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1、第8章 獸藥殘留,分析,一、獸藥定義及獸藥殘留來源,(一)獸藥定義1.獸藥是指用于預(yù)防、治療、診斷動(dòng)物疾病或者有目的地調(diào)節(jié)動(dòng)物生理機(jī)能的物質(zhì)(含藥物飼料添加劑),主要包括:血清制品、疫苗、診斷制品、中藥材、中成藥,化學(xué)藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品、外用殺蟲劑、消毒劑等。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,在我國(guó),魚藥、蜂藥、蠶藥也列入獸藥管理。 2.獸藥殘留對(duì)食品動(dòng)物用藥后,動(dòng)物產(chǎn)品的任何食用部分中的原型藥物或/和其代謝產(chǎn)物,包括與獸藥
2、有關(guān)的雜質(zhì)的殘留。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(二)獸藥殘留來源現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)日益趨向于規(guī)?;⒓s化,不可避免地帶來了大量的疫病問題,為了提高飼料報(bào)酬和滿足人們對(duì)動(dòng)物性食品的需要,需要大量使用飼料藥物添加劑,這已成為保障我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展不可少的一環(huán)。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,目前,造成我國(guó)獸藥殘留的原因,大致有如下; 1.非法使用違禁藥物 濫用己烯雌酚給雞催肥 ;鹽酸克侖特羅(又叫瘦肉精 );在飼料中添加避孕藥、雌性激素養(yǎng)黃鱔、甲
3、魚 ;,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,2.不遵守休藥期規(guī)定 獸藥用于防病或治病是有療程規(guī)定的,有病的動(dòng)物也不可能無休止地吃藥,特別是藥物飼料添加劑,都規(guī)定了休藥期 。如抗菌促生長(zhǎng)的喹乙醇預(yù)混劑,體藥期是35天 。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,3、超劑量、超范圍(對(duì)象)用藥 4.不遵守有關(guān)標(biāo)簽的規(guī)定,二、獸藥殘留的危害,1.對(duì)人體產(chǎn)生直接毒性作用 1)急、慢性毒性 2)激素樣作用 3)過敏反應(yīng) 2.
4、對(duì)人類胃腸道微生物平衡產(chǎn)生破壞3.增強(qiáng)人類病原菌的耐藥性4.環(huán)境危害,三、常見獸藥的種類,1.抗生素類藥物2.磺胺類藥物3.硝基呋喃類藥物4.抗寄生蟲類藥物5.激素類藥物,分析方法,主要有微生物分析法、放射化學(xué)法、免疫法(包括放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、熒光免疫法、化學(xué)發(fā)光免疫法)、氣相色譜法、薄層色譜法、高效液相色譜法(包括柱前和柱后衍生熒光法)、液相色譜-質(zhì)譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法。,四、抗生素類獸藥,抗生素是由細(xì)菌、真菌或其
5、他微生物在生活過程中所產(chǎn)生的物質(zhì),具有抑制或殺滅細(xì)菌、真菌、螺旋體、支原體、依原體等致病微生物的作用。抗生素是能抵抗致病微生物的藥物,是抗菌消炎藥中最大的一類。,市場(chǎng)上有售的常用的品種:,抗生素類藥物廣泛地應(yīng)用于各種感染性疾病,其品種繁多。1. 四環(huán)素類 2. 大環(huán)內(nèi)酯類 3. β-內(nèi)酰胺類4. 氨基糖甙類5. 氯霉素類,第一節(jié) 四環(huán)素類,一、四環(huán)素類化合物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)四環(huán)素類抗生素(TCs)具有共同的基本母核(氫化并四
