生物化學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)

1、2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,第九章 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué),一、化學(xué)動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ),二、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速率的影響,三、酶的抑制作用,四、溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響,五、pH對(duì)酶反應(yīng)的影響,六、激活劑對(duì)酶反應(yīng)的影響,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,一、化學(xué)動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ),化學(xué)反應(yīng)的兩個(gè)基本問題：（1）反應(yīng)進(jìn)行的方向、可能性和限度；（2）反應(yīng)進(jìn)行的速率和反應(yīng)機(jī)制。,（一）反應(yīng)速率及其測(cè)定,反應(yīng)速率是以單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)物或生成物濃度的改變來

2、表示。用瞬時(shí)速率表示反應(yīng)速率： v =dc/dt反應(yīng)速率的測(cè)定實(shí)際上就是測(cè)定不同時(shí)間的反應(yīng)物或生成物的濃度。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（二）反應(yīng)分子數(shù)和反應(yīng)級(jí)數(shù),1. 反應(yīng)分子數(shù)：在反應(yīng)中真正相互作用的分子的數(shù)目。單分子反應(yīng)，雙分子反應(yīng)，……判斷一個(gè)反應(yīng)是單分子反應(yīng)還是雙分子反應(yīng)，應(yīng)先了解反應(yīng)機(jī)制，即反應(yīng)過程中各個(gè)單元反應(yīng)是如何進(jìn)行的。

3、,2. 反應(yīng)級(jí)數(shù)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，整個(gè)化學(xué)反應(yīng)的速率服從哪種分子反應(yīng)速率方程式，則這個(gè)反應(yīng)即為幾級(jí)反應(yīng)。一級(jí)反應(yīng)，二級(jí)反應(yīng)，……，零級(jí)反應(yīng)。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（三）各級(jí)反應(yīng)的特征,1. 一級(jí)反應(yīng)凡是反應(yīng)速率只與反應(yīng)物的濃度的一次方成正比的，這種反應(yīng)就稱為一級(jí)反應(yīng)。速率常數(shù)與半衰期成反比，半衰期與反應(yīng)物的初濃度無關(guān)。2. 二級(jí)反應(yīng)凡是反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度二次方（或兩種物質(zhì)濃度的乘積）成正比的，這種反應(yīng)就稱為

4、二級(jí)反應(yīng)。半衰期與初濃度成反比。3. 零級(jí)反應(yīng)凡是反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度無關(guān)而受它種因素影響而改變的反應(yīng)。半衰期與初始濃度成正比。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,二、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速率的影響,（一）中間絡(luò)合物學(xué)說,1903年，Henri用蔗糖酶水解蔗糖的實(shí)驗(yàn),在低底物濃度時(shí), 反應(yīng)速度與底物濃度成正比，表現(xiàn)為一級(jí)反應(yīng)特征。隨著底物濃度的增加, 反應(yīng)速度不再按正比升高，反應(yīng)表現(xiàn)為混合級(jí)反應(yīng)。當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到一定值，反應(yīng)

5、速度達(dá)到最大值（Vmax），此時(shí)再增加底物濃度，反應(yīng)速度不再增加，表現(xiàn)為零級(jí)反應(yīng)。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,酶與底物的中間絡(luò)合物學(xué)說（Henri和Wurtz）,S+E ES P+E,,中間產(chǎn)物假說證據(jù)： （1）ES復(fù)合物已被電子顯微鏡和X射線晶體結(jié)構(gòu)分析直接觀察到。（2）酶和底物的光譜特性在形成ES后發(fā)生變化。（3）酶的物理性質(zhì)經(jīng)常在形成ES后發(fā)生變化。（4）已分離得到ES復(fù)合

6、物。（5）平衡透析時(shí)，底物濃度在半透膜內(nèi)外不等。,（二）酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程式,1.米氏方程式的推導(dǎo),推導(dǎo)原則：從酶被底物飽和的現(xiàn)象出發(fā)，按照 “穩(wěn)態(tài)平衡”假說的設(shè)想進(jìn)行推導(dǎo)。,米氏方程:,米氏常數(shù):,米氏方程的推導(dǎo),令：,將（4）代入（3），則：,[ES]生成速度：,，[ES]分解速度：,即：,則：,由于酶促反應(yīng)速度由[ES]決定，即,將（2）代入（1）得：,(3),當(dāng)酶反應(yīng)體系處于

7、恒態(tài)時(shí)：,當(dāng)[Et]=[ES]時(shí)，,酶反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系曲線,當(dāng)[S] <<Km時(shí),當(dāng)[S]＞＞Km時(shí),當(dāng)[S]=Km時(shí),本條件可準(zhǔn)確測(cè)定酶活力,Km的物理意義,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,2.動(dòng)力學(xué)參數(shù)的意義,（1）米氏常數(shù)的意義,a.不同的酶具有不同Km值，它是酶的一個(gè)重要的特征物理常數(shù),只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與其濃度無關(guān)。b.Km值只是在固定的底物，一定的溫度和pH條件下，一定的緩沖體系中測(cè)定的，不

8、同條件下具有不同的Km值。c.Km值表示酶與底物之間的親和程度：Km值大表示親和程度小，酶的催化活性低; Km值小表示親和程度大,酶的催化活性高。（同一種酶有幾種底物就有幾個(gè)Km值，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物） 一般情況下，1/Km可以近似地表示酶對(duì)底物的親和力大小， 1/Km愈大，表明親和力愈大。,所以1/Km表示形成ES的趨勢(shì)大小,特例： Km=K2/K1=Ks(在K3??K1，K2時(shí)),d.

9、Km與Ks Km不等于Ks。在K3<<K1、K2時(shí)， Km看作Ks，也只有此時(shí)1/Km 才可以近似表示酶與底物結(jié)合的難易程度。 e. Km與Km? 無抑制劑時(shí)，ES的分解速度與形成速度的比值符合米氏方程，為Km; 而有抑制劑時(shí)發(fā)生變化，則不符合米氏方程，為Km? 。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,f.Km和米氏方程的實(shí)際應(yīng)用 若已知某個(gè)酶的Km值，可以計(jì)算在某一個(gè)底物濃度時(shí)，反應(yīng)速度相當(dāng)于最大反應(yīng)速度的百

10、分率。g.Km可以幫助推斷某一反應(yīng)的方向和途徑,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（2）Vmax和k3(kcat)的意義,在一定的酶濃度下，Vmax是一個(gè)常數(shù)，它只與底物的種類及反應(yīng)條件有關(guān)。,當(dāng)[S]很大時(shí)，Vmax=K3 [E],K3代表酶被底物飽和時(shí)每秒鐘每個(gè)酶分子轉(zhuǎn)換底物的分子數(shù)，稱為轉(zhuǎn)換數(shù)（或催化常數(shù)，Kcat）， 表明酶的最大催化效率。,轉(zhuǎn)換數(shù)的倒數(shù)即為催化周期：一個(gè)酶分子每催化一個(gè)底物分子所需的時(shí)間。乳糖脫氫酶轉(zhuǎn)

11、換數(shù)為1000/秒，則它的催化周期為10-3秒,（3） Kcat/Km 的意義,在生理?xiàng)l件下， [S]/Km=0.01～1.0,[S]<<Km 時(shí)：,Kcat/Km的上限是K1，即生成ES復(fù)合物的速度(酶促反應(yīng)的速度不會(huì)超過ES的形成速度K1，在水相中不會(huì)超過108～109）,衡量酶催化效率的參數(shù)：即其大小可以比較不同酶或同一種酶催化不同底物的催化效率,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,只有Kcat/Km可以客觀地比較

12、不同的酶或同一種酶催化不同底物的催化效率,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,3.利用作圖法測(cè)定Km和Vmax值,（1） Lineweaver-Burk  雙倒數(shù)作圖法米氏方程的雙倒數(shù)形式：,基本原則：將米氏方程變化成相當(dāng)于y=ax+b的直線方程，再用作圖法求出Km。,1 Km 1 1 — = —— . — + ——

13、 v Vmax [S] Vmax,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（2） Eadie-Hofstee 作圖法,v～v/[S]作圖法,,,,v,,Vmax,,-Km,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（3） Hanes-Woolf 作圖法,1 Km 1 1 — = —

14、— . — + —— v Vmax [S] Vmax,在,兩邊均乘以[S]：,以 ～[S]作圖,,,,,,-Km,,[S],（4）Eisenthal 作圖法,（5）Hill 作圖法,（寡聚酶）,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（三）多底物的酶促反應(yīng),1.多底物酶促反應(yīng)按動(dòng)力學(xué)機(jī)制分類,①有序反應(yīng),只有Leading substrate (領(lǐng)先底物A)首

15、先與酶結(jié)合，然后B才能與酶結(jié)合，形成的三元復(fù)合物EAB（ternary complex)轉(zhuǎn)變?yōu)镋PQ，B 的產(chǎn)物P先釋放，A的產(chǎn)物Q后釋放?！镌谌鄙貯時(shí)，B不能與E結(jié)合,E+A+B→AEB→PEQ→E+P+Q,（1）序列反應(yīng),2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,A與其產(chǎn)物Q相互競(jìng)爭(zhēng)地結(jié)合E，但A和B互不竟?fàn)幏磻?yīng)的總方向決定于A、Q的濃度和反應(yīng)的平衡常數(shù),NAD＋ 與NADH相互競(jìng)爭(zhēng)E上的NAD＋結(jié)合部位,②隨機(jī)反應(yīng),底物A、B

16、與酶結(jié)合的順序是隨機(jī)的，形成的三元復(fù)合物AEB → QEP，產(chǎn)物P、Q的釋放順序也是隨機(jī)的。,限速步驟是AEB → QEPA與Q相互競(jìng)爭(zhēng)E上的底物結(jié)合部位A，B 與P相互競(jìng)爭(zhēng)E上的底物結(jié)合部位B反應(yīng)的總方向決定于A、B、Q、P的濃度和反應(yīng)的平衡常數(shù),（2）乒乓反應(yīng),底物A先與E結(jié)合成AE二元復(fù)合物，AE → PF（修飾酶形式），釋放第一個(gè)產(chǎn)物P，接著底物B與F形成FB，F(xiàn)B →EQ，釋放第二個(gè)產(chǎn)物Q。A與Q 競(jìng)爭(zhēng)自由酶形式E ，B

17、與P競(jìng)爭(zhēng)修飾酶形式F。整個(gè)反應(yīng)歷程中只有二元復(fù)合物形式，沒有三元復(fù)合物形式。,2.雙底物反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程,（1）乒乓機(jī)制的動(dòng)力學(xué)方程,KmA： [B]達(dá)到飽和濃度時(shí)A的米氏常數(shù)KmA′： A的表觀米氏常數(shù)Vmax：[A][B]都達(dá)到飽和濃度時(shí)的最大反應(yīng)速度,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,★乒乓機(jī)制的動(dòng)力學(xué)曲線是兩組平行直線★表觀米氏常數(shù)KmA′（KmB′）隨[B]（ [A]）濃度的增大而增大★表觀最大反應(yīng)速度Vmax

18、′隨[B]（[A]）的增大而增大,（2）序列機(jī)制的底物動(dòng)力學(xué)方程,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,★序列機(jī)制的動(dòng)力學(xué)曲線是兩組相交直線（交于X軸負(fù)側(cè)）★交點(diǎn)在X軸：表觀KmA′（KmB′）不隨[[B]（[A]）濃度變化而變化（ KmA′= KmA 、 KmB′= KmB）★交點(diǎn)在X軸上：表觀KmA′（KmB′）隨[[B]（[A]）濃度的增加而減小★交點(diǎn)在X軸下：表觀KmA′（KmB′）隨[[B]（[A]）濃度的增加而增

19、大★表觀最大反應(yīng)速度Vmax′隨[B]（[A]）的增大而增大,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,三、酶的抑制作用,變性作用(denaturation)：抑制作用(inhibiton)：使酶活力下降或喪失但并不引起酶蛋白變性變性劑沒有選擇性抑制劑有不同程度的選擇性研究抑制劑對(duì)酶的作用有重大的意義：（1）藥物作用機(jī)理和抑制劑型藥物的設(shè)計(jì)與開發(fā)（2）了解生物體的代謝途徑，進(jìn)行人為調(diào)控或代謝控制發(fā)酵（3）通過抑制劑試驗(yàn)

20、研究酶活性中心的構(gòu)象及其化學(xué)功能基團(tuán)，不僅可以設(shè)計(jì)藥物，而且也是酶工程和化學(xué)修飾酶、酶工業(yè)的基礎(chǔ),2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,,,（一）抑制程度的兩種表示方法,1、相對(duì)活力,★相對(duì)活力分?jǐn)?shù) (殘余活力),★相對(duì)活力百分?jǐn)?shù)*100%,2、抑制率,★抑制分?jǐn)?shù) （被抑制活力）,★抑制百分?jǐn)?shù),2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（二）抑制作用的類型,1、不可逆的抑制作用抑制劑與酶活性中心（外）的必需基團(tuán)共價(jià)結(jié)合，使酶

