生物安全管理與防護

1、,,,,,,,,,生物安全管理與防護,,,,主要內(nèi)容,?實驗室感染史?生物安全管理現(xiàn)狀與意義?這幾個概念你了解嗎?生物安全柜的分類和正確使用?幾個誤區(qū)要關注?生物安全防護的要點,,,實驗室感染簡史,1886年 Koch報告第一例霍亂病的實驗室感染：德國柏林的一名學生在處理霍亂弧菌培養(yǎng)物時被感染并發(fā)病 1893年 Reincke報告第一例實驗室傷寒感染 1899年 Birt和Lamb報告第一例布

2、氏桿菌引起的實驗室獲得性感染 1905年 Johnston報告第二例布氏菌實驗室感染并作了評價,,,,,,,,1931年 Findlay報告第一例實驗室感染肝炎的 病例1932年 有報告實驗室工作人員被恒河猴咬傷 后患猿猴皰疹病毒性腦炎，這是該病毒感染人類的第一例1943年 在巴西的黃熱病實驗室，兩周內(nèi)8名 實驗室人員發(fā)生了委內(nèi)瑞拉馬腦炎1967年 在德國有26名實驗室人員因接觸黑尾 長猴的血液和組織而感染一種病毒 (馬堡病

3、毒)，最終有9人死亡,實驗室感染簡史,,,,,,,,1969年 尼日利亞北部一家醫(yī)院3名護士感染砂粒 病毒，其中2人死亡。這是該病毒感染人的首次報 告（1951、1965、1976）美國實驗室相關感染調(diào)查5000個實驗室累計感染總數(shù)：3921例 與已知事故相關的80%（氣溶膠？）最常報告的感染：乙型肝炎、肺結(jié)核、傷寒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病,實驗室感染簡史,,,,,,,1999年 Walker等報告實驗室人員感染率1

4、994～1995年為16.2人/10萬·年1988～1989年為82.7人/10萬·年2003年后 新加坡、臺灣和北京先后發(fā)生了實驗 室人員感染SARS-CoV的報告2004年 中國CDC病毒所形態(tài)室SARS-CoV感染 事件導致9人感染，其中1人死亡，747人被隔離,實驗室感染簡史,,,,實驗室感染的證據(jù)分析,①宋、楊均在同一實驗室工作，該室一直從事SARS-CoV工作②封鎖病毒所后，未再出現(xiàn)

5、任何SARS病人③第二代病例魏某胸水中分離到SARS-CoV，其全基因序列與實驗SARS-CoV高度同源④宋、楊從未接觸過野生動物⑤宋、楊潛伏期內(nèi)北京沒有任何其他SARS病例主要原因：病毒滅活不徹底，滅活方法沒有進行有效的評評價，沒有規(guī)定對每一批病毒的滅活效果進行監(jiān)測和質(zhì)控責任追究：13名處級以上領導被免職名處級以上領導被免職,遺傳修飾微生物有生物活性的載體不僅可能影響實驗室人員的生物安全，還可能引起使

6、用后廢棄于環(huán)境后的生物污染問題——其影響更是深遠而不易察覺,,,,,,,事故頻發(fā)的背后是“海恩法則,關于飛行安全的“海恩法則” 一起重大的飛行安全事故背后有２９個事故征兆 每個征兆背后有３００個事故苗頭 每個苗頭背后還有１０００個事故隱患 幾乎所有的災難都是多個漏洞的疊加。只要認真落 實已有的規(guī)則、規(guī)定，很多事故完全可以避免,,,,生物安全目標,,,促進致病微生物/化學毒物/放射線/ 基因的安全操作并教育人們在下述環(huán) 境安全操作：

7、?實驗室?生產(chǎn)設施?醫(yī)療衛(wèi)生設施最終目標：實驗室安全事件零發(fā)生！,實驗室生物安全管理,1、實驗室生物安全管理組織生物安全委員會2、實驗室人員的管理（1）職責明確實驗室主任實驗室技術人員（2）安全培訓培訓計劃、內(nèi)容、方式（3）健康監(jiān)測（4）業(yè)務檔案3、實驗室制度管理4、實驗室儀器設備管理,1、生物安全管理組織,單位法定代表人生物安全領導小組單位生物安全委員會實驗室負責人----第一責任人,2、

8、實驗室人員管理（1）相關職責,最高管理者 單位法定代表人對實驗室生物安全負總責，負責建立安全防護實驗室管理體系 組織并授權生物安全領導小組和生物安全委 員會負責實驗室生物安全工作 批準和發(fā)布生物安全手冊。,單位生物安全委員會,審議實驗室管理規(guī)章制度 生物危險評估，審查和批準實驗項目 審查突發(fā)事故應急預案， 審查操作程序，監(jiān)督和檢查法規(guī)和規(guī)程的執(zhí)行 實驗室事故評估，提出處理和改進意見 對實驗室人員實施醫(yī)務監(jiān)督 指定實驗室技術和生物

9、安全負責人的代理人等。成員由單位負責人、生物安全管理人員、臨床醫(yī)生擔任。,生物安全領導小組,負責領導安全防護實驗室的建設、管理、使用維修，協(xié)調(diào)與實驗室生物安全相關科室部門的工作。,實驗室主任,一般應由具有副高級以上技術職稱，熟悉實驗室 生物安全防護知識和有關法規(guī)、制度、規(guī)程的人員擔任；（為什么是第一責任人？） 負責實驗室的日常管理、實驗技術和生物安全工作；組織生物安全防護知識和有關法規(guī)、制度、 規(guī)程的宣貫 ；決定進入實驗室的工作人

10、員；,監(jiān)督有關法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正出現(xiàn)的違規(guī)活動并有權停止實驗；定期組織對實驗室設備各項技術參數(shù)的檢查和實驗室裝備的維護保養(yǎng)；負責實驗室緊急情況及事故的處置并向生物安全委員會和生物安全領導小組報告 ；,,實驗室技術人員,2、實驗室人員管理（2）實驗室生物安全培訓,1、培訓計劃上崗前培訓計劃，日常培訓計劃2、培訓內(nèi)容（1）實驗室安全法律、法規(guī)（2）實驗室安全防范知識個體防護、安全使用設備、水電防火防盜（3）專業(yè)安全

11、知識SOP 生物安全手冊、應急處理3、人員培訓方式,（3）實驗室生物安全培訓實驗室人員健康監(jiān)測就職前體檢每年定期健康監(jiān)測，監(jiān)測和報告制度暴露和暴露后監(jiān)測處理方案,（4）實驗室人員業(yè)務檔案人員、設備,2、實驗室人員管理,3、實驗室制度管理,（1）實驗室安全管理制度（2）菌（毒）種、生物樣本管理制度（3）劇毒品、危險品的管理制度（4）實驗室廢棄物處置制度廢棄物分類： 生物廢棄物、動物尸體、化學廢棄物等等生物廢棄物處置

12、按照不同性質(zhì)、不同的要求采用不得方法滅活后再處置符合相關法律法規(guī)要求（5）實驗室內(nèi)務管理制度（6）SOP從取樣、質(zhì)量控制、清潔、消毒、廢棄物處理、個人防護、溫度、標簽等等（7）電氣設備安全操作規(guī)程,4、實驗室儀器設備管理,1、新購儀器設備的安裝、調(diào)試和驗收2、編寫操作、使用管理、專項維護保養(yǎng)規(guī)程3、儀器設備的封存和報廢4、儀器設備的維護保養(yǎng),實驗室生物安全防護分級,?一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1或P1?

