藥理學(xué)試驗(yàn)朱偉

1、藥 理 學(xué) 實(shí) 驗(yàn),實(shí)驗(yàn)課程簡介,（1）實(shí)驗(yàn)基本技能,（2）阿司匹林鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn),（5）鏈霉素的毒性反應(yīng)及對抗,（4）地塞米松抗炎實(shí)驗(yàn),（3）心得安對氯仿引起的心室纖 顫預(yù)防作用,實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)要求,實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)目的,實(shí)驗(yàn)一、基本實(shí)驗(yàn)操作,不同給藥途徑的藥物對小鼠睡眠時間的影響,實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）掌握小鼠給藥的基本方法。2）比較不同給藥途徑藥物起效的時間快慢。實(shí)驗(yàn)原理：不同的給藥途徑的藥物起效時間不相同。,,,,,1,實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?

2、實(shí)驗(yàn)動物：小鼠實(shí)驗(yàn)藥物：1%戊巴比妥鈉,2,主要實(shí)驗(yàn)材料,稱重、分組,,,,,,腹腔給藥,皮下給藥,灌胃給藥,（0.1ml/10g）,小鼠翻正反射消失時翻正反射再次恢復(fù)時間,主要實(shí)驗(yàn)過程,實(shí)驗(yàn)基本技能,右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠耳

3、及頭部皮膚而固定。,注意事項(xiàng)：,小鼠捉拿與固定方法,注意事項(xiàng)：1. 取背部及后腿皮下，注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即進(jìn)行注射。,皮下注射,注意事項(xiàng)： 1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。 2、使用針頭不宜太粗，避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。,腹腔注射,給藥途徑,注意事項(xiàng)：1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和

4、頭部皮膚，其他三指抓住背部皮膚，將鼠抓持在手掌內(nèi)，固定好動物，頭部和頸部保持很平,右手取注射器進(jìn)行灌胃。2.灌時針頭沿鼠口角通過食管進(jìn)入胃內(nèi)。灌時如很通暢，則表示針頭已進(jìn)入胃內(nèi)；如動物有嘔吐動物或強(qiáng)烈掙扎，必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進(jìn)針不順硬向里插。,灌胃給藥,給藥途徑,（1）注意基本給藥途徑的正確操作。 （2）注意小鼠翻正反射消失時間判定 （＞1min） （3）客觀真實(shí)的記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。,4

5、,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng),,,,,仔細(xì)觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合藥理學(xué)總論知識思考，何種給藥途徑起效最快。為什么？,問題與思考,實(shí)驗(yàn)二、阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用,實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?①掌握鎮(zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法。（熱板法、扭體法）②觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)原理：熱刺激或者化學(xué)刺激物使小鼠 產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，觀察給藥前后小鼠疼痛反應(yīng)的變化。（痛閾值、扭體次數(shù)）,1,實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?實(shí)驗(yàn)動物：小鼠實(shí)驗(yàn)藥物：阿司匹林主

6、要儀器：熱板測痛儀,2,主要實(shí)驗(yàn)材料,設(shè)定儀器溫度（55℃）,動物初篩,,,,,,,給藥組： 60mg/ml阿司匹林 0.1ml/10g,對照組：引用水0.1ml/10g,灌胃給藥,,,,給藥后30min、45min、60min再次測定各組小鼠痛閾值。,主要實(shí)驗(yàn)過程（熱板法）,篩選指標(biāo)：小鼠的痛閾值—即小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)的時間。 以小鼠添后足作為出現(xiàn)疼痛觀察指標(biāo)。 測定2次痛閾值，以痛閾值大于5秒，小于30秒，做為篩選合

7、格動物。,,小鼠篩選方法：,動物隨機(jī)分組,,,,,,給藥組： 60mg/ml阿司匹林0.1ml/10g,灌胃給藥,,,,30min后各組小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；記錄15min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)。,對照組： 飲用水0.1ml/10g,,小鼠扭體反應(yīng),主要實(shí)驗(yàn)過程（扭體法）,熱板儀溫度設(shè)定：55℃±0.5 ℃。室溫 :以15 ～20ºC為宜 。熱板法中動物性別的選擇：雌性。痛閾值判定指標(biāo)：

