聚乙二醇高效水解菌的分離、鑒定及其工程化應(yīng)用.pdf

1、從長期受聚乙二醇污染的土壤中分離得到一株水解聚乙二醇，但不能以聚乙二醇為唯一碳源生長的菌株。根據(jù)其生理生化特性，結(jié)合菌株的16S rRNA基因序列同源性分析，將該菌株初步鑒定為Achromobacter sp.，并命名為PG-3。
　　 菌株P(guān)G-3對葡萄糖和乙醛酸碳源利用較高，對氯化銨和酵母膏氮源利用率高;菌株最適生長溫度為35℃，低溫和高溫生長緩慢;pH值在4.0～9.0之間都能生長較好，其中pH值8.0時最佳;通氣量對菌株

2、的生長影響很小;菌株在NaC1濃度在0～10g/L之間均能較好生長，當(dāng)濃度達到20g/L以上時基本不能生長;菌株P(guān)G-3對四環(huán)素和氯霉素有抗性。
　　 提取菌株P(guān)G-3的粗酶結(jié)果表明，聚乙二醇水解酶為誘導(dǎo)酶，PEG1000誘導(dǎo)效果最佳。通過測定聚乙二醇兩端羥基總摩爾數(shù)的變量，對聚乙二醇水解酶特性進行了初步研究，結(jié)果表明:該酶的最適溫度為40℃，最適作用pH值為8.0，Cu2+、Zn2+對酶有抑制作用;以PEG1000為底物，得到

3、聚乙二醇米氏常數(shù)(Km)為3.97 mmol/L，最大酶促反應(yīng)速率（Vmax）為68.03μmol/ml·min。菌株P(guān)G-3分泌的聚乙二醇水解酶對分子量400-1500水解效率較高，其中PEG800最佳。
　　 在采自能降解聚乙二醇的活性污泥中接種0.04％的菌株P(guān)G-3，能有效提高系統(tǒng)整體的處理效果，其混合菌落的最佳氮磷投加比例為COD∶N∶P=800∶5∶1。在接種0.4g/L菌株P(guān)G-3、5g/L活性污泥的反應(yīng)器中，控制

4、進水COD濃度5000mg/L，當(dāng)HRT=8d時，出水COD濃度6天后基本穩(wěn)定在450mg/L左右，可以達到《污水排入城市下水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》(CJ3082-1999)排放要求;當(dāng)HRT=15d時，出水COD濃度7天后基本穩(wěn)定在90mg/L左右，可以達到《污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB8978-2002)中的一級標(biāo)準(zhǔn);當(dāng)HRT=25d時，當(dāng)HRT=25d時，出水COD濃度7天后基本穩(wěn)定在60mg/L以內(nèi)，可以達到《城市污水處理廠污染排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB1