前列腺癌基因治療概要

1、前列腺癌基因治療,中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院張潤順 宋豎旗,主要內(nèi)容,流行病學(xué) 解剖 病理生理 病因 診斷 癥狀 治療,流行病學(xué),前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤，95％以上得到確診的病例在45-89歲之間，平均年齡為72歲，并隨著年齡的增長而增加。,解 剖,,病理生理,病 因,前列腺癌早期病變與癌細(xì)胞中cdc37基因表達(dá)增加， 可能是癌變開始的重要步驟。 抑癌基因的失活或缺失 雄激素

2、受體CAG微小重復(fù)區(qū)的長度與該病的發(fā)展 有潛在的關(guān)系,膀胱出口梗阻癥狀轉(zhuǎn)移癥狀,癥 狀,DREPSA前列腺穿刺活檢,診 斷,治 療,隨訪觀察 藥物治療 手術(shù)治療 放、化療 基因治療,載體系統(tǒng)基因?qū)氲耐緩?基因治療的靶向特異性基因治療策略,基因治療,載體系統(tǒng),病毒載體,逆轉(zhuǎn)錄病毒,腺病毒,腺相關(guān)病毒,單純皰疹病毒,痘病毒,非病毒載體,裸露的DNA,脂質(zhì)體,基因槍,分子偶聯(lián)載體,逆轉(zhuǎn)錄

3、病毒載體,逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）載體是目前研究最透徹的一種病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒是單鏈二倍體RNA病毒，依賴其env基因編碼的病毒表面衣殼蛋白與細(xì)胞表面特異性蛋白受體結(jié)合進(jìn)入靶細(xì)胞，之后由病毒pol基因編碼的病毒逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA 逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA，病毒DNA 進(jìn)入分裂細(xì)胞胞核，進(jìn)而隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞DNA。,腺病毒,腺病毒（Ad） 是前列腺癌科學(xué)研究中最常用的載體，它是雙鏈DNA 病毒，分子量大約為36Kb。通過與細(xì)胞表面的受體

4、結(jié)合，腺病毒進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)，自內(nèi)質(zhì)體釋放，病毒基因轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核開始基因復(fù)制表達(dá)。,腺相關(guān)病毒,腺相關(guān)病毒（A-AV）載體 腺相關(guān)病毒是一組對(duì)人類無致病性的單鏈DNA 病毒，與細(xì)胞表面的硫酸肝素結(jié)合進(jìn)入胞漿，在輔助病毒（如腺病毒或單純皰疹病毒）同時(shí)存在的條件下，腺相關(guān)病毒才能完成病毒復(fù)制。,單純皰疹病毒載體,單純皰疹病毒（HSV）載體 單純皰疹病毒是雙鏈DNA病毒，分子量約為150Kb。病毒糖蛋白gB和gD與細(xì)胞表面的硫酸肝素殘

5、基結(jié)合進(jìn)入胞漿。單純皰疹病毒能長期潛伏在人體內(nèi)，當(dāng)機(jī)體免疫狀態(tài)下降時(shí)啟動(dòng)病毒復(fù)制而致病 。,痘病毒,痘病毒 一組雙鏈DNA病毒，包括牛痘病毒和金絲雀痘病毒。由于痘病毒DNA中含有缺陷胸苷激肽酶，感染痘病毒后，病毒將優(yōu)先在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制。 其他病毒載體 桿狀病毒和乳頭瘤病毒,非病毒載體,裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡單的基因表達(dá)系統(tǒng)。注入后，DNA就被帶入細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，在附著體表達(dá)或整合到宿主基

6、因組中去，這一過程叫轉(zhuǎn)染。骨骼肌是高效被轉(zhuǎn)染的組織，研究表明，直接注入骨骼肌的DNA可以進(jìn)入肌細(xì)胞，并持續(xù)表達(dá)一年 脂質(zhì)體：脂質(zhì)體是由包含多種物質(zhì)包括DNA的雙層磷脂膜組成的環(huán)型封閉囊泡，可被細(xì)胞內(nèi)吞而使基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞中,非病毒載體,金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注入金屬顆粒包裹的DNA可以大大提高轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的效率。分子偶聯(lián)載體：大量的非脂質(zhì)的陽離子聚合物與DNA形成復(fù)合物，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。,基因?qū)氲耐緩?目的

7、基因的有效導(dǎo)入是基因治療成功的前提之一前列腺癌瘤體內(nèi)注射、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射及皮內(nèi)注射的選擇應(yīng)根據(jù)患者的病情和載體及治療的靶基因的特點(diǎn)來選擇促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡或腫瘤自殺基因治療的基因治療多采用直接前列腺癌瘤體內(nèi)注射。而針對(duì)前列腺癌的免疫基因治療可以選擇皮下、皮內(nèi)或肌肉注射,基因治療的靶向特異性,組織特異性啟動(dòng)子可驅(qū)動(dòng)目的基因在靶器官或組織中特異性表達(dá),實(shí)現(xiàn)基因治療的靶向性。數(shù)種前列腺組織特異性啟動(dòng)子已應(yīng)用于前列腺癌的實(shí)驗(yàn)治療中

8、。有的啟動(dòng)子甚至僅在前列腺癌組織中表達(dá),對(duì)正常前列腺組織毒副作用很小。如PSA、PS2MA、KLK3 ( human prostate specific kalikrein3) 啟動(dòng)子等。,基因治療策略,基因矯正治療細(xì)胞減數(shù)基因治療免疫調(diào)節(jié)基因療法,基因矯正治療,基因改變分為二種 一種是腫瘤生長抑制基因，即抑癌基因；另一種是促進(jìn)腫瘤生長的基因，即癌基因。矯正基因治療就是恢復(fù)那些突變或被刪除的抑癌基因和拮抗癌基因的功能。恢

9、復(fù)抑癌基因的功能：這種方法的基因靶向包括p53、Rb、p16、p21和CAMs 抑制癌基因的功能：基因突變會(huì)導(dǎo)致癌基因的激活，促進(jìn)腫瘤生長或逃避正常凋亡程序。癌基因包括：ras、myc、erbB2 和bcl-2,細(xì)胞減數(shù)基因治療,細(xì)胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細(xì)胞的基因或通過增強(qiáng)癌細(xì)胞對(duì)藥物或放射線的敏感性或剝奪癌細(xì)胞的血供來間接殺死癌細(xì)胞,免疫調(diào)節(jié)基因療法,大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)基因治療的研究主要集中在轉(zhuǎn)移細(xì)胞因子基因來刺激抗原遞