8、添后足。痛閾值時間：初篩（＞5s、＜30s）。 超過60s動物未添足，將動物取出，痛閾值以60s計(jì)算。實(shí)驗(yàn)中保持小鼠足底及熱板內(nèi)干燥。冰醋酸現(xiàn)用現(xiàn)配。,4,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng),,,,問題與思考,,實(shí)驗(yàn)三、心得安對氯仿引起的心室纖顫預(yù)防作用,實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?①觀察β受體阻斷藥對氯仿誘導(dǎo)室顫的預(yù)防作用。實(shí)驗(yàn)原理：氯仿誘導(dǎo)的室顫可能與其誘發(fā)體內(nèi)兒茶酚胺含量升高和對心臟的直接作用有關(guān)。心得安有β受體阻斷作用，可對抗氯仿對心臟的作用,1,實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

9、的及原理,實(shí)驗(yàn)動物：小鼠實(shí)驗(yàn)藥物：心得安、氯仿,2,主要實(shí)驗(yàn)材料,動物隨機(jī)分組,,,,,,給藥組： 10mg/ml心得安0.1ml/10g,灌胃給藥,,,,30min后各取1只，同時扣入含有0.5ml氯仿棉球的燒杯內(nèi)，待呼吸停止后，解剖觀察心臟跳動情況，判斷有無室顫出現(xiàn),對照組： 飲用水0.1ml/10g,,主要實(shí)驗(yàn)過程,（1）室顫的發(fā)生與體重有關(guān)，25-35克室顫率較高 （2）小鼠呼吸停止后不能在燒杯內(nèi)停留過久 （

10、3）解剖時不要將心臟剪破,4,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng),,,,問題與思考,,實(shí)驗(yàn)四、地塞米松對小鼠耳毛細(xì)血管通透性的作用,1.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?學(xué)習(xí)急性炎癥動物模型方法 觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用1.2 實(shí)驗(yàn)原理：二甲苯為致炎物質(zhì)，可促進(jìn)炎癥介質(zhì)釋放，導(dǎo)致動物急性炎癥。比較給藥組與對照組局部腫脹程度的變化判斷藥物的抗炎作用。,1,實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?實(shí)驗(yàn)動物：小鼠 實(shí)驗(yàn)藥物：地塞米松 二甲苯,主要實(shí)驗(yàn)材料,小鼠稱重、標(biāo)記、分組,,,,給藥組：地

11、塞米松0.1ml/10g,腹腔注射,,30min后用二甲苯50μl均勻涂抹每只鼠的右耳,對照組： 生理鹽水0.1ml/10g,,,,,,,90mim后小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。,主要實(shí)驗(yàn)步驟,抗炎實(shí)驗(yàn)中動物性別的選擇：雄性小鼠耳廓滴加二甲苯時，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)。小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。,4,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng),,,,本實(shí)驗(yàn)中選擇雄性動物的原因？,問題與思考,常見炎癥模型

12、介紹,,,實(shí)驗(yàn)五、鏈霉素的毒性反應(yīng)及對抗,1.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?觀察鏈霉素引起的肌肉麻痹作用及氯化鈣的對抗作用1.2 實(shí)驗(yàn)原理： 氨基甙類抗生素用量過大對神經(jīng)肌肉接頭有阻斷作用，可與突觸前膜“鈣結(jié)合部位”結(jié)合，使乙酰膽堿釋放減少，引起肌肉麻痹，鈣離子可對抗此毒性反應(yīng),1,實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?實(shí)驗(yàn)動物：小鼠 實(shí)驗(yàn)藥物：鏈霉素 氯化鈣,主要實(shí)驗(yàn)材料,動物隨機(jī)分組,,,,,,給藥組： 62.5mg/ml鏈霉素