《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 腸球菌的檢驗(yàn)》地方標(biāo)準(zhǔn)修訂編制說明

1、1《吉林省食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)吉林省食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)食品中腸球菌的檢驗(yàn)方法食品中腸球菌的檢驗(yàn)方法》編制說明編制說明一、任務(wù)來源本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)《食品中食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c球菌的檢驗(yàn)》地方標(biāo)進(jìn)行制定受吉林省衛(wèi)生廳委托。項(xiàng)目編號(hào)：DBS2201820121.承擔(dān)及參加單位本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：吉林省疾病預(yù)防控制中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要參加單位：長春市預(yù)防控制中心。主要起草人：劉桂華、龔云偉、李月婷、趙薇2.標(biāo)準(zhǔn)制定的主要過程：⑴確立標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則，比較與研

2、究國內(nèi)相關(guān)檢驗(yàn)方法的文獻(xiàn)報(bào)道，并結(jié)合大量的實(shí)驗(yàn)室方法的研究工作，制定出標(biāo)準(zhǔn)的討論稿。⑵組織有關(guān)參加單位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室比對(duì)驗(yàn)證工作，結(jié)合比隊(duì)結(jié)果，找出實(shí)驗(yàn)過程存在的問題，匯總、分析數(shù)據(jù)，修改標(biāo)準(zhǔn)文本。⑶撰寫《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c球菌的檢驗(yàn)》標(biāo)準(zhǔn)文本的《征求意見稿》和標(biāo)準(zhǔn)《編制說明》等材料。⑷把標(biāo)準(zhǔn)文本送給十位專家征求意見，匯總專家意見。根據(jù)專家意見對(duì)標(biāo)準(zhǔn)文本進(jìn)行完善。5提交《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c球菌的檢驗(yàn)》（送審稿）《編制說明》和《征求意

3、見匯總表》供衛(wèi)生廳專家審議。二、本標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)背景腸球菌(Enterococci)如同糞便大腸桿菌群，為人及動(dòng)物腸道內(nèi)的正常菌。3四、增加的內(nèi)容1.商品化鑒定系統(tǒng)的應(yīng)用《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c球菌的檢驗(yàn)》因現(xiàn)無國家標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)DA、AOAC、USD也無標(biāo)準(zhǔn)方法。該標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用了VitekGNI＋全自動(dòng)微生物免疫分析儀）或API20strep試劑條1（法國生物梅里埃公司）。這些方法都比較成熟，穩(wěn)定性較好，已被許多國家和組織的標(biāo)準(zhǔn)采用，鑒定效果很好。2

4、.快速篩選方法的應(yīng)用本標(biāo)準(zhǔn)采納“固定酶底物法測定食品中腸球菌”作為快速篩選方法。采取自然樣品和人工染菌的方法，利用常規(guī)方法和酶底物法同時(shí)測定，并對(duì)檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，比較方法的差異程度，判定酶底物法測定食品中腸球菌的可行性。該方法既快速（24h）靈敏度、特異性又高。五、主要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證試驗(yàn)1.人工染菌，利用傾注法、MPN法及酶底物法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)腸球菌的腦心肉湯24h培養(yǎng)物進(jìn)行含菌量的檢測，分別是：傾注法檢出2.2108cfumLMPN

5、法檢出3.6108cfumL酶底物法檢出2.3109cfumL結(jié)論：三種方法比較酶底物法更敏感。利用標(biāo)準(zhǔn)菌株腸球菌菌懸液，對(duì)20份米粉進(jìn)行人工染菌，再利用三種方法進(jìn)行最低檢出線的檢測（三種方法的比對(duì)試驗(yàn)）。結(jié)果：傾注法最低檢出線13cfugMPN法最低檢出線8cfug酶底物法3cfug.結(jié)論:酶底物法靈敏度高.2.酶底物法特異性的實(shí)驗(yàn)：利用糞腸球菌（ATCC29212），大腸艾希氏菌（ATCC25922），乙型溶血性鏈球菌（ATCC32