13、二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2或P2?三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3或P3?四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4或P4,風險源分析,典型的一級生物安全水平實驗室,風險源分析,一級生物安全水平實驗室要求：1、必須為實驗室安全運行、清潔和維護提供足夠的空間。2、實驗室墻壁、天花板和地板應當光潔、易清潔、防滲漏并耐化學品和消毒劑的腐蝕。地板應當防滑。3、實驗臺面應是防水的，并可耐消毒劑、酸、堿、有機溶劑和中等

14、熱度的作用。4、應保證實驗室內(nèi)所有活動的照明，避免不必要的反光和閃光。5、實驗室器具應當堅固耐用，在實驗臺、生物安全柜和其他設備之間及其下面要保證有足夠的空間以便進行清潔。6、應當有足夠的儲存空間來擺放隨時使用的物品，以免實驗臺和走廊內(nèi)混亂。在實驗室的工作區(qū)外還應當提供另外的可長期使用的儲存間。,風險源分析,7、應當為安全操作及儲存溶劑、放射性物質(zhì)、壓縮氣體和液化氣提供足夠的空間和設施。8、在實驗室的工作區(qū)外應當有存放外衣和私人

15、物品的設施。9、在實驗室的工作區(qū)外應當有進食、飲水和休息的場所。10、每個實驗室都應有洗手池，并最好安裝在出口處，盡可能用自來水。11、實驗室的門應有可視窗，并達到適當?shù)姆阑鸬燃?，最好能自動關閉。12、二級生物安全水平時，應在靠近實驗室的位置配備高壓滅菌器或其他清除污染的工具。13、安全系統(tǒng)應當包括消防、應急供電、應急淋浴以及洗眼設施。14、應當配備具有適當裝備并易于進入的急救區(qū)或急救室。,風險源分析,15、在設計新的設施時

16、，應當考慮設置機械通風系統(tǒng)，以使空氣向內(nèi)單向流動。如果沒有機械通風系統(tǒng)，那么實驗室窗戶應當能夠打開，同時應安裝防蟲紗窗。16、必須為實驗室提供可靠和高質(zhì)量的水。要保證實驗室水源和飲用水源的供應管道之間沒有交叉連接。應當安裝防止逆流裝置來保護公共飲水系統(tǒng)。17、要有可靠和充足的電力供應和應急照明，以保證人員安全離開實驗室。備用發(fā)電機對于保證重要設備的正常運轉(zhuǎn)（如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰柜等）以及動物籠具的通風都是必要的。18、要有可靠

17、和充足的燃氣供應。供氣設施必須得到良好維護。19、實驗室和動物房偶爾會成為某些人惡意破壞的目標。必須考慮物理和防火安全措施。必須使用堅固的門、紗窗以及門禁系統(tǒng)。適當時還應使用其他措施來加強安全保障。,風險源分析,典型的二級生物安全水平實驗室,,,,一級生物安全防護實驗室,安全設施和個體防護：?一般無須使用生物安全柜等專用安全設備?工作人員在實驗室應穿工作服，帶防護眼鏡?工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應戴手套,,,,?

18、實驗室結(jié)構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境 具有中等潛在危害的微生物?包含微生物舉例,麻疹病毒 乙型肝炎病毒 衣原體,沙門氏菌 HIV血清學檢測 志賀氏菌,二級生物安全防護實驗室,,,,BSL-2實驗室,,,,,,,二級生物安全防護實驗室,設計和建造的特殊要求：?消毒設施（高壓滅菌鍋、化學消毒裝置等）?洗眼裝置?可自動關閉的門鎖?門口有發(fā)光指示裝置?換氣裝置（3-4次/小時）,,,,

19、滿足一級實驗室 (標準微生物操作規(guī)程) 各款要求，在此基礎上特別注意：1. 制定出入制度2. 實驗室人口貼上生物危險標志3. 制定實驗室特定的生物安全操作規(guī)則4. 每年一次最新培訓制度,二級生物安全防護實驗室特殊微生物操作規(guī)程,,,,5. 使用塑料器材代替玻璃器材6. 禁止用手處理破碎的玻璃器具7. 培養(yǎng)基、組織、體液及其它具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運輸及消毒、滅菌,,

20、,,8. 用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽，禁止用手直接從注射器取下。9. 用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。10.非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特 定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒,,,,,11.工作人員應接受必要的免疫接種和檢測 (如乙型 肝炎疫苗，卡介苗等)12.必要時收集從事危險性工作人員的本底血清13.嚴格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血檢測 HIV 抗體 和備案制度。每半年進行一次 HIV 抗

