細(xì)胞生物學(xué)課后題匯總

1、第三章 細(xì)胞生物學(xué)的研究方法,練習(xí)題一、不定向選擇題（0.5分/題）1、用于活細(xì)胞觀察的技術(shù)有（ ABC ）。 A 相差顯微鏡技術(shù) B 微分干涉顯微鏡技術(shù) C 暗視野顯微鏡技術(shù)2、可用（ B ）技術(shù)來研究質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的不對稱性？ A 熒光顯微鏡技術(shù) B 冰凍斷裂-蝕刻技術(shù) C 相差顯微鏡技術(shù)3、假設(shè)你對重建生活細(xì)胞的有絲分裂過程中染色體的三維結(jié)構(gòu)感興趣，

2、你將選擇哪種技術(shù)（ C ）？ A 冰凍斷裂-蝕刻技術(shù) B 掃描電鏡技術(shù) C 激光共焦點(diǎn)掃描顯微鏡技術(shù)4、如果對生物大分子進(jìn)行動態(tài)研究和追蹤，你采用哪種技術(shù)？（ AB ） A 放射自顯影技術(shù) B 熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù) C 超速離心技術(shù)5、流式細(xì)胞儀可用于（ ABCD ）。 A 細(xì)胞分選 B 蛋白質(zhì)含量測定 C DNA含量測定

3、 D RNA含量測定 二、名詞解釋（1分/題） 1、單克隆抗體技術(shù) 2、原位雜交技術(shù) 3、免疫熒光標(biāo)記技術(shù) 4、細(xì)胞融合三、動物克隆過程中應(yīng)用了哪些技術(shù)？（1.5分）細(xì)胞拆合、細(xì)胞培養(yǎng)、顯微操作技術(shù),◆膜蛋白在膜中位置測定： 可以通過非通透性試劑對蛋白質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記或修飾實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。,根據(jù)右圖各處理細(xì)胞的膜蛋白SDS-聚丙烯凝膠電泳的帶型判斷5種膜蛋白在膜中的位置，用簡圖表示。A）對照B

4、）用不能透過細(xì)胞質(zhì)膜的胰蛋白酶 處理完整的細(xì)胞C）先提高細(xì)胞質(zhì)膜的透性，再用胰 蛋白酶處理透性細(xì)胞,,,,,,,,,,,,,,,,3,2,4,5,1,3,2,2,3,4,4,5,1,A B C,2、細(xì)胞外基質(zhì)（ extracellular matrix ，ECM）： 指分布于細(xì)胞外空間, 由細(xì)胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞外基質(zhì)的基本成分是 、

5、 、 、 和 。其中 能夠 形成水性的膠狀物，構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)； 和 構(gòu) 成細(xì)胞外基質(zhì)的骨架，賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性； 和 起粘著作用，促使細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。,2、細(xì)胞外基質(zhì)（ extracellular

6、matrix ，ECM）： 指分布于細(xì)胞外空間, 由細(xì)胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞外基質(zhì)的基本成分是膠原蛋白 、 彈性蛋白 、蛋白聚糖 、 纖連蛋白 和 層黏連蛋白 。其中 蛋白聚糖 能夠形成水性的膠狀物，構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)；膠原蛋白和 彈性蛋白 構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的骨架，賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性；纖連蛋白和 層黏連蛋白起粘著作用，促使細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合。,3、細(xì)胞識別（Cell Reco

7、gnition） 指細(xì)胞對同種或異種細(xì)胞、同源或異源細(xì)胞以及對自己和異己分子 的認(rèn)識和鑒別。4、細(xì)胞黏著（Cell Adhesion） 指在細(xì)胞識別的基礎(chǔ)上,細(xì)胞發(fā)生聚集形成細(xì)胞團(tuán)或組織的過程。既可介導(dǎo)同親型細(xì)胞黏著，又可介導(dǎo)異親型細(xì)胞黏著的細(xì)胞黏著分子是 D 。 A.鈣黏蛋白 B.整聯(lián)蛋白 C.選擇素 D.免疫球蛋白超家族,1、假若你新發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的細(xì)胞膜蛋白，通過序列分析提示為一個(gè)多次

8、跨膜蛋白。為了確定跨膜次數(shù)及其末端朝向，你在細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)了該蛋白：1）通過免疫熒光技術(shù)標(biāo)記細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)用抗N端抗體直接標(biāo)記活細(xì)胞時(shí)，出現(xiàn)膜上熒光，而用抗C端抗體時(shí)卻沒有。用甲醇固定細(xì)胞（此時(shí)細(xì)胞膜被破壞）后，則兩種抗體都出現(xiàn)膜上熒光標(biāo)記；2）如果先將細(xì)胞膜分離純化，然后用蛋白酶充分降解膜外部分，再經(jīng)SDS-PAGE和銀染，發(fā)現(xiàn)有10條主帶，其中3條在對照細(xì)胞（即僅轉(zhuǎn)染了空質(zhì)粒載體的細(xì)胞）的相應(yīng)細(xì)胞中也有；3）如果先用蛋白酶處理，再分

9、離細(xì)胞膜，則發(fā)現(xiàn)6條主帶，對照樣品有其中的2條。從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，試分析該多次跨膜蛋白的結(jié)構(gòu)。2、比較cAMP信號通路和磷脂酰肌醇信號通路的異同點(diǎn)。,練習(xí)題 ：,答案：實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：(1)用抗N端抗體直接標(biāo)記活細(xì)胞時(shí)，出現(xiàn)膜上熒光，而用抗C端抗體時(shí)卻沒有出現(xiàn)膜上熒光。說明所研究的膜蛋白多態(tài)鏈的N端在胞外，C端在胞內(nèi)。   (2)將細(xì)胞膜分離純化，然后用蛋白酶充分降解膜外部分，再經(jīng)SDS-PAGE和銀染，發(fā)現(xiàn)有10條

10、主帶，其中三條在對照細(xì)胞(即僅轉(zhuǎn)染了空質(zhì)粒載體的細(xì)胞)的相應(yīng)樣品中也有。說明所研究膜蛋白極有可能是7次跨膜的多肽鏈，另外的三次跨膜結(jié)構(gòu)是質(zhì)粒載體自身核苷酸序列表達(dá)的。   (3)如果先用蛋白酶處理，再分離細(xì)胞膜，發(fā)現(xiàn)了6條主帶，而對照樣品有其中的兩條。說明多肽鏈在胞內(nèi)由四部分組成(三個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)域+C端部分)，另外的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)區(qū)域是質(zhì)粒載體自身核苷酸序列表達(dá)的。   (4)綜上所述：所研究的膜蛋白

11、多肽鏈的N端在胞外，C端在胞內(nèi)；多肽鏈?zhǔn)?次跨膜形成的，在胞內(nèi)和胞外分別有三個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)域，其結(jié)構(gòu)模型與7次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體極其相似。,1、兩個(gè)蛋白激酶K1和K2，在胞內(nèi)信號級聯(lián)反應(yīng)中依次起作用。如果兩個(gè)蛋白激酶中任何一個(gè)含有致其永久性失活的突變，則細(xì)胞對胞外信號無反應(yīng)。假如一種突變使K1永久激活，則在含有該種突變的細(xì)胞中即使沒有胞外信號也可觀察到一種響應(yīng)?，F(xiàn)有一種雙突變細(xì)胞：含有失活突變的K2和帶激活突變的K1，觀察到即使沒有胞外信

12、號，也會產(chǎn)生反應(yīng)。那么在正常信號傳遞途徑中，是K1激活K2還是K2激活K1？簡要說明理由2、在一系列實(shí)驗(yàn)中，將編碼突變型受體酪氨酸激酶的基因?qū)爰?xì)胞。這些突變基因比正?；虻谋磉_(dá)高很多，而細(xì)胞仍表達(dá)來自其正常受體基因的正常受體。導(dǎo)入下列突變受體酪氨酸激酶基因，會產(chǎn)生什么樣的結(jié)果？簡要說明理由。1）缺少胞外結(jié)構(gòu)域；2）缺少胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。,練習(xí)題：,練習(xí)題：,在水中構(gòu)建含Na+/K+泵作為唯一膜蛋白的人工脂質(zhì)體小泡，并假設(shè)每一個(gè)泵反向

13、轉(zhuǎn)運(yùn)Na+和K+,所有Na+/K+泵分子原來面向胞質(zhì)的部分現(xiàn)在朝向小泡外面。分析在下列條件下將會發(fā)生什么情況，并簡要說明理由？（5分）1) 將小泡懸浮在含Na+和K+的溶液中，并且小泡內(nèi)溶液有同 樣的離子組成；2) 將ATP加到（1）所描述的懸浮液內(nèi)；3) 加入ATP，但是小泡內(nèi)外溶液中只含有K+而不含有Na+；4) 加入ATP，但是小泡內(nèi)外溶液中只含有Na+而不含有K+；5) 在（1）所述的懸浮液中加入ATP，但是