6、苯環(huán)),僅取代基有所不同。,常見的四環(huán)素類藥物,包括:四環(huán)素(TC )、土霉素( OTC )、金霉素( CTC )、強(qiáng)力霉素(DC )、二甲胺四環(huán)素(MINO )、甲烯土霉素(MTC )、去甲基金霉素(DMCTC )和毗甲四環(huán)素(PRMTC )等,四環(huán)素類藥物,金霉素、土霉素和去甲基金霉素是 3 種由微生物自然產(chǎn)生的四環(huán)素類藥物,已經(jīng)被成功地從真菌中分離出來;其他如強(qiáng)力霉素、甲烯土霉素、二甲胺四環(huán)素、毗甲四環(huán)素及四環(huán)素則是通過半合成法
7、制備的,二、四環(huán)素類抗生素的毒性及其代謝,四環(huán)素類藥物為廣譜抗生素,是相互關(guān)系密切的抑菌性抗生素,抗菌譜和毒性相似,對(duì)多種α-溶血性鏈球菌、非溶血性鏈球菌、革蘭陰性桿菌、立克次體、螺旋體、支原體屬和衣原體屬均有效。,四環(huán)素類抗生素,在動(dòng)物養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛,主要作為飼料添加劑用于預(yù)防和治療疾病。近些年來,在牛、豬、綿羊、山羊、家禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的四環(huán)素類抗生素主要是土霉素、金霉素、四環(huán)素和強(qiáng)力霉素等。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(一)四環(huán)素類抗
8、生素的代謝四環(huán)素類藥物的給藥可通過幾種方式:口服(添加到飼料或飲用水中)、注射及通過乳腺注入。無論采用何種給藥方式,四環(huán)素類抗生素都能在體內(nèi)廣泛分布,而在腎臟和肝臟組織中含量尤高。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,由于四環(huán)素類藥物普遍為低親脂性,因此在脂肪中檢測(cè)不到四環(huán)素類藥物殘留。相反,由于四環(huán)素類抗生素對(duì)鈣具有親和性,能在家禽、豬、牛以及魚類的骨骼組織中蓄積。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(二)四環(huán)素類抗生素的毒性與最大殘留限量 四環(huán)素類
9、抗生素口服吸收良好,分布廣泛,易在骨骼和牙齒中沉積;可在肝臟中富集,造成肝損害。,,,,,三、四環(huán)素類獸藥殘留樣品前處理,(一)樣品提取 由于四環(huán)素類抗生素的強(qiáng)極性性質(zhì),在生物樣品中易與蛋白質(zhì)形成共軛物而提取困難。稀無機(jī)酸可將四環(huán)素類化合物與蛋白質(zhì)分離,但四環(huán)素類化合物一旦進(jìn)入水相,由于其在有機(jī)相的分配系數(shù)較低,再將其提取入易揮發(fā)的有機(jī)相進(jìn)行濃縮和凈化就變得困難了。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,多數(shù)四環(huán)素類化合物對(duì)光敏感,而且在強(qiáng)酸或堿性條件
10、下不穩(wěn)定,在弱酸性( pH=3 )條件下形成差向異構(gòu)體,在強(qiáng)酸性( pH < 2 )條件下形成脫水產(chǎn)物。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,分析液體樣品(如牛奶)中的四環(huán)素類抗生素殘留時(shí),一般需要一個(gè)預(yù)離心步驟以除去脂肪。在凈化步驟之前,還需采用乙酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液對(duì)樣品進(jìn)行稀釋。對(duì)于半固體樣品,如肌肉、腎臟、肝臟,通常需要更強(qiáng)烈的樣品預(yù)處理步驟以破碎組織。可采用切碎機(jī)和組織均質(zhì)器通過機(jī)械分散作用來完成這一步驟。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,將
11、四環(huán)素類抗生素從可食動(dòng)物產(chǎn)品中分離出來是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的步驟。主要困難在于這些化合物在被分離時(shí)傾向于與金屬離子形成鰲合物或與樣品基質(zhì)成分鍵合。為提高提取效率,推薦采用EDTA 、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽或草酸等四環(huán)素類化合物的競(jìng)爭(zhēng)性鰲合劑。同時(shí)需要考慮采取適當(dāng)?shù)奶崛l件以減少與蛋白質(zhì)的鍵合。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,強(qiáng)酸或酸性脫蛋白劑非常適合用來降低四環(huán)素類化合物與蛋白質(zhì)的鍵合作用,但在強(qiáng)酸性條件下四環(huán)素類抗生素易降解為脫水產(chǎn)物。 pH4