21、體檢測，并 保留樣品14.對從事艾滋病實驗室工作的人員，因工作中意外 事故造成HIV 職業(yè)暴露者，所在單位應負責解決 抗病毒及其它相應治療的醫(yī)療費用,,,,15.實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒16.人員暴露于感染性物質(zhì)時，及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R 報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案17.禁止將無關動物帶入實驗室,,,,二級生物安全防護實驗室,安全設施和個體防護：?處理以下致病微生物時應在生物安全柜 (Ⅱ級) 中進行

22、 ，包括:高濃度容量有噴濺可能性?上述材料的離心操作如使用密封的離心機轉(zhuǎn)子或安全離 心杯，且只在生物安全柜中開閉，可在實驗室中進行?Ⅱ級生物安全柜必須每年進行一次年度現(xiàn)場檢測,?當微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進行時，須使 用面部保護裝置?應有相應的SOP?在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服，不得穿著 外出。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一 洗滌或丟棄?當手可能接觸感染材料、污染的設備時應

23、戴手套。如 可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。 不得戴著手套離開實驗室，工作完全結(jié)束后方可除去 手套。一次性手套不得清洗和再次使用,下列操作必須在P2實驗室或全排式生物安全柜中進行：1、含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測2、溶解、固定或用其他方法處理滅活的病毒和(或) 有傳染性的病毒基因片段3、常規(guī)的細菌和毒素檢查4、可能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理5、臨床樣品的包裝、分裝6、離心管和離心機轉(zhuǎn)頭的封

24、閉和開啟,,,,實驗室生物安全事故處理（以 HIV為例）,?職業(yè)暴露是指實驗室、醫(yī)護、預防保健人員以及有 關的監(jiān)管工作人員，在從事艾滋病防治工作及相關 工作的過程中意外被艾滋病毒感染者或艾滋病患者 的血液、體液污染了破損的皮膚或非胃腸道粘膜， 或被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及 其它銳器刺破皮膚，而具有被艾滋病病毒感染的可 能性的情況,美國CDC的研究顯示，影響針頭刺傷后的危險性因素包括：?傷口的深度?有可

25、見的血液從傷口溢出?針頭刺破了靜脈或動脈?污染源來自于晚期艾滋病病毒感染者(病毒載量高),,,,緊急處理措施,?皮膚針刺傷或切割傷：立即用肥 皂和大量流水沖洗，盡可能擠出 損傷出的血液，用70%乙醇或其 它消毒劑消毒傷口?皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染 部位，并用適當?shù)南緞┙荩?如70%乙醇或其它皮膚消毒劑,,,,,問答題,1、哪些實驗操作需在生物安全柜內(nèi)進行？ 答：對可能使病原微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶

26、膠的操作，應在生物安 全柜內(nèi)進行。如無法在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，應加裝 負壓罩。2、生物安全柜有何要求？ 答：生物安全柜的型號應根據(jù)實驗的項目和對象確定。生物安全柜的使用 應做好使用記錄，包括開機時間、使用時間、消毒方法及時間。 生物安全柜安裝后、移位后、更換高效過濾器后應對其生物安全性能進行 檢測，正常使用后每年必須由具有專項資質(zhì)的第三方進行檢測，保存檢測 記錄。3、非工作人員能否進入實驗室？ 答：禁止非工作人

27、員進入實驗室。特殊情況下，非工作人員進入實驗室須 經(jīng)實驗室負責人批準，由專人陪同，并做好登記。4、進入實驗室有何防護要求？ 答：進出實驗應更換工作服，操作時應佩戴手套、戴防護帽和口罩，必要 時使用面部保護裝置。當防護用品破損或污染物潑濺時應立即更換。應著 防護工作鞋。每次實驗結(jié)束后和離開實驗室前應及時洗手和消毒。,,,,,,結(jié)語,實驗室生物安全是全球面臨的重要公共衛(wèi)生問題。 在世界范圍內(nèi)，原有的和新發(fā)的傳染病不斷出現(xiàn)，許 多動物源性