14、小泡膜除了含有 Na+/K+泵以外，還含有K+滲漏通道。,,1沒事2吸na排ka3沒事4泡內(nèi)na濃度小幅上升5吸na排k直到k濃度平衡,課后作業(yè)：,試述粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)對分泌蛋白的合成、加工及轉(zhuǎn)運(yùn)(5分)。試述蛋白質(zhì)分選轉(zhuǎn)運(yùn)的基本途徑及類型（5分）。,試述粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)對分泌蛋白的合成、加工及轉(zhuǎn)運(yùn)(5分)。,利用游離的氨基酸、mRNA和小麥胚芽提取物組成的無細(xì)胞體系研究蛋白質(zhì)合成，小麥胚芽提取物內(nèi)有核糖體和翻譯所需的輔助因子。如果

15、利用該體系研究新生肽的轉(zhuǎn)移，對于表1中的每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件，請指出蛋白質(zhì)是否完全合成，成熟蛋白質(zhì)是否具有信號序列，以及是否能跨膜轉(zhuǎn)移？并簡要說明理由。（5分）,無細(xì)胞體系研究蛋白質(zhì)合成的實(shí)驗(yàn)方案,練習(xí)題：,■ 指出下列哪些過程可直接被秋水仙素、紫杉醇、細(xì)胞松弛素阻斷？（0.5分/個(gè)）1）軸突運(yùn)輸2）紡錘體的形成3）紡錘體的解體4）吞噬作用5）胞質(zhì)環(huán)流6）動物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂■ 簡述細(xì)胞骨架在動植物細(xì)胞有絲分裂中的作用。（5分）,,

16、1、微管（秋水仙素）2、微管（秋水仙素）3、微管（紫杉醇）4、微絲（細(xì)胞松弛素）5、微絲（細(xì)胞松弛素）6、微絲（細(xì)胞松弛素）,簡述細(xì)胞骨架在動植物細(xì)胞有絲分裂中的作用。（5分）,微管：1.形成紡錘體2.組織染色體運(yùn)動（中期、后期）3.參與植物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂（壁物質(zhì)的運(yùn)輸軌道，并控制微纖絲的排列）微絲：參與動物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂（動物收縮環(huán)）中間纖維：核膜的解體與重建（核纖層）,以哺乳動物為例，說明核糖體的生物發(fā)生過程,練習(xí)

17、題：,采用3H-TdR脈沖標(biāo)記一種哺乳動物細(xì)胞系A(chǔ)，以標(biāo)記后的時(shí)間為橫坐標(biāo)，3H標(biāo)記的處于有絲分裂期的細(xì)胞占處于有絲分裂期的總細(xì)胞百分比為縱坐標(biāo)作圖。2h后出現(xiàn)標(biāo)記的正處于有絲分裂的細(xì)胞，2.5h后達(dá)到第一個(gè)峰曲線升支的一半高度，8h后達(dá)到第一個(gè)峰曲線降支的一半，18h后達(dá)到第二個(gè)峰曲線升支的一半，則該細(xì)胞的細(xì)胞周期時(shí)間以及各時(shí)相的時(shí)間分別是多少？,2,0,,2.5,,8,,18,脈沖標(biāo)記DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂指數(shù)觀察測定法原理：

18、 對測定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞，通過統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來測定細(xì)胞周期。有關(guān)名詞： TG1：G1期的持續(xù)時(shí)間 TG2：G2期的持續(xù)時(shí)間 TS：S期的持續(xù)時(shí)間 TM：M期的持續(xù)時(shí)間 TC：一個(gè)細(xì)胞周期的持續(xù)時(shí)間 PLM：標(biāo)記的有絲分裂細(xì)胞所占的比例 TdR：胸腺嘧啶脫氧核苷，是DNA的特異 前

19、體，能被S期細(xì)胞攝入，而摻進(jìn) DNA中。通常使用的是3H或者14C標(biāo) 記的TdR。,,■ 測定原理：①待測細(xì)胞經(jīng)3H-TdR標(biāo)記后，所有S期細(xì)胞均被標(biāo)記。②S期細(xì)胞經(jīng)G2期才進(jìn)入M期，所以一段時(shí)間內(nèi)PLM=0。③開始出現(xiàn)標(biāo)記M期細(xì)胞時(shí)，表示處于S期最后階段的細(xì)胞，已渡過G2期，所以從PLM=0到出 現(xiàn)PLM的時(shí)間間隔為TG2。④S期細(xì)胞逐漸進(jìn)入M期，PLM上升，到達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)候說明來