12、.0 的琥珀酸鹽緩沖液、酸性乙睛和酸性甲醇都被成功應(yīng)用于四環(huán)素類抗生素的提取。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(二)樣品凈化在樣品提取步驟獲得的水相或有機(jī)相樣品提取液中待測(cè)四環(huán)素類抗生素的濃度可能非常低,而且還可能含有共提取物。如果樣品的最終溶液中含有共提取物,會(huì)增加檢測(cè)器的背景噪聲,難以檢測(cè)痕量濃度水平的待測(cè)物質(zhì)。為減少干擾和濃縮待測(cè)化合物,初始樣品提取液需要采用進(jìn)一步的凈化步驟,如液一液分配、固相萃取、超濾、免疫親和色譜或在線微量富集技術(shù)。
13、,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,1.固相萃取 SPE 由于不需要大容量的溶劑,樣品基質(zhì)中的四環(huán)素類抗生素。又省時(shí)省力,固相萃取被廣泛用于分離和凈化生物樣品中的四環(huán)素類抗生素。 TCs 具有苯環(huán)、多種活性官能團(tuán),因此各種如的 SPE 都能用于 TCs 的凈化, SPE 主要包括 C18 柱、陽(yáng)離子交換柱、苯基 SPE 柱等。應(yīng)用于分部環(huán)素類抗生素的固相萃取劑主要為反相 C18 吸附劑。由于四環(huán)素類抗生素易于和金屬離子鰲合,為避免待測(cè)物在過固相
14、萃取柱時(shí)的潛在損失,一般先采用 EDTA 對(duì)反相固相萃取柱進(jìn)行預(yù)處理。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,2.液-液分配可通過將待測(cè)化合物從水相轉(zhuǎn)移到不互溶的有機(jī)相而直接去除基質(zhì)成分。存在問題:四環(huán)素類化合物由于極性太強(qiáng),在任何 pH 值都不能被定量轉(zhuǎn)移入不互溶的有機(jī)相。當(dāng)采用四丁基銨鹽作為離子對(duì)試劑時(shí),在 pH8.2 條件下采用二氯甲烷提取土霉素和四環(huán)素的回收率超過 85 %。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(三)四環(huán)素類獸藥的分析四環(huán)素類抗生素殘留
15、的測(cè)定方法主要包括微生物抑制法、 酶聯(lián)免疫法、分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、液相色譜一質(zhì)譜法等。樣品經(jīng)過提取和凈化后,四環(huán)素類抗生素可通過薄層色譜或液相色譜進(jìn)行分離,再采用分光光度、熒光或質(zhì)譜檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行定量浦定。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,1.微生物抑制法微生物法是一種傳統(tǒng)的測(cè)定四環(huán)素類化合物和其他抗生素的分析方法。測(cè)定原理:是根據(jù)抗生素對(duì)其敏感的特定微生物的生長(zhǎng)抑制作用 ,通過抑菌圈的大小來進(jìn)行樣品中抗微生物藥物殘留的判斷(
16、測(cè)定抑菌圈直徑,樣品抑菌圈直徑小于陽(yáng)性對(duì)照抑菌圈直徑判定為陰性,否則判定為陽(yáng)性)。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,蠟狀芽抱桿菌 ATCC 11778 是一種經(jīng)典的用于分析四環(huán)素類的微生物,其對(duì)金霉素的靈敏度為 0.005mg / L ,對(duì)四環(huán)素和土霉素的靈敏度為 0.025mg / L ,對(duì)二甲胺四環(huán)素的靈敏度為 0.001~0.002mg / L 。相對(duì)于其他分析方法,微生物抑制法操作簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、不需要精密儀器和復(fù)雜的樣品前處理過程,因而