21、的活性下降，無法用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而使酶復(fù)活。,2、可逆的抑制作用 抑制劑與酶蛋白非共價(jià)鍵結(jié)合，可以用透折、超濾等物理方法除去抑制劑而使 酶復(fù)活。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（1）競(jìng)爭(zhēng)性抑制（Competitive inhibition） 抑制劑具有與底物類似的結(jié)構(gòu)，競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，并與酶形成可逆的EI復(fù)合物，阻止底物與酶結(jié)合?？梢酝ㄟ^增加底物濃度而解除此種抑制。,2006-1-7,上海大學(xué)

22、生命科學(xué)學(xué)院,（2）非競(jìng)爭(zhēng)性抑制（noncompetitive inhibition）底物和抑制劑可以同時(shí)與酶結(jié)合，但是，中間的三元復(fù)合物ESI不能進(jìn)一步分解為產(chǎn)物，因此，酶的活性降低。抑制劑與酶活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，其結(jié)構(gòu)可能與底物無關(guān)。不能通過增加底物濃度的辦法來消除非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（3）反競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶只有在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合。E+S→ES+I →ESI≠ P常見于

23、多底物的酶促反應(yīng)中,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（三）可逆抑制作用與不可逆抑制作用的鑒別,1、通過透析、超濾、凝膠過濾等2、通過v-E速度曲線,,,[E],v,,1,,2,,3,(1) 反應(yīng)體系中不加I。,(2) 反應(yīng)體系中加入一定量的不可逆抑制劑。,(3)反應(yīng)體系中加入一定量的可逆抑制劑。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,,,,,,[I ]增高→,,,,,,[I ]增高,,3、通過可逆抑制劑的動(dòng)力學(xué)曲線可以區(qū)分三

24、種可逆抑制作用,（四）可逆抑制作用動(dòng)力學(xué),1、競(jìng)爭(zhēng)性抑制,動(dòng)力學(xué)方程：,（Ki為EI的解離常數(shù)）,★Vmax不變; Km變大，而且隨[I]濃度的增大而增大。,相對(duì)活力：,抑制分?jǐn)?shù)：,★抑制程度決定于[I]、[S]、Km和Ki,2、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制,動(dòng)力學(xué)方程：,,,★Km不變，Vmax降至Vmax/（1+[I]/Ki）,相對(duì)活力：,抑制分?jǐn)?shù)：,★抑制程度決定于[I]和Ki ，與底物的Km和[S]無關(guān),3、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制,動(dòng)力學(xué)方程：,,★Km

25、及Vmax都變小,相對(duì)活力：,抑制分?jǐn)?shù)：,★抑制程度決定于Km、Ki、[S]、[I],2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,可逆抑制的動(dòng)力學(xué)比較,抑制類型 Vmax變化 Km變化無抑制劑 / /競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 不變 變大非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 變小 不變 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 變小 變小,2

26、006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（五）一些重要的抑制劑,1、不可逆抑制劑：,（1）非專一性不可逆抑制劑 與酶的活性中心以及活性中心外的某一類或幾類必需基團(tuán)反應(yīng),①有機(jī)磷的?；锒惐柞７―FP，神經(jīng)毒氣）和許多有機(jī)磷農(nóng)藥。抑制機(jī)理：與蛋白酶及酯酶活性中心Ser的—OH形成磷脂鍵。毒理：強(qiáng)烈抑制乙酰膽堿脂酶（神經(jīng)毒劑）。  解毒劑：PAM（解磷定）可以把酶上的磷?；鶊F(tuán)除去。,2006-1-7,

27、上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,②有機(jī)汞、有機(jī)砷化合物抑制機(jī)理：使酶的巰基烷化毒理：主要與還原型硫辛酸輔酶反應(yīng)，抑制丙酮酸氧化酶系統(tǒng)。解毒劑：二巰基丙醇（BAL）、Cys、GSH等過量的巰基化合物。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,③重金屬 Ag、Cu、Hg、Cd、Pb能使大多數(shù)酶失活，EDTA可解除。④、烷化物★含鹵素的烷化物（碘乙酸、碘乙酰胺、鹵乙酰苯等）常用于鑒定酶中巰基。⑤氰化物、硫化物、CO與含鐵卟啉的

28、酶中的Fe2+結(jié)合，阻抑細(xì)胞呼吸,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,⑥青霉素不可逆抑制糖肽轉(zhuǎn)肽酶⑦還原劑巰基乙醇、二硫蘇糖醇等巰基試劑還原酶的二硫鍵、含活潑雙鍵試劑（與—ＳＨ、—ＮＨ２反應(yīng)）Ｎ—乙基順丁烯二酰亞胺 ⑧親電試劑四硝基甲烷，可使Tyr硝基化。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（2） 專一性不可逆抑制劑此類抑制劑僅僅和某一種酶的活性部位的必需基團(tuán)反應(yīng)。,①Ks型不可逆抑制劑（親