20、自處于S最后階段的細(xì)胞， 已完成M，進(jìn)入G1期。所以從開始出現(xiàn)M到PLM達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)間就是TM。⑤當(dāng)PLM開始下降時(shí)，表明處于S期最初階段的細(xì)胞也已進(jìn)入M期，所以出現(xiàn)M到PLM又開始下 降的一段時(shí)間等于TS。⑥從M出現(xiàn)到下一次M出現(xiàn)的時(shí)間間隔就等于TC，根據(jù)TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出TG1的長度。,PLM,,,,,Tc=18-2.5=15.5Tm=(2.5-2)*2=1TG2=(開頭一段）=2TS=

21、8-2.5=5.5TG1=15.5-1-2-5.5=7,流式細(xì)胞儀測定法,,,,C,80：40,B峰,S期,練習(xí)題：,,3分,,（1）突變體1是cdc25- , 因?yàn)闆]有Cdc25就不能去除cdc2上抑制性的磷酸基 團(tuán)，MPF無活性，細(xì)胞將不正常地長期生長而不進(jìn)入分裂；1分 突變體2是weel-, 因?yàn)闆]有Weel就不能將抑制性的磷酸基團(tuán)添加在 cdc2上，MPF有活性，細(xì)胞在未成熟時(shí)即提前分裂。

22、1分（2）在兩種突變體中G2期不正常，在突變體1中延長，突變體2中縮短。 因?yàn)镸PF啟動細(xì)胞從G2期進(jìn)入M期的相關(guān)事件，誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入M期。1分,Cdc25c,Weel/Mikl,CAK,APC,,,翻譯后水平的調(diào)控,B,D,C2^3=8,B,D,,,ABC,ABDE,ABCDE,BCDE,真核細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控有哪些不同環(huán)節(jié)，各有何作用？（4分） 四個(gè)不同環(huán)節(jié)（各1分）：1、轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控：決定某個(gè)基因是否會被轉(zhuǎn)錄，

23、什么時(shí)候轉(zhuǎn)錄，并決定轉(zhuǎn)錄的頻率。包括轉(zhuǎn)錄激活和轉(zhuǎn)錄阻遏。2、轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控：決定初始mRNA轉(zhuǎn)錄物（hnRNA）被加工為能翻譯成多肽的mRNA的途徑。包括組成型剪接和選擇性剪接兩種方式，其中選擇性剪接是一種廣泛存在的RNA加工機(jī)制。3、翻譯水平的調(diào)控：決定某種mRNA是否會真正得到翻譯，如果能翻譯還決定翻譯的頻率和時(shí)間長短。一般通過細(xì)胞質(zhì)中特異mRNA和多種蛋白的相互作用來實(shí)現(xiàn)的，涉及mRNA翻譯的調(diào)控、mRNA穩(wěn)定性的調(diào)控、mR

24、NA的細(xì)胞質(zhì)定位等。4、翻譯后水平的調(diào)控：蛋白質(zhì)合成后通常還需加工、修飾和正確折疊才能成為有活性的蛋白質(zhì)。,練習(xí)題：,3、簡述動物細(xì)胞Caspase依賴性的兩條凋亡途徑。,決定死亡的,執(zhí)行死亡的,與死亡細(xì)胞被吞噬有關(guān)的,死亡細(xì)胞在吞噬體中被降解的,天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶,死亡受體,細(xì)胞色素c,Apaf-1(Ced-4的同源物),11,天冬氨酸,酶原,起始caspase,執(zhí)行caspase,當(dāng)細(xì)胞接受凋亡信號分子(Fas,TN

25、F等)后，凋亡細(xì)胞表面信號分子受體（Apo-1,CD95,TNF-R1）聚集，并通過胞質(zhì)區(qū)的死亡結(jié)構(gòu)域招募接頭蛋白(FADD，TRADD)和Caspase酶原形成死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物DISC，起始Caspase在復(fù)合物中通過自身切割而活化，進(jìn)而切割激活執(zhí)行Caspase，活化的執(zhí)行Caspase切割細(xì)胞內(nèi)重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，引起細(xì)胞凋亡。 由線粒體起始的內(nèi)源途徑當(dāng)細(xì)胞接受凋亡信號刺激，線粒體的外膜通透性發(fā)生改變（主要受B