17、適合大量樣品的篩選。微生物抑制法的最大缺點(diǎn)是不能區(qū)分具體的四環(huán)素種類,因此也難以進(jìn)行定量檢測(cè)。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,2.酶聯(lián)免疫法間接酶聯(lián)免疫法可用來檢測(cè)牛奶中的四環(huán)素類抗生素。四環(huán)素-牛血清白蛋白共軛物用于抗體制備,同源的四環(huán)素- β -酪蛋白共軛物作為包埋試劑,而羊抗兔 IgG-辣根過氧化物酶作為第二抗體。牛奶樣品經(jīng)離心脫脂,采用磷酸鹽緩沖液至少以 1 :30 的比例進(jìn)行稀釋后,直接采用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行測(cè)定,檢測(cè)限可達(dá) 5 u
18、g / kg 。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,當(dāng)采用商業(yè)化試劑盒檢測(cè)蜂蜜中的四環(huán)素、金霉素和土霉素殘留時(shí)發(fā)現(xiàn)其對(duì)金霉素具有強(qiáng)烈的交叉反應(yīng)活性。試劑盒對(duì)四環(huán)素和金霉素的檢測(cè)限均為 15 ug / kg ,但由于所用抗體與土霉素的交叉反應(yīng)活性較低,對(duì)土霉素的檢測(cè)限為 250 u g / kg .實(shí)驗(yàn)表明,空白蜂蜜樣品經(jīng)緩沖液稀釋 50 倍已足以消除基質(zhì)干擾。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,3.薄層色譜法薄層色譜法( TLC )又分為正相薄層色譜( NP-
19、TLC )和反相薄層色譜( RP -TLC )。正相薄層色譜一般使用纖維素、硅膠、硅藻土等作為吸附層??傮w而言,正相薄層色譜是一種簡(jiǎn)單的、不需特殊設(shè)備的分離方法,但在制板時(shí)卻要花費(fèi)大量時(shí)間消除 TCs 與金屬離子的鰲合作用,故通常在吸附劑和溶劑系統(tǒng)中加入 EDTA 以消除金屬離子的影響。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,反相薄層色譜分析 TCs 時(shí),溶劑系統(tǒng)中通常加入草酸以消除金屬離子的影響.在 RP -TLC 溶劑體系中通常含有磷酸、檸檬酸、酒
20、石酸、 EDTA 等以獲得對(duì)TCs好的分離效果,但脫尾現(xiàn)象比較嚴(yán)重;在 RP-TLC 溶劑體系中加人草酸后,可以消除 TCs 與金屬離子的鰲合作用,減少脫尾現(xiàn)象。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,4.高效液相色譜法反向 LC 操作簡(jiǎn)單、方法靈活,已成為包括四環(huán)素類抗生素在內(nèi)的許多藥物殘留檢測(cè)的主要分析手段。普遍使用的硅膠基反向鍵合固定相表面存在殘存的硅醇基或金屬離子(如 Fe 3 +,A1 3 + ) ,而四環(huán)素類抗生素易與金屬離子鰲合,反向柱殘
21、存的硅醇基與四環(huán)素類抗生素可以通過氫鍵或離子交換作用,因此導(dǎo)致色譜峰拖尾,保留值不穩(wěn)定或過長(zhǎng),出現(xiàn)峰形異常和分離度下降。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,為避免形成金屬鰲合物和在反向 LC 色譜柱上的吸附,在反向 LC 中,優(yōu)化流動(dòng)相的組成是四環(huán)素類抗生素殘留檢測(cè)的重要方法之一。通常在流動(dòng)相中加入酸(如磷酸、草酸、檸檬酸、酒石酸、 EDTA 等)、有機(jī)改性劑(甲醇、乙睛等)、離子對(duì)試劑掩蔽劑等,并以加草酸為多數(shù)。,第二節(jié) 大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,大環(huán)內(nèi)
22、酯類抗生素( MALs )作為抗生素的一個(gè)重要類別被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)與獸醫(yī)學(xué)上對(duì)細(xì)菌感染的治療或預(yù)防。這些化合物在結(jié)構(gòu)上均具有一個(gè)高度取代的大內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu),大多數(shù)的種類母體分屬十四元和十六元大環(huán)兩組 。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,在 20 世紀(jì) 50 年代末,作為青霉素類化合物的替代品,紅霉素就已經(jīng)開始被使用于獸醫(yī)臨床。到現(xiàn)在已經(jīng)有相當(dāng)多品種的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素能夠同時(shí)作為人用和獸醫(yī)用藥,還有一些品種的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素已作為禽畜專用的抗生素品種生
23、產(chǎn).利用其抗革蘭陽(yáng)性菌以及抗支原體活性對(duì)感染性疾病進(jìn)行預(yù)防治療和對(duì)亞臨床疾病進(jìn)行控制。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,還有一些類的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素具有其他獨(dú)特的作用:比如泰樂菌素、螺旋霉素等除抗感染能力之外在低濃度下具有顯著的促生長(zhǎng)作用,是飼料中常見的促生長(zhǎng)劑;美貝霉素類化合物以及其半合成的衍生物的抗寄生蟲和節(jié)肢動(dòng)物的特性成為重要的驅(qū)蟲劑;那他霉素則具有明顯的抗真菌效力,廣泛應(yīng)用于多種食品,特別是乳制品的防腐中。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,在畜
24、牧和食品行業(yè)中大環(huán)內(nèi)酯類化合物如此廣泛的使用,也衍生出一些消極的后果,其中最為受人關(guān)注的是動(dòng)物源病原菌抗藥性的獲得給動(dòng)物、人類健康和環(huán)境帶來了危害。在對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素作為飼料添加劑的風(fēng)險(xiǎn)防范上,歐盟走在了最前列。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,1997 年歐盟對(duì)食品和動(dòng)物飼料中的螺旋霉素和泰樂菌素頒布了禁令, 1999 年 5 月,歐盟采納了 SCAN (動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)科學(xué)委員會(huì))的觀點(diǎn),同意應(yīng)該盡可能減少,并且逐漸過渡到禁用可以同時(shí)作為醫(yī)藥和獸
25、藥用途的抗生素類飼料添加劑。到 2006 年 1 月,歐盟徹底禁用所有抗生素類的生長(zhǎng)促進(jìn)劑。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,三、分析與檢測(cè)方法 在色譜方法成熟完善之前,和其他絕大多數(shù)抗生素一樣,這類藥物的測(cè)定曾經(jīng)采用過微生物測(cè)定法,這種方法在分析時(shí)間、分析成本、對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的分離和確認(rèn)能力、方法的定量能力上都有著明顯的不足,也不能檢測(cè)無活性的代謝產(chǎn)物;特別是在畜產(chǎn)品和食品中藥物的殘留分析領(lǐng)域中發(fā)揮的作用不大。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,分光光度法相對(duì)
26、色譜方法有儀器簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)捷、分析時(shí)間短而成本低廉的優(yōu)勢(shì),因此在早期使用分光光度法建立過大環(huán)內(nèi)酯的測(cè)定方法。但是,大多數(shù)大環(huán)內(nèi)醋類藥物的紫外吸收波長(zhǎng)都不高于 280nm ,分光光度測(cè)量會(huì)被生物基體中的雜質(zhì)所嚴(yán)重影響。 近年以來,應(yīng)用于食品樣品中各種類大環(huán)內(nèi)酯藥物殘留分析的方法,基本上都基于液相色譜方法及相關(guān)聯(lián)用技術(shù)。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,(一)薄層色譜 一般用作食品樣品分析的薄層色譜方法,都要對(duì)其中的大環(huán)內(nèi)酯類化合物在預(yù)提取過程之后
27、進(jìn)行液液萃取凈化,以去除其中親脂性的各種雜質(zhì),防止干擾分析。薄層色譜分析大環(huán)內(nèi)酯使用的固定相大多數(shù)是硅膠,采用較高極性的展開劑進(jìn)行分離。乙醇一水 ;氯仿一甲醇一丙酮一甘油等,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,1 .微生物分析法微生物法是一種傳統(tǒng)的測(cè)定氨基糖苷類化合物和其他抗生素的分析方法.是英國(guó)、歐洲、美國(guó)、中國(guó)等國(guó)家和地區(qū)藥典規(guī)定的測(cè)定藥品中氨基糖苷類化合物的測(cè)定方法。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,2.氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù) 由于氨基糖苷類
28、化合物的高極性和難揮發(fā)性,因此很少有利用氣相色譜測(cè)定氨基糖苷類化合物。通常先進(jìn)行硅烷化衍生提高化合物的揮發(fā)性。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,3.薄層色譜法薄層色譜被英國(guó)和歐盟藥典規(guī)定為卡那霉素和新霉素的藥品的鑒定方法,但是這種方法的靈敏度比較低,甚至低于生物檢測(cè)法的靈敏度。由于氨基糖苷類化合物沒有熒光,因此需要衍生測(cè)定。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,4.液相色譜法由于氨基糖苷類化合物的水溶性好、極性大,因此比較適合用液相色譜技術(shù)進(jìn)行分析,目前有
29、關(guān)的動(dòng)物源性食品中氨基糖苷類化合物的分析方法主要都為液相色譜法。通常使用的分離技術(shù)有陽(yáng)離子交換和反相色譜分離技術(shù),檢測(cè)技術(shù)有紫外、熒光、蒸發(fā)光散射、電化學(xué)和質(zhì)譜技術(shù) 。,第三節(jié) 氯霉素類,一、概述氯霉素類是一類廣譜抗生素,廣泛應(yīng)用于動(dòng)物傳染性疾病的治療,對(duì)革蘭陽(yáng)性、革蘭陰性細(xì)菌均有抑制作用。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,美國(guó)食品及藥物管理局( FDA )指出:氯霉素對(duì)人體的影響無法控制,所以不可能制定安全標(biāo)準(zhǔn)。在美國(guó)、加拿大和歐盟,氯霉素嚴(yán)
30、禁用于產(chǎn)肉動(dòng)物、蜂蜜和動(dòng)物飼料中。歐盟、美國(guó)等已將氯霉素列為法定禁用獸藥,并確定了最低檢出限:歐盟為 0.1 u g / kg ,美國(guó)為 0 .3 u g / kg 。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,2.氯霉素殘留現(xiàn)狀及影響中國(guó)與歐盟之間引發(fā)了一系列貿(mào)易紛爭(zhēng)。 涉及產(chǎn)品:蝦仁、鰻魚、淡水小龍蝦、蜂蜜,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,二、殘留測(cè)定方法 氯霉素殘留的檢測(cè)方法大致可分為三大類:微生物測(cè)定法、免疫分析法和化學(xué)方法。 目前,氯霉素的篩選方法較
31、多的是采用免疫分析法,其中以酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法( ELISA )應(yīng)用最為廣泛 。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,食品中氯霉素痕量殘留的化學(xué)檢測(cè)方法主要包括:氣相色譜法(電子捕獲) ( GC- ECD ) ,氣相色譜一高分辨質(zhì)譜法( GC -H RMS ) ,高效液相色譜法( HPLC-UV , HPLC-DAD ) ,氣相色譜-質(zhì)譜法( GC- MS ) ,液相色譜-質(zhì)譜法( LC-MS )等方法。,請(qǐng)?jiān)诖溯斎肽臉?biāo)題,到目前為止氯霉素類藥物的多
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