白腐菌產(chǎn)漆酶優(yōu)化及其對稻草秸稈預(yù)處理分析.pdf

1、農(nóng)作物秸稈作為重要的生物質(zhì)能源，對其合理利用能夠有效緩解化石燃料日益減少的問題及其燃燒造成的環(huán)境污染問題。利用白腐菌產(chǎn)漆酶對秸稈進(jìn)行預(yù)處理成為秸稈預(yù)處理方面的主要研究內(nèi)容。
　　目前關(guān)于白腐菌處理秸稈的大多數(shù)研究都集中在將白腐菌接種于秸稈培養(yǎng)基上，利用白腐菌生長過程中分泌的漆酶等對秸稈進(jìn)行預(yù)處理作用。該過程中白腐菌菌體生長與漆酶分泌都未能處于最佳狀態(tài)，本文中通過對白腐菌糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶產(chǎn)酶條件的優(yōu)化，利用白腐菌分泌的高活性漆酶液對稻

2、草秸稈進(jìn)行預(yù)處理作用，分析漆酶對稻草秸稈木質(zhì)素的降解作用，同時對糙皮側(cè)耳漆酶的酶學(xué)特性進(jìn)行探討。
　　在對白腐菌糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶條件進(jìn)行優(yōu)化時，主要采用兩種手段:第一，在糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶培養(yǎng)液中添加天然物質(zhì)，并在此基礎(chǔ)上探索其最佳培養(yǎng)條件;第二，在第一種手段的基礎(chǔ)上，向培養(yǎng)基中小粒徑多孔性物質(zhì)即沸石粉末，為白腐菌糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶探索另外的培養(yǎng)模式，并在該模式下對白腐菌產(chǎn)漆酶的連續(xù)培養(yǎng)條件進(jìn)行可行性分析。在得到高酶活漆酶液后，對漆酶的部分

3、酶學(xué)特性進(jìn)行分析，并研究其對稻草秸稈的降解作用。
　　得出的主要結(jié)論包括:
　　(1)培養(yǎng)基中添加天然成分馬鈴薯浸出液200g/L能有效提高漆酶產(chǎn)量，其最佳培養(yǎng)條件為28℃，150r/min震蕩培養(yǎng)，該條件下漆酶活性可達(dá)到112U/mL，顯著高于常規(guī)培養(yǎng)液的39U/mL;培養(yǎng)基內(nèi)添加0.05g/瓶沸石粉末時，糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶活性可達(dá)到175U/L;
　　(2)對糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶培養(yǎng)基內(nèi)原有菌種進(jìn)行50％比例篩選，并在取出漆

4、酶液后補(bǔ)足相同量的新鮮無菌培養(yǎng)液，能夠在35d的培養(yǎng)周期內(nèi)提供3次高酶活菌液，高于一次性培養(yǎng)方式中45d左右的培養(yǎng)時間實(shí)現(xiàn)連續(xù)培養(yǎng);
　　(3)白腐菌糙皮側(cè)耳所產(chǎn)漆酶的酶學(xué)特性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)溫度、pH值過高或過低不能保證漆酶高活性或高穩(wěn)定性:糙皮側(cè)耳漆酶的最佳保存條件為30℃離心靜置保存，最佳反應(yīng)溫度為40℃，最佳反應(yīng)pH值為5。
　　(4)糙皮側(cè)耳漆酶對稻草秸稈進(jìn)行預(yù)處理實(shí)驗發(fā)現(xiàn):糙皮側(cè)耳漆酶液活性為170U/mL以上時，