn)方法1、加稀釋液在血凝板上1~6排的1~9孔;第7排的1~4孔;第8排的1~12孔各加稀釋液50微升。2、稀釋待檢血清取1號(hào)待檢血清50微升加入第1排第1孔,混勻(避免產(chǎn)生過多的氣泡),取出50微升移入第2孔,混勻后取出50微升移入第3孔……直到第9孔混勻后取出50微升丟棄。此時(shí)第1排1~9孔待檢血清的稀釋度(稀釋倍數(shù)
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