29、和標(biāo)記試劑，親和修飾試劑）具有與底物相似的結(jié)構(gòu)，同時(shí)還帶有一個(gè)能與酶活性中心或活性中心外的必需基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)的活潑基團(tuán)。專一性程度取決于它與活性中心及活性中心外的的Ks之比。胰乳蛋白酶的最佳底物：對(duì)-甲苯磺酰-L-苯丙氨酸甲酯Ks型不可逆抑制劑：對(duì)－甲苯磺酰-L-苯丙氨酰氯甲烷（TPCK）-CH2-Cl與酶活性部位的一個(gè)His-咪唑基距離很近，很易使之烷基化。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,② Kcat型不可逆抑

30、制劑（自殺性底物）具有與底物相似的結(jié)構(gòu)，不僅能與酶結(jié)合，而且潛伏的反應(yīng)基團(tuán)（latent reactive group）能被酶催化而活化，并與酶活性中心必需基團(tuán)進(jìn)行不可逆結(jié)合。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,2、可逆抑制劑,★競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑 許多代謝類似物都是競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，可用作抗菌藥和抗癌藥物?！锘前奉愃幬锛捌渥饔脵C(jī)理對(duì)氨基苯磺酰胺或其衍生物對(duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物，競(jìng)爭(zhēng)性抑制細(xì)菌的二氫葉酸合成酶

31、活性,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,★抑制劑與藥物開發(fā)Kcat型不可逆抑制劑的專一性程度很強(qiáng)，前景廣闊底物類似物型的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑最易開發(fā)過度態(tài)底物類似物型藥物最具價(jià)值(高效\特異),2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,,四、溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響,（一）最適溫度及影響因素 溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響有兩個(gè)方面： ①提高溫度，加快反應(yīng)速度。②提高溫度，酶變性失活。 溫度系數(shù)Q10：溫度升高

32、10℃，反應(yīng)速度與原來的反應(yīng)速度之比，大多數(shù)酶的Q10一般為1～2。溫血?jiǎng)游锏拿?，最適溫度35℃～40℃，植物酶最適溫度40℃～50℃，細(xì)菌Taq DNA聚合酶70℃。最適溫度不是酶的特征常數(shù)，它與底物種類、作用時(shí)間、pH、離子強(qiáng)度 等因素有關(guān)。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,（二）酶的穩(wěn)定性溫度在某一時(shí)間范圍內(nèi)，酶活性不降低的最高溫度稱該酶的穩(wěn)定性溫度。 酶濃度高、不純、有底物、抑制劑和保護(hù)劑會(huì)使穩(wěn)定性

33、溫度增高。酶的保存：①液體酶制劑可以利用上述5種因素中的幾種，低溫短暫保存。②凍干粉可在低溫冰箱中較長(zhǎng)期保存。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,五、pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響,1. pH影響酶活力的因素①影響酶蛋白構(gòu)象，過酸或過堿會(huì)使酶變性。②影響酶和底物分子解離狀態(tài)，尤其是酶活性中心的解離狀態(tài)，最終影響ES形成。③影響酶和底物分子中另外一些基團(tuán)解離，這些基團(tuán)的離子化狀態(tài)影響酶的專一性及活性中心構(gòu)象。,2006

34、-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,2．酶的最適pH和穩(wěn)定性pH最適pH：使酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大時(shí)的介質(zhì)pH。 最適pH與底物種類、濃度及緩沖液成分有關(guān)。,★雖然大部分酶的pH—酶活曲線是鐘形，但也有半鐘形甚至直線形。,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,六、激活劑對(duì)酶促反應(yīng)的影響,凡是能提高酶活性的物質(zhì)，都稱為激活劑。1、無機(jī)離子的激活作用（1）金屬離子：K+ 、Na+、Mg2+ 、Zn2+、Fe2+ 、Ca2+

35、（2）陰離子：Cl-、Br-、PO43-（3）氫離子★不同的離子激活不同的酶?！锊煌x子之間有拮抗作用和可替代作用，如Na+與K+、Mg2+與Ca2+之間常常拮抗，但Mg2+與Zn2+?？商娲??！锛せ顒┑臐舛纫m中，過高往往有抑制作用，1～50mM,2006-1-7,上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,2、簡(jiǎn)單有機(jī)分子的激活作用①還原劑（如Cys、還原型谷胱甘肽）能激活某些活性中心含有—SH的酶。②金屬螯合劑（EDTA）能去除酶中重