東南大學(xué)研究生06生化真題

1、2006生化1.基因組DNA文庫與cDNA文庫有何異同？為什么要建立cDNA文庫？cDNA文庫不同于基因組文庫，被克隆DNA是從mRNA反轉(zhuǎn)錄來源的DNA。cDNA組成特點(diǎn)是其中不含有內(nèi)含子和其他調(diào)控序列。cDNA文庫以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體常用噬菌體或質(zhì)粒載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA

2、文庫?；蚪M含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá)，而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時(shí)期的細(xì)胞其基因表達(dá)的種類和強(qiáng)度也不盡相同，所以cDNA文庫具有組織細(xì)胞特異性。cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對真核細(xì)胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組。DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的

3、cDNA基因組文庫用限制性內(nèi)切酶切割細(xì)胞的整個(gè)基因組DNA，可以得到大量的基因組DNA片段，然后將這些DNA片段與載體連接，再轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中去，讓宿主菌長成克隆。這樣，一個(gè)克隆內(nèi)的每個(gè)細(xì)胞的載體上都包含有特定的基因組DNA片段，整個(gè)克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和稱為基因組文庫。將某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段，并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合，即基因組文庫，它包含

4、了該生物的所有基因。2.糖原合成與糖異生能否同時(shí)進(jìn)行？為什么？糖異生作用與糖酵解是兩條相反的途徑，在細(xì)胞內(nèi)不能同時(shí)進(jìn)行。原因（1）兩條途徑的三個(gè)不可逆部位受到嚴(yán)格控制，當(dāng)能量水平降低時(shí)，有利于糖酵解的進(jìn)行而不利于糖異生作用，當(dāng)能量水平升高時(shí)，則有利于糖的異生作用而糖酵解受到抑制。（2）2，6一二磷酸果糖可促進(jìn)酵解而抑制糖異生作用。當(dāng)血糖水平低時(shí)，刺激胰高血糖素分泌，通過cAMP的級(jí)聯(lián)放大調(diào)節(jié)，使2，6一二磷酸果糖水平下降，最終導(dǎo)致糖酵解

5、速度下降，糖異生作用加強(qiáng)。糖原的合成與糖原的分解是兩條相反的途徑，因此在細(xì)胞內(nèi)不能同時(shí)進(jìn)行，如果同時(shí)進(jìn)行會(huì)造成能量的浪費(fèi)和代謝的紊亂。3.真核生物的RNA聚合酶有幾種？其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是什么？RNA聚合酶Ｉ：合成核糖體RNA（rRNA）前體45S，當(dāng)成熟后會(huì)成為28S、18S及58S核糖為RNA，是將來核糖體的主要RNA部份。RNA聚合酶Ｉ合成核糖體RNA（rRNA）前體45S，當(dāng)成熟后會(huì)成為28S、18S及58S核糖體RNA，是將來核糖體的

6、主要RNA部份。RNA聚合酶Ⅱ：合成信使RNA（mRNA）的前體及大部份小核RNA（snRNA）以及微型RNA（micrNA）。RNA聚合酶Ⅱ合成信使RNA（mRNA）的前體及大部份小核RNA（snRNA）以及微型RNA（micrNA）。因?yàn)樗谵D(zhuǎn)錄過程中需要多種轉(zhuǎn)錄因子才能與啟動(dòng)子結(jié)合，所以這是現(xiàn)時(shí)最多研究的種類。因?yàn)樗谵D(zhuǎn)錄過程中需要多種轉(zhuǎn)錄因子才能與啟動(dòng)子結(jié)合，所以這是現(xiàn)時(shí)最多研究的種類。RNA聚合酶Ⅲ：合成轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNAs

7、）、rRNA5S及其他可以在細(xì)胞胞核及原生質(zhì)找到的細(xì)小的RNA。RNA聚合酶Ⅲ合成轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNAs）、rRNA5S及其他可以在細(xì)胞核及原生質(zhì)找到的細(xì)小的RNA。4.若內(nèi)含子發(fā)生突變是否影響蛋白質(zhì)的功能？為什么？通過內(nèi)含子的相對性可使相同的一段DNA編碼不同的蛋白，起到了調(diào)控的作用，并增加了遺傳信息的儲(chǔ)存。斷裂基因的存在可能有兩種意義：（1）有利于儲(chǔ)存較多的遺傳信息，如SV40的T和t蛋白；（2）有利于變異和進(jìn)化，若在交界序列處發(fā)生

8、突變，就可能影響正常的剪切方式從而使蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生較大的變化。剪切位點(diǎn)的點(diǎn)突變，內(nèi)含子不能被切除，產(chǎn)生異常MRNA。由于在外顯子和內(nèi)含子的交界區(qū)發(fā)生突變，可產(chǎn)生新的5或3連接點(diǎn)，對于單個(gè)3位點(diǎn)來說可以和原來的5位點(diǎn)拼接，也可以和新的5位點(diǎn)結(jié)合，這樣產(chǎn)生的不同的mRNA既可以保留原有的蛋白，也可以產(chǎn)生一種新的蛋白，而原核生物基因突變只有在編碼區(qū)發(fā)生，這樣產(chǎn)生了新的蛋白，但原有基因的產(chǎn)物就不可能形成了。1.蛋白質(zhì)的某些特定絲氨酸、蘇氨酸磷酸